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Hieff Trans细胞转染试剂,满足您每一种细胞和核酸的需求!

 

细胞转染是一种将外源核酸(如DNA、mRNA、siRNA、miRNA等)导入细胞的技术,它在现代生物医学研究中扮演着至关重要的角色。随着科学研究的不断深入,对细胞种类的需求也日益多样化,从常见的HEK293到特殊类型的肿瘤细胞及原代细胞,每一种细胞都有其独特的特性和要求。同样,不同的核酸类型也需要特定的转染策略来确保高效和安全的基因传递。因此,选择合适的转染试剂对于实验的成功至关重要。

 

化学转染试剂是细胞生物学研究中不可或缺的工具,它们通过不同的机制将核酸如DNA、mRNA、siRNA、miRNA等导入细胞内,以实现基因表达、沉默或功能研究。目前,常用的化学转染试剂主要包括脂质体转染试剂、PEI转染试剂和磷酸钙转染试剂,它们各自具有独特的优势和适用场景:

 

表1.不同化学转染试剂有何差异

产品类别

工作原理

优点

缺点

脂质体转染试剂

1、形成复合物:脂质体转染试剂含有阳离子脂质,这些脂质的正电荷头与核酸分子的负电荷磷脂双层通过静电作用结合,形成脂质-核酸复合物。

2、与细胞膜结合:由于脂质体-核酸复合物能够带电荷,它们可以很容易地通过细胞膜吸收。

3、细胞内吞:细胞通过内容作用将复合物包裹在体内(endosome),形成内吞体。

4、内吞逃逸:脂质体转染试剂的设计通常包括一个“钩”或“梯形”效应,即脂质体内的阳离子脂质能够缓冲周围介质的酸性环境,防止内体酸化,从而在数天内稳定不溶解,最终破裂,使复合物释放到细胞质中。

5、核酸释放:对于siRNA、miRNA或mRNA等小分子核酸,它们在细胞质中即可发挥作用。而对于DNA,需要进一步进入细胞核。

6、基因表达:DNA一旦进入细胞核,就可以转录成mRNA,并最终翻译成蛋白质,实现外源基因的表达。

1、高转染效率:对于多种细胞系,包括难以转染的原代细胞,脂质体转染试剂都能实现较高的转染效率。

2、适用性广:可以用于多种类型的细胞,包括贴壁细胞和悬浮细胞,以及多种类型的核酸,如DNA、SiRNA、miRNA等。

3、无需血清培养基:脂质体转染试剂可以在含血清的培养基中进行,无需特别去除血清,减少对细胞的损伤。

1、细胞毒性:脂质体转染试剂对细胞有一定的毒性,尤其是在高浓度或长时间作用下,可能会影响细胞的存活功能。

2、成本较高:相比一些传统的转染方法,如碱性转染法,脂质体转染试剂的成本通常较高。

3、在体内应用有限:脂质体转染试剂在体内应用时可能会被迅速清除,并在肺组织内累积,诱发强烈的抗炎反应,导致高水平的毒性,这限制了其在体内研究中的应用。

PEI转染试剂

1、形成复合物:PEI是一种带有高电荷阳离子的聚合物,它能够与带负电荷的DNA分子结合,形成PEI-DNA复合物。这种结合主要是通过静电作用力实现的,PEI上的氨基与DNA的磷酸基团相互作用。

2、细胞膜附着:形成的PEI-DNA复合物可以通过静电作用附着在细胞膜上,因为细胞漠萩馔氡面剋稹碼搛抿稚带有负电荷。

3、细胞内吞:细胞通过内吞作用将PEI-DNA复合物吞入细胞内,形成内体(endosome)

4、内体逃逸:PEI的一个关键特性是它的质子海绵”效应。在内体的酸性环境中,PEI上的氨基质子化,吸引更多的氢离子和氯离子进入内体,导致内体膨胀并最终破裂,释放出PEI-DNA复合物到细胞质中。

5、DNA释放和表达:一旦PEI-DNA复合物进入细胞质,PEI与DNA的结合被解除,使得DNA可以被细胞的核酸酶处理并进入细胞核,在那里转录并翻译成蛋白质。

1、高转染效率:PEI转染试剂能够有效地与DNA结合,形成稳定的复合物,从而提高转染效率。

2、低细胞毒性:与其他阳离子复合物相比,PEI转染试剂能在实现高效转染的同时,对细胞的毒性较低,有助于保持细胞的活性和功能。

3、成本效益:相较于其他转染方法,PEI转染试剂提供了一种成本效益高的转染方式,特别是在需要大规模转染操作的病毒载体生成中。

4、GMP等产品:对于需要符合药品生产质量管理规范(GMP)的临床和商业化生产,PEI转染试剂有相应的GMP等产品,确保了生产过程的质量和合规性。

1、适当性较小:PEI转染试剂相比脂质体转染试剂,在细胞类型上主要以DNA为主,对其他类型核酸如mRNA、siRNA、miRNA的应用相对较少。

2、细胞选择性差:PEI转染试剂主要在HEK293细胞上有很好的转染效率,广泛用于在293细胞上进行病毒包粒和蛋白表达;但是面对一些难转染的细胞,效果较差。

磷酸钙转染试剂

1、形成磷酸钙-DNA共沉淀:在含有磷酸盐的HEPES缓冲液中,质粒DNA与钙离子形成DNA/磷酸钙的沉淀。这一过程中,DNA分子由于其负电荷特性,在静电引力作用下与带正电荷的钙离子结合。

2、细胞吞噬沉淀:形成的磷酸钙-DNA共沉淀吸附在细胞表面,并通过细胞的胞饮作用被细胞吸收。这一步骤是转染成功的关键,因为沉淀物的大小和质量直接影响细胞的吞噬效率。

3、DNA释放和表达:被吞噬的磷酸钙-DNA共沉淀进入细胞后,会在细胞内释放DNA,这些DNA可以进行瞬时表达,或者整合到细胞的基因组中,产生稳定的转基因细胞。

1、成本较低:与其他转染试剂相比,磷酸钙转染试剂成本较低,适合预算有限的实验室使用。

2、操作简便:磷酸钙转染法不需要复杂的操作技巧,实验步骤相对简单,容易掌握 。

3、可用于稳转:磷酸钙转染不仅可以用来做瞬时蛋白表达,还可以用来构建稳转细胞株。

1、转染效率不稳定:磷酸钙转染法的效果受多种因素影响,如pH值、DNA浓度等,拥有偏差可能导致转染失败。尤其对DNA序列要求较高。

2、不适用于所有细胞类型:磷酸钙转染法主要适用于HEK293细胞的蛋白质表达及病毒包装,不适用于原代细胞,且对某些细菌类别的转染效果不佳。

翌圣生物凭借其强大的研发实力和生产技术团队,持续对DNA和RNA转染试剂的配方进行优化,并改进生产工艺。公司推出了基于阳离子脂质体和阳离子聚合物的多样化产品线,以满足科研院校和企业在转染试剂领域的广泛需求。这些产品覆盖了转染试剂应用的各个领域,具有以下优势

  • 适用范围广:可用于质粒DNA、siRNA、miRNA、mRNA高效转染。

  • 转染效率高:细胞转染效率高达90%以上,满足多质粒共转染。

  • 多细胞系验证:经40+不同细胞验证均有较好转染效率。

  • 应用场景广泛:稳转细胞株构建、瞬时蛋白表达、AAV及LV病毒包装。

  • 文献引用频率高:400+高分文献引用,总影响因子高达3000+。

  • GMP产品支持商业化生产:拥有GMP级别转染试剂,已支持多家企业完成项目申报。

 

 
选择一款适合自己的转染试剂?
 

鉴于不同细胞类型和核酸(例如DNA、mRNA、siRNA等)在转染效率和条件上的特殊要求,选择一款合适的转染试剂对于实验的成功至关重要。根据实验的具体需求,选择一款能够优化转染效率并最小化细胞毒性的转染试剂,以保障实验数据的精确性和实验结果的稳健性。翌圣生物提供了一系列针对不同应用场景优化的产品,确保您能够找到最适合您研究目的的转染试剂,满足您的特定实验需求。

货号

40802ES

40803ES

40804ES

40806ES

40808ES

40809ES

40810ES

40815ES

40816ES

40818ES

40820ES

40821ES

40823ES

40824ES

产品名称

Liposomal 2000脂质体转染试剂

 磷酸钙法细胞转染试剂

Polybrene聚凝胺

siRNA/miRNA 转染试剂

通用型转染试剂

mRNA转染试剂

昆虫细胞转染试剂

PEI- MW25000 转染试剂(粉末)

PEI- MW40000转染试剂(粉末)

293 细胞转染试剂

PEI 转染试剂

PEI -GMP转染试剂

UltraAAV转染试剂

UltraAAV- GMP转染试剂

细胞类型

常规细胞

常规细胞

常规细胞

常规细胞

常规细胞

常规细胞

昆虫细胞

常规细胞

常规细胞

常规细胞

常规细胞

常规细胞

常规细胞

常规细胞

 

 

难转染

难转染

难转染

难转染

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

原代

原代

原代

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

干细胞

干细胞

干细胞

 

 

 

 

 

 

 

 

核酸类型

DNA

DNA

慢病毒

 

DNA

 

DNA

DNA

DNA

DNA

DNA

DNA

DNA

DNA

 

 

 

siRNA

siRNA

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

miRNA

miRNA

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

ASO

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

mRNA

 

 

 

 

 

 

 

 

应用场景

普遍用于多种细胞DNA转染

可用于病毒包装、蛋白表达

主要用于慢病毒感染增强

用于siRNA和miRNA转染,在多种难转染细胞上均能高表达

用于DNA及RNA转染,难转染细胞推荐

mRNA转染专用,在多种难转染细胞上均能高表达

针对sf9和High Five等昆虫细胞进行杆状病毒及质粒DNA转染

粉末PEI转染试剂,用于大规模细胞转染实验

基于293细胞进行慢病毒病毒、AAV病毒包装及蛋白表达

通用型病毒包装转染试剂(适用于LV及AAV)

AAV病毒包装专用转染试剂

对标竞品

thermo-lipo2000

thermo-磷酸钙转染试剂

sigma

thermo-RNAiMAX

thermo-lipo3000

thermo-MessengerMAX

thermo-Cellfectin

polyscience-PEI25000

polyscience-PEI MAX

thermo-293fectin

polyplus-PEIpro

polyplus-PEIpro GMP

polyplus-FectorVIR-AAV

polyplus-FectorVIR-AAV GMP

 

 
产品性能展示
 
 

DNA单质粒转染

 

6孔板体系中,使用翌圣40802ES转染试剂和竞品转染试剂在HEK293细胞上转染GFP表达质粒,转染后48h显微镜下观察各产品转染细胞后GFP表达情况。

 

 

DNA双质粒转染

 

细胞类型:HEK293;转染方式:12孔板瞬时转染;质粒总量1 μg;转染试剂用量3 μL

 

 

mRNA转染

 

在常用的易转染和难转染细胞系中,YEASEN产品的转染效率均优于竞品T的转染效率

 

 
客户案例
 

 

 

多细胞系验证,应用范围更广

 

 

 

多篇高分文献引用,质量有保障(部分引用文献)

 

<上下滑动查看更多>

1.Liang X, Gong M, Wang Z, et al. LncRNA TubAR complexes with TUBB4A and TUBA1A to promote microtubule assembly and maintain myelination. Cell Discov. 2024;10(1):54. Published 2024 May 21. doi:10.1038/s41421-024-00667-y. IF=33.5(40808ES)

2.Wang A, Chen C, Mei C, et al. Innate immune sensing of lysosomal dysfunction drives multiple lysosomal storage disorders. Nat Cell Biol. 2024;26(2):219-234. doi:10.1038/s41556-023-01339-x.IF=21.3(40802ES)
3.Liu H, Zhen C, Xie J, et al. TFAM is an autophagy receptor that limits inflammation by binding to cytoplasmic mitochondrial DNA. Nat Cell Biol. 2024;26(6):878-891. doi:10.1038/s41556-024-01419-6.IF=21.3(40802ES)
4.Wang WW, Ji SY, Zhang W, et al. Structure-based design of non-hypertrophic apelin receptor modulator. Cell. 2024;187(6):1460-1475.e20. doi:10.1016/j.cell.2024.02.004.IF=64.5(40802ES)
5.Ke J, Pan J, Lin H, et al. Targeting Rab7-Rilp Mediated Microlipophagy Alleviates Lipid Toxicity in Diabetic Cardiomyopathy. Adv Sci (Weinh). Published online June 5, 2024. doi:10.1002/advs.202401676.IF=15.1(40806ES)
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9.Lu YY, Zhu CY, Ding YX, et al. Cepharanthine, a regulator of keap1-Nrf2, inhibits gastric cancer growth through oxidative stress and energy metabolism pathway. Cell Death Discov. 2023;9(1):450. Published 2023 Dec 12. doi:10.1038/s41420-023-01752-z.IF=7(40806ES)
10.Li X, Zhang Y, Xu L, et al. Ultrasensitive sensors reveal the spatiotemporal landscape of lactate metabolism in physiology and disease. Cell Metab. 2023;35(1):200-211.e9. doi:10.1016/j.cmet.2022.10.002.IF=31.373(40802ES)
11.Li X, Zhang Y, Xu L, et al. Ultrasensitive sensors reveal the spatiotemporal landscape of lactate metabolism in physiology and disease. Cell Metab. 2023;35(1):200-211.e9. doi:10.1016/j.cmet.2022.10.002.IF=31.373(40804ES)
12.Huang Y, Motta E, Nanvuma C, et al. Microglia/macrophage-derived human CCL18 promotes glioma progression via CCR8-ACP5 axis analyzed in humanized slice model. Cell Rep. 2022;39(2):110670. doi:10.1016/j.celrep.2022.110670.IF=8.8(40804ES)
13.Chai Q, Yu S, Zhong Y, et al. A bacterial phospholipid phosphatase inhibits host pyroptosis by hijacking ubiquitin. Science. 2022;378(6616):eabq0132. doi:10.1126/science.abq0132.IF=63.714(40802ES)
14.Liu R, Yang J, Yao J, et al. Optogenetic control of RNA function and metabolism using engineered light-switchable RNA-binding proteins. Nat Biotechnol. 2022;40(5):779-786. doi:10.1038/s41587-021-01112-1.IF=54.908(40802ES)
15.Chen S, Chen G, Xu F, et al. Treatment of allergic eosinophilic asthma through engineered IL-5-anchored chimeric antigen receptor T cells. Cell Discov. 2022;8(1):80. Published 2022 Aug 16. doi:10.1038/s41421-022-00433-y.IF=38.079(40804ES)

 

 
产品清单
 

产品名称

产品规格

产品货号

Hieff Trans® Liposomal 2000 Transfection Reagent 脂质体核酸转染试剂

100 μL/1 mL

40802ES01/40802ES03

Hieff Trans® Calcium Phosphate Cell Transfection Kit 磷酸钙法细胞转染试剂

200T

40803ES70

Hieff Trans®Polybrene(hexadimethrine bromide) 聚凝胺(10 mg/mL)

500 μL/5×500 μL

40804ES76/40804ES86

Hieff Trans® in vitro siRNA/miRNA Transfection Reagent siRNA/miRNA转染试剂

100 μL/1mL

40806ES01/40806ES03

Hieff Trans® Universal Transfection Reagent通用型转染试剂

0.5 mL /1 mL

40808ES02/40808ES03

Hieff Trans® mRNA Transfection Reagent mRNA转染试剂

0.1 mL /1 mL

40809ES01/40809ES03

Hieff Trans® Cell Insect Transfection Reagent 昆虫细胞转染试剂

100 μL/1mL

40810ES01/40810ES03

Hieff Trans®Polyethylenimine Linear(PEI) MW25000 线性PEI转染试剂

1g/5×1g

40815ES03/40815ES08

Hieff Trans®Polyethylenimine Linear (PEI) MW40000(rapid lysis) 线性PEI转染试剂(速溶型)MW40000

100mg/1g

40816ES02/40816ES03

Hieff Trans®293 Transfection Reagent 293细胞专用转染试剂

1 mL /10 mL /100 mL

40818ES03/40818ES10

/40818ES60

Hieff Trans® PEI Transfection Reagent转染试剂

1.5 mL /10 mL /100 mL

40820ES04/40820ES10

/40820ES60

Hieff Trans® PEI Transfection Reagent-GMP转染试剂

10 mL /100 mL/1L

40821ES10/40821ES60

/40821ES80

Hieff Trans® UltraAAV Transfection Reagent转染试剂

1 mL /10 mL /100mL

40823ES03/40823ES10

/40823ES60

Hieff Trans® UltraAAV Transfection Reagent-GMP转染试剂

10 mL /100 mL /1 L

40824ES10/40824ES60

/40824ES80

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