MolPure^® DNA Purification Kit采用MolPure^® DNA Column P2和新型的溶液体系，适用于去除PCR反应体系以及各种反应体系（如酶切体系，连接体系等）中的dNTPs，多余的引物，缓冲体系和酶等，也可用作DNA的浓缩和纯化。纯化过程中不需要用到有毒的酚氯仿等有机物抽提，也不需要用到耗时的异丙醇或乙醇沉淀。操作简便，15 min即可完成PCR产物纯化，纯化后的DNA纯度高，可直接用于酶切、连接、转化、测序等后续实验。

 

试剂盒组分

编号	组分名称	19106ES08 (5 T)	19106ES50 (50 T)	19106ES70 (200 T)
19106-A	DNA吸附柱P2 (MolPure® DNA Column P2)	5个	50个	200个
19106-B	2 mL收集管 (2 mL Collection Tube P2)	5个	50个	200个
19106-C	结合液BD (BD Buffer P2)	2.5 mL	25 mL	100 mL
19106-D	漂洗液W* (Wash Buffer*)	1.3 mL	13 mL	50 mL
19106-E	洗脱液 (Elution Buffer)	1 mL	10 mL	20 mL
19106-F	缓冲液AC(AC Buffer P2)	500 µL	5 mL	20 mL

 

运输和保存方法

常温运输。室温保存，有效期12个月。

 

注意事项

1. Elution Buffer不含有螯合剂EDTA，不影响下游酶切、连接等反应。TE（pH=8.0）或者水（pH>7.5）均可以使用，但是DNA的洗脱效率通常要比Elution Buffer低20%左右，注意TE中的EDTA可能影响下游酶切反应，使用时可以适当稀释。

2. 回收纯化的DNA片段一般在100 bp到40 kb之间，过长或者过短片段的回收率会显著下降。

3. 如果待纯化的PCR反应体系中含有非常多的非特异性条带，建议使用MolPure^® DNA Gel Extraction Kit DNA凝胶回收试剂盒(Cat#19101ES)。

4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

5. 本产品仅作科研用途！

 

实验前准备

1. 自备设备和试剂：台式离心机、振荡仪、水浴锅或金属浴，无水乙醇，离心管等。

2. 除特殊指明外，所有的离心步骤均在室温完成，使用可以达到13,000 rpm转速的传统台式离心机。

3. 首次使用前，在漂洗液W^*（19101-E）瓶中加入4倍体积的无水乙醇，充分混匀后使用，并做好标记。如果发现漂洗液W^*由于运输或保管不当造成容量严重不准，请用量筒定容后再加入4倍体积的无水乙醇。每次使用后将瓶盖盖紧，以保持漂洗液W^*中的乙醇含量。

 

操作方法

1. PCR反应结束后，将反应液移至干净的1.5 mL离心管中，加入5倍体积的结合液BD，上下颠倒混匀。

【注】：通常取100 µL的PCR反应液进行产物纯化，若需纯化的PCR反应液不足100µL，请加入ddH2O补足到100 µL。

2.将DNA吸附柱P2装在2 mL收集管中，吸取100μl的缓冲液AC至吸附柱中，12,000 rpm离心1 min，弃掉收集管中的过滤液，将吸附柱重新放回收集管。

3.将步骤1的混合液转移到DNA吸附柱P2中，室温放置1 min，12,000 rpm离心1 min，弃掉收集管中的过滤液。

4.将DNA吸附柱P2放回收集管中，加入600 μL 漂洗液W*，12,000 rpm离心30 s，弃掉收集管中过滤液。

【注】：确保漂洗液W*已添加无水乙醇。

5.加入600 µL漂洗液W*，12,000 rpm室温离心30 s，弃掉收集管中过滤液。

6. 将DNA吸附柱P2放回收集管，空柱12,000 rpm室温离心2 min，室温晾干5 min。以除去残留的漂洗液W*。

7. 将DNA吸附柱P2放入新的离心管（自备）中，在DNA吸附柱G1中央加入50 µL洗脱液，室温放置2 min。然后12,000 rpm离心1min。收集滤液，即为DNA溶液。

【注】：可通过以下方式提高回收产量：①70℃预热洗脱液；②将DNA滤液再次上柱，室温放置2 min后，洗脱。

8. 取2-5 μL进行电泳检测浓度，纯化好的DNA可立即用于后续实验或于-20℃冻存。

 

HB221130