产品简介
YeaCellTM Single Cell Clean up Buffer是适用于YeaCellTM Single Cell Clean up Kits(Yeasen Cat#12521或其他等效产品)的破油纯化试剂。
组分信息
组分名称 |
12523ES08 |
12523ES24 |
12523ES96 |
Clean up Buffer |
1500 μL |
4.5 mL |
18 mL |
储存条件
2~8℃保存,有效期1年。
使用说明
以YeaCellTMSingle Cell 3ʹ RNA-seq Kit(Yeasen Cat#12520)为例,获得的油包水乳浊液(GEM)逆转录后需进行下述操作。
1)加入125 μL Recovery Agent(Yeasen Cat#12525ES或10×Genomics)到样品孔中,不要吹打或者震荡,静置5 min后吸弃125 μL下层油相。
2)参照表1准备Dynabeads Cleanup Mix(提前将Dynabeads MyOne SILANE磁珠由冰箱中取出,室温平衡至少30 min,配制80%乙醇)。
表1 Dynabeads Cleanup Mix配制
名称 |
体积 (μL) |
Cleanup Buffer |
182 |
Dynabeads MyOne SILANE |
8 |
Reducing Agent |
5 |
Nuclease-free Water |
5 |
Total |
200 |
3)Dynabeads Cleanup Mix涡旋混匀后加入到上述GEM样品中,枪头吹打10次。
4)室温孵育10 min,间隔5 min用枪头吹打混匀。
5)室温孵育10 min结束后,将样品置于磁力架上,待液体完全澄清后吸弃上清。
6)保持PCR管始终置于磁力架中,加入200 μL新鲜配制的80%乙醇漂洗磁珠,室温孵育30 sec后,小心移除上清。
7)重复6)一次。
8)保持PCR管始终置于磁力架中,开盖空气干燥磁珠(1 min)。
Ver. CN20240529