SP1 Luciferase Reporter Plasmid(SP1-Luc荧光素酶报告基因质粒)

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产品描述

SP1-Luc光素酶报告基因(报告基因质粒)(SP1 luciferase reporter plasmid)是翌圣生物自主研发的用于检测SP1 转录活性水平为目的的报告基因。SP1(specificity protein 1)是一种富含谷氨酰胺的转录因子,通过与GC盒结合调控基因得转录过程 

SP1报告基因主要是检测细胞SP1信号通路中SP1的转录活性、药物研究以及基因过表达和 RNAi 的表型分析等。 

pSP1-Luc 是翌圣生物改造后的哺乳动物真核表达载,在其多克隆位点插入了多个SP1结合位点,可以高灵敏度地检测SP1的激活水平。同时,对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变,在保持原有功能不变的情况下,增加了质粒的转录因子结合特异性。由于质粒体积减小,使得SP1报告基因质粒更易于转染。 

 

质粒图谱
 

image.png 

 
 

 

质粒元件信息

 

SP1 response element (SP1)

32-79

Minimal TA promoter (pTA)

108-130

Luciferase reporter gene

162-1824

SV40 late poly(A) signal

1859-2080

SV40 early promoter

2128-2546

Synthetic neomycin phosphotransferase(Neor) coding region

2571-3365

Synthetic poly(A) signal

3390-3438

Synthetic Beta-lactamase(Ampr) coding region

4553-5414

Synthetic poly(A) signal/transcriptional pause site

5518-5671

 

运输与保存方法

 

冰袋低温运输。-20 ºC保存。保质期1年。

 

注意事项

 

1)本质粒未经翌圣生物允许不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。

2)为了您的健康,实验操作时请穿实验服和戴一次性手套。

3)本产品仅作科研用途!

4)不提供该质粒序列信息。

 

使用说明

 

1)pSP1-Luc可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。用萤光素酶检测试剂盒或双萤光素酶检测试剂盒进行检测;

2)SP1的激活剂,可作为SP1报告基因的阳性对照

3首次使用1 µg包装的本产品时,请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。

 

参考文献

 

[1] Yang J H, Li X Y, Wang X, et al. Long-term persistent infection of HPV 16 E6 up-regulate SP1 and hTERT by inhibiting LKB1 in lung cancer cells[J]. PloS one, 2017, 12(8): e0182775.

[2] Yang J H, Wu M Z, Wang X B, et al. HPV16 E6/E7 upregulate hTERC mRNA and gene amplification levels by relieving the effect of LKB1 on Sp1 phosphorylation in lung cancer cells[J]. Therapeutic Advances in Medical Oncology, 2020, 12: 1758835920917562.

[3] Abe K, Kumagai T, Takahashi C, et al. Detection of pathogenic bacteria by using zinc finger protein fused with firefly luciferase[J]. Analytical chemistry, 2012, 84(18): 8028-8032.

[4] Ikuta K, Waguri-Nagaya Y, Kikuchi K, et al. The Sp1 transcription factor is essential for the expression of gliostatin/thymidine phosphorylase in rheumatoid fibroblast-like synoviocytes[J]. Arthritis research & therapy, 2012, 14(2): 1-9.

[5] Yang P M, Lin P J, Chen C C. CD1d induction in solid tumor cells by histone deacetylase inhibitors through inhibition of HDAC1/2 and activation of Sp1[J]. Epigenetics, 2012, 7(4): 390-399.

 

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400-6111-883