Hieff NGS® RNA Cleaner

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产品说明书

FAQ

COA

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产品简介  

本试剂盒利用独特的磁珠与缓冲液系统,可以特异性地吸附RNA,有效去除蛋白、盐离子和其它杂质。常用于纯化去除rRNA后的总RNA样本,体外转录的RNA产物,RNA标记产物以及合成的RNA等。纯化后的RNA适用于RNA文库构建、RT-PCR、qRT-PCR、芯片分析、Northern Blot和RNAi等实验。

 

产品信息

货号

12602ES03 /12602ES08 / 12602ES56/ 12602ES75

规格

1 mL / 5 mL / 60 mL / 450 mL

 

 

 

储存条件

2~ 8℃保存,有效期2年。

 

使用说明

所需额外试剂:

100% 乙醇,Nuclease-free水,磁力架,Nuclease-free离心管。

实验前准备:

  1. RNA clean beads 从4 ℃取出,平衡至室温(约30 min)。
  2. 在一个Nuclease free PCR管中,用Nuclease-free水将0.5-5 μg总RNA稀释至50 μL。

RNA纯化:

  1. 颠倒或涡旋振荡使磁珠充分混匀,吸取2×磁珠(100 μL)加入总RNA样品中(50 μL),用移液器吹打6次充分混匀。
  2. 室温孵育5 min,使RNA结合到磁珠上。
  3. 将样品置于磁力架上5 min,待溶液澄清后,小心移除上清。
  4. 保持样品置于磁力架上,加入200 μL新鲜配制的80%乙醇,漂洗磁珠,室温孵育30 s,小心移除上清。

【注】漂洗时使用的80%乙醇需要使用Nuclease-free水新鲜配制,以防止引入RNase酶导致RNA降解。

  1. 重复步骤4,共漂洗2次。
  2. 保持样品始终处于磁力架上,开盖空气干燥磁珠5 min。

【注】磁珠开盖晾干时要避免过分干燥,如果磁珠出现龟裂,则提示磁珠过分干燥,此时RNA的洗脱效率会降低。

  1. 将样品从磁力架上取出,加入12 μL Nuclease-free 水,用移液器吹打6次以充分混匀,室温静置5 min。
  2. 将样品置于磁力架5 min,待溶液澄清后,小心转移上清10 μL至一个新的Nuclease-free PCR管中。

【注】建议转移上清时留2-3 μL液体,以免吸到磁珠影响后续实验。得到的RNA极不稳定,建议尽快进入下一步。若要保存,请置于-80℃保存。

 

注意事项

1. 本产品仅作科研用途

2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

3. 磁珠使用前一定要平衡到室温后混匀,否则可能影响样品的回收效率。

4. 操作过程要严格保证无RNase酶和核酸污染。

5. 80%乙醇需现用现配,否则将影响回收效率。

6. 本试剂盒和其他试剂配套使用时,请按照具体实验说明来进行操作。

 

结果展示

使用总RNA纯化试剂盒纯化前后,RNA样品qRT-PCR Ct值变化

RNA样品

小鼠

拟南芥

检测基因

GAPDH

β-Actin

GAPDH

β-Actin

PP2A

TUB2

纯化前Ct值

12.92

12.36

18.74

18.53

24.33

22.2

纯化后Ct值

12.32

11.89

17.62

17.91

23.38

21.35

【注】使用Hieff NGS® RNA Cleaner可以有效去除影响RT-PCR的抑制剂,让检测结果更加真实。

 

Ver.CN20240408

 

400-6111-883