首页 / ELISA试剂盒 / 产品应用详情

上新 | 操作简单、快速准确!腺相关病毒(AAV)定量检测试剂盒强势登场!

基因治疗作为一种新兴疗法,是向靶细胞引入正常有功能的基因,以纠正或补偿致病基因所产生的缺陷,从而达到治疗疾病的目的。目前大多数基因治疗应用的仍是病毒载体,这些病毒载体经过改造后,已经不具有致病性。广泛应用的病毒载体包括腺病毒载体(ADV)、慢病毒载体(LV)、单纯疱疹病毒载体(HSV)、痘病毒载体(PV)及腺相关病毒载体(AAV)。作为递送基因疗法的有力工具,AAV是目前在研基因疗法项目中应用最为广泛的病毒载体。以AAV载体为代表的基因治疗药物能修正遗传病患者的基因缺陷,给一些遗传性罕见病、神经系统退化性疾病患者带来了希望。

 

AAV的衣壳蛋白以二十面体的构型聚集在一起,在结构上形成刺状突起,这些突起介导与靶向细胞表面蛋白质的相互作用,赋予了不同类型的AAV特异性地靶向不同组织地能力。AAV2是20世纪60年代从腺病毒中发现的首个AAV载体。迄今为止,已经发现了13种原发性AAV血清型和100多种不同的变异体。每种血清型都具有独特的细胞靶向性,可以靶向不同的细胞组织。

 

表1.不同AAV血清型以及它们相互作用的受体类型和组织趋向性

AAV血清

原代受体

共受体

组织特异性

AAV2

肝素

AAV受体、FGFR、LamR、整合素

中枢神经系统、视网膜、肝脏

AAV5

唾液酸

AAV受体、PDGFR

中枢神经系统、眼睛、肺

AAV6

唾液酸、肝素

AAV受体、EGFR

中枢神经系统、肌肉、肺、心脏

AAV8

未知

AAV受体、LamR、

中枢神经系统、肝脏、心脏、眼睛

AAV9

半乳糖

AAV受体、LamR、

中枢神经系统、肝脏、心脏、肌肉

根据AAV滴度测定不同原理,可以将其分为物理滴度测定和生物学滴度测定两大类,生物学滴度包括感染滴度和转导滴度。物理滴度,一般是指基因组滴度或者病毒颗粒滴度(衣壳滴度)。颗粒滴度主要是通过紫外吸光法、ELISA、HPLC等方法来测定,每种方法都有各自的优缺点,其中ELISA因其重现性高、特异性好等特点而得到了广泛的应用,这也是监管部门所建议的滴度测定方法之一。

 

 

 

产品应用

 

翌圣生物推出腺相关病毒定量检测试剂盒,可应用于基因治疗、细胞免疫治疗、干细胞治疗、生物大分子药物治疗等领域的研究,又可应用于基因工程研究等基础科研领域,还可以为基因治疗、细胞免疫治疗的CRO和CDMO企业进行产能赋能。

 

 

 

检测原理

 

以99302ES-AAV2 Titration ELISA Kit为例

99302ES是一种体外酶联免疫吸附测定试剂盒,用于定量测定样本中的AAV2衣壳含量。特异性抗AAV2单克隆抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本,经过孵育,样本中存在的AAV2衣壳与固相抗体结合。洗涤去除未结合的物质后,加入检测抗体孵育结合,经洗涤,再加入酶结合物(Streptavidin-HRP)孵育结合。洗涤后,加入显色底物 TMB,避光显色。颜色反应的深浅与样本中AAV2衣壳的浓度成正比。加入终止液终止反应,在450 nm 波长测定吸光度值。

 

 

 

产品优势

 
  • 准确度高

  • 灵敏度好

  • 精密度高

  • 重复性好

  • 线性范围宽

  • 特异性高

 

 

 

产品数据展示

 
 

标准曲线

 
 

 

 

质控数据

 
 

Test Method

Acceptance Criteria

Test Result

Precision

3.30E+09capsids/ml(OD450nm) CV(n=10)<10%

5.6%

8.25E+08capsids/ml(OD450nm) CV(n=10)<10%

5.7%

2.06E+08capsids/ml(OD450nm) CV(n=10)<10%

5.0%

Accuracy

Recovery:70%-130%

80.9%

Specificity

Different serotypes of AAV was added to the solvent, murine serum, rabbit serum, sheep serum, and E. coli cell supernatant.

There are no cross-reaction between the kit and other serotypes of AAV.

Conforms

Linearity

R2≥99.0%

99.7%

 

 

产品推荐

 

 

产品名称

规格

货号

AAV2 Titration ELISA Kit

96T

99302ES

AAV5 Titration ELISA Kit

96T

99303ES

AAV6 Titration ELISA Kit

96T

99304ES

AAV8 Titration ELISA Kit

96T

99305ES

AAV9 Titration ELISA Kit

96T

99306ES

 

400-6111-883