RNase抑制剂 (RNase inhibitor) 是存在于人的胎盘中一种特异性核糖核酸酶 (RNase) 抑制剂,其特异性失活RNase的原理是:与RNase以非共价键结合形成复合体,造成RNase失活。
本产品是以可溶形式在大肠杆菌中表达纯化的重组鼠源RNase抑制剂,能够广泛抑制各种类型RNase (RNase A, B, C)。经RT-PCR、RT-qPCR检验,本产品能与Hifair® V Reverse Transcriptase(货号:11300ES)及各种DNA Polymerase兼容。与人源RNase inhibitor相比,本产品不含人源蛋白中的两个对氧化非常敏感的半胱氨酸,因而具有更高的抗氧化活性。同时,更加适合于对高DTT敏感性实验(如qPCR等)。
本产品可用于cDNA第一链合成、多核糖体的分离 (Polysome isolation)、体外转录和体外无细胞翻译系统等实验。
本产品不含甘油,专门用于冻干试剂的配置。
产品组分
组分编号 |
组分名称 |
产品编号/规格 |
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10701ES05 (2 KU) |
10701ES10 (10 KU) |
10701ES20 (20 KU) |
10701ES60 (100 KU) |
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10701 |
Murine RNase Inhibitor (40 U/µL, Glycerol-free) |
50 μL |
250 μL |
500 μL |
2×1.25 mL |
运输与保存方法
冰袋运输。产品2-8℃保存。有效期6个月。
活性定义
抑制5 ng RNase A活性的50%所需要的酶量定义为1个活性单位(U)。RNase A活性通过水解Cyclic 2’,3’-CMP生成3’-CMP定量求得。
注意事项
1. 本品抑制RNase活性的pH值范围较广,在pH 7-8时表现最大活性。
2. 避免起泡或剧烈搅拌、涡旋等操作,以防止本品失活。
3. 本品不抑制RNase H活性。
4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
应用实例(逆转录实验)
1. 在RNase free离心管中配制如下混合液
组分 |
体积(μL) |
RNase free ddH2O |
to 20 |
5× Hifair® V Buffer |
4 |
Oligo (dT)18 (50 μmol/L) |
1 |
dNTP Mix (10 mmol/L each) |
1 |
Murine RNase Inhibitor (40 U/μL) |
1 |
Hifair® V Reverse Transcriptase (200 U/μL) |
1 |
模板RNA |
Total RNA:1 ng-5 μg |
2. 轻轻混匀。
3. 42℃ 15-30 min,85℃ 5 min。
4. 产物于-20℃保存。
HB221215
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