该组分是Hifair®LyoMultiplexOneStepRT-qPCRKit(Cat#11831ES)的酶组分，搭配其buffer组分，可进行以RNA 为模板的多重定量PCR反应。在实验的过程中，逆转录和定量PCR在同一反应管中进行，简化了实验操作，降低了污染的 风险。 该组分利用耐热Hifair®VReverseTranscriptase高效合成第一链cDNA，并利用UNICON®HotStartTaqDNA Polymerase进行定量扩增，独特的酶组分，搭配可冻干的buffer及保护剂等组分，可用于一步法RT-qPCR冻干反应体系 的配制和产品设计。 产品信息 货号11834ES60/11834ES80/11834ES92 规格100T/1000T/10000T 组分信息 组分编号组分名称11834ES60(100T)11834ES80(1000T)11834ES92(10000T) 11834Hifair®Lyo-EnzymeMix100μL1mL10mL 【注】Hifair®Lyo-EnzymeMix主要包含有耐热Hifair®VReverseTranscriptase和UNICON®HotStartTaqDNAPolymerase。 运输条件 2~8℃保存，有效期6个月。 使用方法 1.反应体系（以25uL体系为例） 组分编号组分名称体积（μL）终浓度 11831-A4×Hifair®Lyo-Buffer61x 11834Hifair®Lyo-EnzymeMix1- 11831-C冻干保护剂8- /PrimerMix(10μM)10.1-1uM /ProbeMix(10μM)0.50.05-0.5uM /模板RNA5- /DEPCH20upto25- 2.参考扩增程序 1）常规扩增程序 循环步骤温度时间循环数 逆转录50℃a10min1 预变性95℃5min1 扩增反应95℃15sec 45 60℃b30seccwww.yeasen.comPage2of22）快速扩增程序 循环步骤温度时间循环数 逆转录50℃a2min1 预变性95℃2sec1 扩增反应95℃1sec 45 60℃b13secc 【注】a.逆转录：42℃或者50℃均可。 b.扩增反应：扩增反应温度根据设计的引物Tm值进行调整。 c.荧光信号采集：不同的qPCR检测仪器所需的荧光信号采集时间不同，请根据最短时间限制进行设置。 3.适用机型 ABI5700,7000,7300,7700,7900HTFast,StepOne™,StepOnePlus™，ABI7500,7500Fast,ViiA™7,QuantStudio ™3and5,QuantStudio™6,7,12kFlex； StratageneMX3000P™,MX3005P™,MX4000P™； Bio-RadCFX96™,CFX384™,iCycleriQ™,iQ™5,MyiQ™,MiniOpticon™,Opticon®,Opticon®2,Chromo4™； EppendorfMastercycler®eprealplex,realplex2s; QiagenCorbettRotor-Gene®Q,Rotor-Gene®3000,Rotor-Gene®6000； RocheAppliedScienceLightCycler®480,LightCycler®2.0;Lightcycler®96； ThermoScientificPikoRealCycler;CepheidSmartCycler®;IlluminaEcoqPCR 注意事项 1.实验过程中请使用RNasefree耗材。 2.为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。