荧光染料法RT-LAMP是将荧光染料（如SYBR Green、Syto等）作为荧光标记物，在扩增反应中与双链DNA结合后，荧光信号会增强800-1000倍。使用荧光定量PCR仪在60-65℃恒温条件下进行测试，约30min后即可通过扩增结果判断是否感染病原体。

RT-LAMP Fluorescent Assay Kit(Bst Plus) 是一款能以DNA和RNA为模板进行等温扩增的试剂盒。本试剂盒采用新一代的适配体封闭的Bst Plus DNA Polymerase和耐热Hifair® Ⅲ Reverse Transcriptase、MRI，搭配精细优化的缓冲体系，实现高效快速和高特异性的检测反应，并且可支持室温配置反应体系。

1、通用性：验证20多对动物和人相关的病原靶标，GC含量30%-65%，阳性出峰时间与市面上同类产品相当。

2、特异性：验证多组DNA和RNA靶标，特异性均优于市面同类产品，60min内NTC无非特异起峰，或出峰时间晚于竞品。

3、灵敏度：检测真实样本提取的非洲猪瘟核酸，灵敏度可达15拷贝/反应；检测乙型流感病毒质控品，灵敏度可达10拷贝/反应。

4、稳定性：反复冻融20次性能不受影响；37℃热加速7天性能不受影响；支持室温配置反应体系。

1、扩增性能测试

在多个LAMP和RT-LAMP体系、不同模板浓度下，对比测试翌圣16729、16730和Supplier A的扩增性能，结果显示：在不同体系下，16729、16730的扩增性能与Supplier A无显著差异，且特异性更好。

图1. 不同厂家原料LAMP和RT-LAMP体系扩增性能测试

2、灵敏度测试

       采用真实样本提取的非洲猪瘟样本核酸，以及乙型流感病毒质控品，用数字PCR定量模板浓度后，测试16729的检出情况，检出定义为30min以内起峰，结果显示16729检测灵敏度优异。

图2. 16729不同靶标灵敏度测试

3、稳定性测试

在多个LAMP、RT-LAMP体系中，同时测试16729反复冻融、热加速后的试剂与-20℃正常保存试剂（T0）的性能，结果显示：16729反复冻融20次、37℃ 放置7天后，阳性检出不受影响，且无非特异扩增，产品稳定性好。

图3. 16729反复冻融和热加速稳定性测试

-25~-15℃保存，有效期 1 年。D 组分需要避光保存。