产品描述
Hieff NGS® Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Module是针对Illumina®高通量测序平台文库构建而专业设计的DNA末端修复/A尾添加模块,具有高效、快速、易实现自动化的优势。本产品兼容1 ng-1 μg片段化Input DNA,可在单管内实现片段化DNA的末端补平、5'端磷酸化和3'端加A尾反应,得到5'末端含磷酸基团且3'末端带有dA突出的DNA产物。该产物无需纯化,即可使用Hieff NGS® Fast-Pace DNA Ligation Module(Cat#12607)进行文库构建接头连接反应。
本产品已与Hieff NGS® Fast-Pace DNA Ligation Module(Cat#12607),2×Hieff Canace®Ⅱ High-Fidelity Mix for Library Amplification(Cat#12620)共同用于DNA文库构建,通过Illumina®高通量平台测序验证其有效性。本产品中提供的所有试剂组分均经过严格质检,最高程度保障产品优异性能与批间稳定性。
产品组分
组分编号 |
组分名称 |
24 T |
96 T |
12608-A |
End Repair/dA-Tailing Buffer |
144 μL |
576 μL |
12608-B |
End Repair/dA-Tailing Enzyme |
96 μL |
384 μL |
测序验证
本品与Hieff NGS® Fast-Pace DNA Ligation Module(Cat#12607),2×Hieff Canace® High-Fidelity Mix for Library Amplification(Cat#12620)共同用于DNA文库构建,已通过Illumina®高通量平台测序验证其有效性。
运输与保存方法
冰袋运输。-20℃保存,有效期1年。
注意事项
1. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
2. 本产品仅用作科研用途!
使用方法
1. 将表1中各试剂解冻后,颠倒混匀,置于冰上备用。
2. 于无菌PCR管中配制表1所示反应体系。
表1 末端修复/dA尾添加PCR反应体系
名称 |
体积(μL) |
Fragmented DNA |
x |
End Repair/dA-Tailing Buffer |
6 |
End Repair/dA-Tailing Enzyme |
4 |
ddH2O |
Up to 60 μL |
3. 使用移液器轻轻吹打或振荡混匀,并短暂离心将反应液离心至管底。
4. 将上述PCR管置于PCR仪,设置表2所示反应程序,进行末端修复/dA尾添加反应。
表2 末端修复/dA尾添加PCR反应程序
温度 |
时间 |
热盖105°C |
On |
30°C |
20 min |
72°C |
20 min |
4°C |
Hold |
5. 产物如需纯化,可使用Hieff NGS® DNA Selection Beads(Cat#12601)或AMPure XP Beads(Cat#A63880)或其他等效产品。
HB220728