在分子生物学、微生物学等生物学研究领域,从细菌样本中高效分离并获取高纯度的蛋白与核酸,是后续开展 Western Blot 蛋白印迹、PCR 基因扩增、基因测序等关键实验的核心基础。而细菌裂解作为提取流程的 “第一步关口”,却常因细胞壁破坏不彻底,导致细胞内的目标分子无法充分释放,最终造成回收率大幅降低,成为制约实验效率的核心瓶颈。
为解决细菌裂解的痛点,翌圣生物依托多年分子酶研发技术沉淀与经验积累,重磅推出重组T4 溶菌酶(Cat#14814ES)。依托ZymeEditor酶进化平台,本品成功实现了活性强度与产品纯度的双重突破:既能快速、彻底破坏细菌细胞壁,大幅提升目标分子释放效率;同时,重组表达工艺确保了极高的洁净度,能有效规避天然提取的杂质风险,从而为下游的蛋白或核酸实验提供更可靠、更纯净的起始材料。
翌圣T4 Lysozyme (Cat#14814ES)
翌圣T4 Lysozyme是来源于T4噬菌体的一种重组胞壁质水解酶,由含有工程化的Enterobacteria phage T4 的基因E的E. coli菌株重组表达而来,通过水解原核细胞(革兰氏阴性菌和一些革兰氏阳性菌)肽聚糖中 N-乙酰胞壁酸和 N-乙酰葡糖胺之间的 β-1,4 键来破坏细菌细胞壁。
图1. T4溶菌酶结构示意图[1]
产品优势
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纯度高:蛋白纯度≥95%;
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活性强:翌圣T4溶菌酶活性是鸡蛋清溶菌酶的数百倍,可大幅减少酶用量,缩短裂解时间;
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优于进口品牌同类产品;
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残留低:无切口酶、RNase酶残留;
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重组来源、无动物成分。
性能展示
纯度高:蛋白纯度≥95%
图2. 翌圣T4溶菌酶蛋白纯度(Lane 1-3:分别代表酶投入量为1、2、3 μL)
活性强:翌圣T4溶菌酶活性是鸡蛋清溶菌酶的数百倍,可大幅减少酶用量,缩短裂解时间
注:T4溶菌酶或鸡蛋清溶菌酶裂解表达ULP1的大肠杆菌:将1 g菌液沉淀重悬于30mL 50 mM Tris-HCl,0.5 mM EDTA, pH 7.5 Buffer中,加入Yeasen T4 溶菌酶(每 1 mL菌液中加入0.1、0.5、1、2 μg酶)或鸡蛋清溶菌酶(每 1 mL菌液中加入10、100、200、300 μg酶),室温温和颠倒(或静置)裂解5 min。通过低温(4℃)高速(12000g)离心30 min收集可溶性蛋白,并通过SDS-PAGE分析。
优于进口品牌同类产品
图4. 翌圣T4溶菌酶与Supplier A T4溶菌酶效果对比
注:翌圣T4溶菌酶与Supplier A T4溶菌酶裂解表达ULP1的大肠杆菌菌液:将1 g菌液沉淀重悬于30mL 50 mM Tris-HCl,0.5 mM EDTA, pH 7.5 Buffer中,加入Yeasen T4 溶菌酶或Supplier A T4溶菌酶(每 1 mL菌液中加入0.1、0.5、1、2 μg酶),室温温和颠倒(或静置)裂解5 min。通过低温(4℃)高速(12000g)离心30 min收集可溶性蛋白,并通过SDS-PAGE分析。
残留低:无切口酶、RNase酶残留
图5. 翌圣T4溶菌酶切口酶、RNase残留检测结果
注:将翌圣T4溶菌酶分别与核酸底物孵育,并通过琼脂糖凝胶电泳分析谱带变化。实验结果表明,翌圣的3个批次T4溶菌酶均未检测出切口酶(1 μg)或RNase(1 μg)残留。
从实验痛点出发,以技术创新破局。翌圣重组T4 溶菌酶(Cat#14814ES),用更高活性、更优纯度、更洁净品质,重新定义细菌裂解标准。除此之外,翌圣生物还可提供核酸提取全套原料酶及核酸提取试剂盒产品,助力科研人员一站式解决核酸提取环节的各类需求,让实验流程更顺畅、结果更可靠。
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产品类别 |
产品名称 |
产品货号 |
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T4溶菌酶 |
14814ES |
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鸡蛋清溶菌酶 |
10402ES |
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蜗牛酶 |
10404ES |
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溶壁酶 |
10403ES |
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蛋白酶K |
10412ES |
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14809ES |
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DNase I |
14549ES |
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核酸提取与纯化试剂盒 |
18806ES |
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19301ES |
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18565ES |
参考文献:
[1]Baase W A, Liu L, Tronrud D E, et al. Lessons from the lysozyme of phage T4 [J]. Protein Science, 2010, 19(4): 631-641.
[2]Abouhmad A, Dishisha T, Amin M A, et al. Immobilization to positively charged cellulose nanocrystals enhances the antibacterial activity and stability of hen egg white and T4 lysozyme[J]. Biomacromolecules, 2017, 18(5): 1600-1608.
