天然蛋白A(Protein A)是一种发现于金黄色葡萄球菌的细胞壁表面蛋白,天然蛋白G(Protein G)是一种分离自G型或C型链球菌属的细胞表面蛋白,二者功能相似,主要通过与免疫球蛋白(Ig)的Fc区相互作用,可结合大多数哺乳动物的IgG。然而两者结合特异性上有所不同(详细见附录1,蛋白A,G和L对不同物种Ig的结合能力总表),如蛋白G对人IgG3,大鼠IgG2a,绵羊IgG1具有很高的亲和力,但蛋白A对这些Ig结合力很弱。蛋白A,蛋白G常共价偶联在固体载体如琼脂糖珠或丙烯酸树脂小珠上,直接用以做免疫沉淀(IP)或者免疫共沉淀(Co-IP)来进行蛋白功能相关研究,或者直接装在层析柱上来纯化单克隆或者多克隆抗体。
本品在大肠杆菌中产生,重组蛋白A/G由7个IgG 结合结构域 EDABC-C1C3组成,对应于5个蛋白A的IgG结合区和2个蛋白G的IgG结构域。重组蛋白A/G的结合能力比单独的蛋白A或蛋白G更广。重组蛋白A/G中细胞壁结合区、细胞膜结合区和白蛋白结合区已去除,减少了交叉反应和非特异性结合,确保IgG的最大特异性结合。
产品性质
来源 |
E.coli |
分子量 |
Approximately 47.8 kDa with a Cys on N-terminus, a single non-glycosylated polypeptide chain containing 430 amino acids. |
氨基酸序列 |
CNAAQHDEAQ QNAFYQVLNM PNLNADQRNG FIQSLKDDPS QSANVLGEAQ KLNDSQAPKA DAQQNNFNKD QQSAFYEILN MPNLNEAQRN GFIQSLKDDP SQSTNVLGEA KKLNESQAPK ADNNFNKEQQ NAFYEILNMP NLNEEQRNGF IQSLKDDPSQ SANLLSEAKK LNESQAPKAD NKFNKEQQNA FYEILHLPNL NEEQRNGFIQ SLKDDPSQSA NLLAEAKKLN DAQAPKADNK FNKEQQNAFY EILHLPNLTE EQRNGFIQSL KDDPSVSKEI LAEAKKLNDA QAPKEEDSLE GSGSGTYKLI LNGKTLKGET TTEAVDAATA EKVFKQYAND NGVDGEWTYD DATKTFTVTE KPEVIDASEL TPAVTTYKLV INGKTLKGET TTKAVDAETA EKAFKQYAND NGVDGVWTYD DATKTFTVTE |
280 nm 处1个单位DO的浓度 |
1.737 mg/ml |
外观 |
无菌过滤的白色冻干粉末 |
标签 |
无 |
纯度 |
> 96% by SDS-PAGE and HPLC analyses |
内毒素水平 |
< 0.1 EU/μg of protein by the LAL method |
配方 |
无添加剂,冻干 |
复溶 |
蒸馏水或盐水溶解 |
运输与保存方法
冰袋运输。-20℃保存,一年有效期。建议第一次使用时分装冻存,避免反复冻融。
注意事项
附录1. 蛋白A、G和L对不同物种Ig的结合能力总表
Species |
Protein A |
Protein G |
Protein L |
Species |
Protein A |
Protein G |
Protein L |
||
Human |
IgG |
+++ |
+++ |
+++ |
Sheep |
IgG |
+ |
++ |
- |
IgG1 |
++++ |
++++ |
++++ |
IgG1 |
+ |
++ |
- |
||
IgG2 |
++++ |
++++ |
++++ |
IgG2 |
+++ |
+++ |
- |
||
IgG3 |
- |
+++ |
+++ |
Dog |
|
++ |
+ |
NT |
|
IgG4 |
++++ |
++++ |
++++ |
Pig |
|
+++ |
++ |
+++ |
|
IgA |
+ |
- |
+++ |
Rat |
IgG |
+ |
++ |
+++ |
|
IgA1 |
+ |
- |
+++ |
IgG1 |
- |
+ |
+++ |
||
IgA2 |
+ |
- |
+++ |
IgG2a |
- |
++++ |
+++ |
||
IgD |
- |
- |
+++ |
IgG2b |
- |
++ |
+++ |
||
IgE |
++ |
- |
+++ |
IgG2c |
++ |
++ |
+++ |
||
IgM |
+ |
- |
+++ |
IgG3 |
+ |
++ |
NT |
||
Rabbit |
IgG |
+++ |
+++ |
+ |
Mouse |
IgG |
++ |
++ |
+++ |
Cow |
IgG |
+ |
+++ |
- |
IgG1 |
+ |
++++ |
+++ |
|
IgG1 |
+ |
+++ |
- |
IgG2a |
++++ |
++++ |
+++ |
||
IgG2 |
+++ |
+++ |
- |
IgG2b |
+++ |
+++ |
+++ |
||
Cat |
IgG |
+++ |
+ |
NT |
IgG3 |
++ |
+++ |
+++ |
|
Horse |
IgG |
++ |
++++ |
NT |
IgM |
- |
- |
+++ |
|
Goat |
IgG |
+ |
++ |
- |
Chicken |
IgY |
- |
- |
- |
IgG1 |
+ |
+++ |
- |
Monkey |
IgG |
++++ |
++++ |
NT |
|
IgG2 |
+++ |
+++ |
- |
Hamster |
|
+ |
++ |
+++ |
|
Guinea-pig |
IgG1 |
++ |
+ |
NT |
Koala |
|
- |
+ |
NT |
IgG2 |
++ |
+ |
NT |
Llama |
|
- |
+ |
NT |
|
Strong binding (++), medium interaction (+), weak or no interaction (-), not tested (NT) . |
HB230208