产品简介

 

YeaCell^TM单细胞纯化试剂盒包括单细胞乳浊液纯化试剂、cDNA纯化磁珠以及DNA纯化分选磁珠。本试剂盒中的磁珠在回收核酸方面可实现更高的灵敏度和更好的性能，获得的核酸产量高，稳定性强，均一性好。

 

组分信息

 

组分编号		组分名称	12521ES02	12521ES04	12521ES08	12521ES96
BOX-I	12521-A	Dynabeads MyOne SILANE	16 μL	32 μL	64 μL	768 μL
	12521-B	Cleanup Buffer	375 μL	750 μL	2×750 μL	18 mL
	12521-C	cDNA Clean Beads	120 μL	240 μL	480 μL	5.76 mL
	12521-D	DNA Clean Beads	400 μL	800 μL	2×800 μL	19.2 mL
BOX-II	12521-E	Reducing Agent	100 μL	200 μL	400 μL	3×960 μL

 

储存条件

 

Box I:2~8℃保存,Box II-25℃~ -15℃保存。有效期1年。

 

自备材料 (Other Material)

 

1. 胶珠：10×Genomics或其他等效产品。
2. Oil、破油试剂：YeaCell^TM Recovery Agent (Cat#12525)或10×Genomics芯片上带的试剂及其他等效产品。
3. 芯片：10×Genomics，Chromium Next GEM Chip G Single Cell Kit及其他等效芯片。
4. Index：翌圣，YeaCell^TM UDI Primer kit for Illumina® (Cat#12522)及其他等效产品。
5. 仪器：10×Genomics，Chromium Controller及其他等效微流控设备。
6. 扩增产物质检：Agilent Bioanalyzer 2100、Qsep100（Bioptic）。
7. Qubit定量试剂及仪器：1×dsDNA HS Assay Kit (Yeasen Cat#12642)及其他等效产品。
8. 其他材料：无水乙醇、灭菌超纯水； 200 μL低吸附PCR管、200 μL低吸附枪头、磁力架。

 

使用方法

 

1.乳浊液破油纯化

以YeaCell^TMSingle Cell 3ʹ RNA-seq Kit（Yeasen Cat#12520）为例，获得的油包水乳浊液（GEM）逆转录后需进行下述操作。

1）加入125 μL Recovery Agent（10×Genomics）到样品孔中，不要吹打或者震荡，静置5min后吸弃125 μL下层油相。

注：Recovery Agent与Reducing Agent名称相近，但是用处相差较大，需要注意不能弄混淆。

2）参照表1准备Dynabeads Cleanup Mix（提前将Dynabeads MyOne SILANE磁珠由冰箱中取出，室温平衡至少30 min，配制80%乙醇）。

表1 Dynabeads Cleanup Mix配制

名称	体积 (μL)
Cleanup Buffer	182
Dynabeads MyOne SILANE	8
Reducing Agent	5
Nuclease-free Water	5
Total	200

3）Dynabeads Cleanup Mix涡旋混匀后加入到上述GEM样品中，枪头吹打10次。

4）室温孵育10min，间隔5min用枪头吹打混匀。

5）参照表2准备Elution Solution I，涡旋混匀后瞬时离心。

 

 

Ver. CN20240822