RNase污染无处不在
 

RNase（Ribonuclease，核糖核酸酶）是一类能够催化RNA降解为小分子RNA的核酸酶，广泛存在于真核、原核生物的所有细胞和组织中，通常有极强活性，RNA样本中微量的RNase污染足以导致其完全降解。实验室中RNase污染的主要来源有：

一、外源性污染源：

1）实验中使用的水溶液、反应体系的各组分试剂、枪头等在内的实验耗材；

2）实验大环境的污染，RNase 存在于空气、灰尘和大多数物体表面；

3）实验人员的皮肤或唾液等。

 

二、内源性污染源：

所有组织样品均含有内源性RNase。
 

如何从源头上避免RNase污染

RNase的无处不在，使得实验过程中，难以保存RNA样本的完整性，导致实验失败或影响RNA分析的结果。因此，从源头上避免RNase污染十分必要，一方面要严格控制外源性RNase的污染，另一方面要最大限度地抑制内源性的RNase。

 

一、控制外源性RNase污染的方法：

1. 操作人员全副武装

在实验过程中戴手套可避免源自人手的RNase污染；触摸皮肤、门把手及普通物体表面后更换手套；

2. 使用专业仪器与试剂

RNA操作专用的移液枪；使用RNase-free的枪头和离心管；使用RNase-free的化合物与试剂；

3. 选择实验操作环境

远离/遮蔽通风孔或开放窗口，走动较少的区域作为RNase-free区域；

4. 其他注意的点

在RNA提取和分析期间，不要进行其他可能引起RNase 污染的实验。

 

二、抑制内源性RNase活性的方法：

1. 样本保存

组织取样后若不直接提取RNA，要及时用液氮迅速冷冻存于-80°C环境，并尽早进行实验，这样可使RNA的降解达到最少。

2. 添加抑制剂

在细胞裂解液中加入RNase 抑制剂（RNase inhibitor），使破碎细胞与灭活RNase 同步进行，最大限度地降低细胞破碎过程中所释放的RNase的活性。
 

RNase抑制剂可有效避免RNase污染

RNase抑制剂（RNase inhibitor，简称RNasin）是存在于人的胎盘中的一种特异性RNase抑制剂，能够特异地与RNase以非共价键结合形成复合体，造成RNase失活，从而保护RNA的完整度。目前，RNasin主要用于cDNA合成，体外转录，体外翻译，以及mRNA-protein复合物分离纯化等过程中保护RNA不被降解，还可用于特定RNase活性的鉴定等。
 

翌圣生物高品质鼠源RNase抑制剂

翌圣生物Murine RNase Inhibitor是以可溶形式在大肠杆菌中表达纯化的重组鼠源RNase抑制剂，能够广泛抑制各种类型RNase(RNase A, B, C)可用于RT-PCR/RT-qPCR，解决体外转录中RNA降解问题，抑制RNA分离纯化过程中RNase的活性。与人源RNase inhibitor相比， RNase Inhibitor不含人源蛋白中的两个对氧化非常敏感的半胱氨酸，因而具有更高的抗氧化活性，且更加适合于对高DTT敏感性的实验(如qPCR)。

 

1.产品特点

1）广谱的RNase抑制活性：可抑制包括RNase A、RNase B、RNase C等在内的RNase。

2）兼容广泛的反应条件：在pH 5.0至9.0条件下和25℃至60℃的温度下都具有活性，适用于热稳定型逆转录酶（55℃-60℃）。

3）兼容广泛的下游实验：对SP6、T7或T3 RNA聚合酶，AMV、M-MLV逆转录酶和Taq DNA聚合酶酶活性无影响。

4）规模化量产：单次生产达20亿U产能，确保了产品的均一性、稳定性和供货的及时性，有利于成本控制。

5）批间稳定性：成熟的蛋白表达和纯化平台，符合ISO13485质量管理体系，根据质量标准进行质控检测，保证批次间产品的稳定性。

 

2. 产品性能

1）RNase Inhibitor可有效抑制RNase活性

 

图1. 1μL RNase inhibitor可有效抑制5ng RNase，1μg HEK细胞总RNA电泳结果图。
 

2）RNase Inhibitor在qPCR实验中表现优于国际同类产品

在相同实验条件下，以qPCR方法分别对翌圣和R*公司的鼠源RNase抑制剂（MRI）的抑制效果进行检测，翌圣鼠源RNase抑制剂能有效抑制体系中的RNase A，抑制效果优于竞品。
 

图2. R* MRI抑制RNase能力测试。
 

注：图中曲线从左到右依次为：PC（仅RNA，无RNase和MRI）、40 U MRI、30 U MRI、20 U MRI、10 U MRI、NC（RNA+RNase、无MRI）。

 

图3. Yeasen MRI抑制RNase能力测试。

注：图中曲线从左到右依次为：PC（仅RNA，无RNase和MRI）、80 U MRI、60 U MRI、40 U MRI、30 U MRI、20 U MRI、10 U MRI、NC（RNA+RNase、无MRI）。
 

 

图4. Yeasen MRI与R* MRI的RT-qPCR CT值结果。

FAQ
 

1. Murine RNase inhibitor是否会影响RT-PCR和qRT-PCR实验？

答：不会影响。经质量测试，每批次Murine RNase inbitior均不含有基因组污染，可适用于RT-PCR和qRT-PCR实验。

2. 在使用Murine RNase inhibitor配制反应体系时，有什么注意事项？

答：配制体系时，在其他可能引入RNase污染来源的组分加入前，RNase inhibitor可首先加入。

3. Murine RNase inhibitor具有核酸内切酶及核酸外切酶活性吗？

答：无核酸内切酶及核酸外切酶活性，有助于提高产物得率。

订购信息

产品定位	产品名称	产品货号
RNase抑制剂	Murine RNase inhibitor (40 U/μL) 鼠源RNase抑制剂	10603ES
无甘油版RNase抑制剂	Murine RNase Inhibitor(40 U/µL,Glycerol-free) 无甘油鼠源RNase抑制剂	10701ES
热启动Taq酶	Hieff Unicon® Hotstart Direct Taq DNA Polymerase (5 U/μL)	10717ES
高灵敏度Bst酶	Bst Plus DNA Polymerase (40 U/μL)	14402ES
Taq酶单克隆双封闭抗体	Hieff® Double-Block anti-Taq DNA Polymerase Antibody	31303ES
适合RT-Lamp的反转录酶	Hifair® III Reverse Transcriptase (200 U/μL)	11111ES
适合RT-qPCR的反转录酶	Hifair® V Reverse Transcriptase(200 U/μL)	11300ES
热敏UDG	Uracil DNA Glycosylase (UDG/UNG), heat-labile (1 U/μL)	10303ES
高纯度dNTP Mix	dNTP Mix (10 mM each)	10124ES
高纯度dUTP	dUTP（100 mM）	10128ES

注：以上所有的酶都有高浓度或无甘油版形式，详情咨询18186211438。