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产品简介
T4 DNA聚合酶又名T4 gp43，是来源于T4噬菌体的DNA聚合酶，在模板以及引物存在的条件下，可以沿5'-3'方向催化合成DNA。本品T4 DNA polymerase(3'→5' exo-)是通过点突变D219A改造，使其3'-5'核酸外切酶活性大大降低，但保留了完整的聚合酶活性。
产品信息
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货号 |
14462ES70 / 14462ES80 |
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规格 |
200 U / 1,000 U |
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酶活定义 |
一个活力单位即在37℃条件下，30分钟内催化10 nmol dNTP的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量 |
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酶保存液 |
20 mM Tris-HCl，200 mM NaCl，10 mM MgCl2，5mM DTT，50% Glycerol，pH 7.5 |
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浓度 |
5 U/µL |
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失活条件 |
75℃，15 min |
组分信息
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组分编号 |
组分名称 |
14462ES70 |
14462ES80 |
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14462-A |
T4 DNA polymerase (3'→5' exo-) (5 U/μL) T4 DNA聚合酶(3'→5' exo-) (5 U/μL) |
40 µL |
200 µL |
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14462-B |
10×T4 DNA polymerase (exo-) Buffer |
0.2 mL |
1 mL |
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14462-C |
0.1% BSA (1 mg/mL) |
0.2 mL |
1 mL |
产品应用
1.缝隙填充(无缺口平移活性)
2.补平5’突出单链，形成平末端
3.生成无缝克隆中的5’突出端，实现基因和载体的互补配对
储存条件
-25~-15℃保存，有效期2年。
使用说明
补平5'突出的DNA，形成平末端
1.推荐配置应用反应与体系如下：
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组分 |
体积 |
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5'突出DNA |
100 ng-1 µg |
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10×T4 DNA polymerase (exo-) Buffer |
2 μL |
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T4 DNA polymerase (3'→5' exo-) (5 U/μL) T4 DNA聚合酶(3'→5' exo-) (5 U/μL) |
1 μL |
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2mM dNTP |
2 μL |
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0.1% BSA (1 mg/mL) |
2 μL |
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H2O |
Up to 20 μL |
2.37℃反应30 min
3.75℃，15 min失活酶
注意事项
1. 离子强度超过100 mM时活性将被抑制，SH基的还原剂促进活性。
2. 活性易受模板DNA高级结构影响，T4 gene 32 (T4 SSB)蛋白可以显著提高其聚合酶活性。
2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2. 本产品仅用作科研用途！
Ver.CN20240415
