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Hieff Unicon® Specific Master Mix for KASP 竞争性等位基因特异性PCR(KASP法)
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产品介绍

本试剂是基于竞争性等位基因特异性聚合酶链式反应(kompetitive allele specific PCR,KASP)技术开发,可用于快速基因分型检测。该方法通过终点荧光扫描对反应结果进行判读,能够精准检测基因点突变、插入或缺失等变异类型,用于快速、准确地进行基因分型检测。

产品特色

1、KASP是一种基于荧光信号的均相(homogeneous)、终点法(end-point)基因分型技术,其理论基础是等位基因特异性PCR(Allele-Specific PCR, AS-PCR)与荧光共振能量转移(FRET)信号系统的巧妙结合。

2、KASP法在整个过程中采用降落PCR的程序,从而保证探针和引物按照预期进行结合,当退火温度高时,引物因为Tm值高,会先与模板进行特异性的结合,然后在Taq酶作用下进行扩增,使得探针扩增的原始模板得到富集,随着退火温度降低,探针开始结合模板,然后产生荧光信号,最终在低于40度情况下通过读取终点的荧光信号来进行SNP分型,保证了该方法很高的分型准确性。

3、KASP法与传统TaqMan探针法中每个SNP位点需要合成特异性荧光探针不同,该方法针对上游引物标签序列合成通用探针,可以与各种不同的基因特异引物配合使用,而不需要针对每个特定的位点进行探针合成,极大降低了实验的试剂成本。

4、KASP在实验操作上满足低、中、高通量基因分型的要求,相比于其他技术,具有一定的灵活性,更容易实现高通量和自动化检测。

应用案例

使用翌圣KASP试剂16976和市面上同类产品,搭配多组引物,同时检测100copies/μL野生型模板(WT模板)、100copies/μL突变型模板(Mut模板)和混合型模板,结果显示两者扩增曲线峰形、Ct值、分型能力无显著差异。

存储条件

1. 保存条件与有效期:本品需避光保存于-20±5℃环境下,有效期为 12 个月,请在保质期内使用。

2. 运输要求:运输时需使用干冰与冰袋共同保温,整体低温运输时间不应超过 5 天。

3. 使用稳定性:应尽量避免试剂反复冻融。

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