MolPure® Flash Cell/Tissue Total RNA Kit 采用MolPure® DNA清除/RNA 吸附通用柱技术和和新型的溶液体系,适用于从多种新鲜或冻存的动物组织或培养细胞中高效率提取高纯度、高质量的总RNA。提取过程不需要用到有毒的酚、氯仿、β-巯基乙醇等有机溶剂,也不需要用到耗时的异丙醇或乙醇沉淀。操作简便,15min 即可完成动物组织或细胞(10-30mg 动物组织或 (1-10)×106 个动物细胞)总RNA的提取。试剂盒内的 MolPure® DNA 清除/RNA 吸附通用柱可轻松过滤除去基因组DNA和高效吸附RNA。提取的总RNA 纯度高,可用于 RT-PCR、qPCR、分子克隆和RNase 保护分析等多种分子生物学实验。
快速:15 min之内完成单个样本提取。
RNA完整度好:独特的配方,确保RNA在整个提取过程中保持良好的完整性。
适用范围广:适用于原代细胞、蛋白含量高的肌肉组织、脂肪含量高的脑组织、及鱼虾等。
高效去除gDNA:DNA清除/RNA 吸附通用柱可以30 sec过滤清除gDNA。
图 用19221进行不同样本的RNA提取并检测,图中P-1、P-2、H-1、H-2、H-3、H-4、H-5、H-6、fH-4 分别代表肝脏、肌肉、肾脏、脾脏、大脑、皮肤、虾、泥鳅和蟹肉样本。结果显示:不同样本提取后28S与18S的比值约为 2:1,且条带完整清晰,提取的RNA完整度好。
室温避光保存,有效期2年。2-8℃可保存更长时间。
Q:260/280 的比值只有 1.6 几?
A:若 OD260/OD280<1.6:有可能有蛋白质残留,氨基酸残基中的苯环在 280nm 处有吸收从而造成比值偏低,当然也有可能是其他苯环物质(酚类)造成的。可以用蛋白酶 k 进行处理;加入变性剂使蛋白变性。或者用氯仿进行抽提。
Q:19221 提取脂肪可以么?
A:脂肪不好提取,可以先离心后再过柱,样本用量不要过大,脂肪组织不好研磨。而且提取的浓度或者纯度不会好,推荐传统方式。
Q:样本用 trizol 裂解了,可以用这个吗?
A:可以,就是把 trizol 代替我们的裂解液,其他步骤不变。
Q:SPL 蛋白液有结晶析出。有影响吗?
A:没有影响,这是是胍盐析出,蒸发的问题,有析出说明饱和了,不影响。
Q:为啥试用装和正式的试剂盒 wash buffer 里加入无水乙醇的倍数不同,这会影响提取的浓度吗?
A:乙醇是用来沉淀核酸的,乙醇多的话容易把更多的核酸沉淀到膜上,即提取浓度会高些,但是相对的,wash buffer 的量是相对少的,这个组分是用来洗脱杂质的,它少了提取的纯度会不好。
Q:样本储存在trizol 里,还能用该试剂盒抽提吗?
A:可以,trizol 充当裂解液使用,其他步骤不变。
Q:LB buffer A2 和BD buffer A2有结晶析出。
A:这两个试剂中含有离液盐,将其放置37℃,晶体溶解后混匀再使用。
Q:说明书中写到可加β-巯基乙醇,加这个目的是什么?能不加吗?
A:用于变性RNase,破坏二硫键,防止RNA降解。如果提取的RNA质量好可以不加。
Q: 这款提取产品有不适用的组织类型吗?
A: 高脂、高蛋白多糖、高纤维等样本不建议用本产品做提取,比如脂肪组织,脑组织,心脏组织,软骨组织等。
Q:19221和19211有什么区别?
A:19211是基于Trizol裂解和离心柱纯化的原理,适应于多种类型的样本,19221是柱式提取试剂盒,仅对细胞,组织进行提取。
Q: 19221和19231有什么区别?
A: 19221是对于细胞和组织,19231仅针对细胞进行核酸提取。另外针对的细胞量不一样,19231适应于细胞数< 1×106情况,19221适合(5-10)×106个细胞。
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