乙酰胆碱转移酶(ChAT)比色法测定试剂盒 Choline Acetyltransferase Assay Kit(Colorimetric Method)

Choline Acetyltransferase Assay Kit,Colorimetric Method 乙酰胆碱转移酶（ChAT）测定试剂盒，比色法

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产品介绍

本试剂盒基于比色法，以乙酰辅酶A和胆碱为底物，在ChAT的作用下，反应的生成物与显色剂结合，通过在324 nm处测定吸光度来计算ChAT的活力。适用于组织样本等的ChAT活性的测定，为研究神经系统功能提供重要参数。

产品信息

货号	60439ES40
规格	40 T
检测范围	0.01-1.2 U/mL

组分信息

组分编号	组分名称	装量	储存条件	备注
60439ES-A	试剂一	液体 6 mL×1瓶	2℃～8℃	Part1
60439ES-B	试剂二	粉剂×1支	-25℃～-15℃	Part2
60439ES-C	试剂三	粉剂×1支	-25℃～-15℃	Part2
60439ES-D	试剂四	液体×1支	2℃～8℃	Part1
60439ES-E	试剂五	液体×1支	2℃～8℃	Part1
60439ES-F	试剂六	液体×1支	2℃～8℃	Part1
60439ES-G	试剂七	液体×1支	2℃～8℃	Part1

备注：

1）试剂一室温低时会有结晶析出，测试前37℃水浴至澄清。

2）试剂二临用前加220 μL的蒸馏水，充分溶解；用不完的试剂-25℃～-15℃以下保存。

3）试剂三临用时每支加双蒸水440 μL，用不完的试剂-25℃～-15℃以下保存。

4）试剂四临用前每支用双蒸水1:1 稀释，2℃～8℃保存。

产品特色

应用案例

使用说明

1.仪器试剂准备

可调324 nm波长的紫外光分光光度计、1 cm光径石英比色皿，涡旋混匀器，离心机，37℃水浴锅，蒸馏水，生理盐水，蛋白测定试剂。

2.样本前处理

10%匀浆液的制备：准确称取组织重量，按重量（g）：体积(mL)=1：9 的比例，加入 9 倍体积的生理盐水，2500转/分，离心10分钟，取上清液，再用生理盐水2倍稀释后测定。

3.操作表

试剂	测定管	对照管
试剂一(μL)	105	105
试剂二(μL)	5	5
试剂三(μL)	10	10
试剂四(μL)	10	10
试剂五(μL)	10	10
试剂六(μL)	10	10
混匀，37℃水浴预温5分钟
5%的组织匀浆上清	25	(煮沸的匀浆上清)25
混匀，37℃水浴20分钟，100℃沸水水浴2分钟终止反应
蒸馏水(μL)	425	425
混匀，4000转/分，离心10分钟后取上清进行显色反应
上清(μL)	500	500
试剂七(μL)	10	10
混匀，静置15分钟，在324 nm处，用1 cm光径，2 mm内径的石英比色皿，蒸馏水调零，测定各管的吸光度值

4.计算公式

酶单位定义：在pH7.2条件下，37℃时每克组织(或每克组织蛋白)每分钟转移1 μmol乙酰基给胆碱的能力定义为一个酶活力单位。

1）以组织质量计算

ChAT^{活力(U/g组织) = (A测定-A对照) × V反总 ÷ (1.98×10-2 × T × V样 × W) × V样总}

2）以蛋白含量计算：

ChAT^{活力(U/mgprot) = (A测定-A对照) × V反总 ÷ (1.98×10-2× T × V样 × Cpr)}

^{其中：T：表示反应时间，20分钟；V反总：表示反应体系总体积，600 μL；1.98×10-2：表示呈色物消光摩尔系数1.98×10-5×比色光径(1cm)×1000；V样：表示取样量，25 μL；W：表示样本质量，g；V样总：表示提取液总体积，mL；Cpr：表示组织匀浆蛋白浓度，mgprot/mL（prot指蛋白）。}

存储条件

2℃～8℃保存，有效期3个月。

COA

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