GCNF-Luc萤光素酶报告基因质粒（GCNF luciferase reporter plasmid）是翌圣生物自主研发的用于检测GCNF转录活性水平为目的的报告基因。GCNF(germ cell nuclear factor)是核受体超家族成员之一，GCNF主要功能是抑制基因表达,它可以促进Oct-4基因的甲基化,使Oct-4发生基因沉默.GCNF基因高度表达在发育中的神经系统、胎盘、发育中的生殖细胞.GCNF基因表达具有的时空特性,提示GCNF在胚胎发生以及配子形成过程中发挥着重要作用.

GCNF-Luc萤光素酶报告基因质粒主要应用于Germ Cell Nuclear Factor信号通路、药物研究、相关基因的调控和功能的研究。

pGCNF-Luc是翌圣生物改造后的哺乳动物真核表达载体，在其多克隆位点插入了多个GCNF结合位点，可以高灵敏度地检测GCNF的激活水平。同时，对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变，在保持原有功能不变的情况下，增加了质粒的转录因子结合特异性。另外，由于质粒体积减小，使得GCNF报告基因质粒更易于转染。

 

质粒图谱

 

 

 

质粒元件信息

GCNF response element (GCNF)	32-100
Minimal TA promoter (pTA)	129-151
Luciferase reporter gene	183-1845
SV40 late poly(A) signal	1880-2101
SV40 early promoter	2149-2567
Synthetic neomycin phosphotransferase(Neor) coding region	2592-3386
Synthetic poly(A) signal	3411-3459
Synthetic Beta-lactamase(Ampr) coding region	4574-5434
Synthetic poly(A) signal/transcriptional pause site	5539-5692

 

运输与保存方法

冰袋运输。-20 ºC保存。保质期1年。

 

使用说明

1) pGCNF-Luc可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。用萤光素酶检测试剂盒或双萤光素酶检测试剂盒进行检测。

2) 首次使用1 µg包装的本产品时，请先取少量本质粒转化大肠杆菌，进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定，或通过测序进行鉴定。

 

注意事项

1）本质粒未经翌圣生物允许不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。

2）为了您的健康，实验操作时请穿实验服和戴一次性手套。

3）本产品仅作科研用途！

4）不提供该质粒序列信息。

 

参考文献

[1] Rajkovic M, et al.  Germ cell nuclear factor relieves cAMP-response element modulator tau-mediated activation of the testis-specific promoter of human mitochondrial glycerol-3-phosphate dehydrogenase. J Biol Chem. 279(50):52493-9 (2004).

[2] Greschik H, et al. Characterization of the DNA-binding and dimerization properties of the nuclear orphan receptor germ cell nuclear factor. Mol Cell Biol. 19(1): 690–703 (1999).

 

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