凝胶过滤层析(Gel Filtration Chromatography)也称为分子筛或体积排阻层析(Size Exclusion Chromatography)，是根据分子大小和形状的差异进行分离的一种简单可靠的层析技术。凝胶过滤层析属于非吸附类层析。

凝胶过滤填料为三维立体网状结构，由于凝胶网孔大小的限制，大分子将不能进入凝胶颗粒内部（即被凝胶排阻在外），仅能在凝胶颗粒间隙移动，并随缓冲液一起从柱底先行洗脱。小分子可以自由进入并扩散到凝胶颗粒内部，小分子历经的路径更长，将较晚从柱上洗脱。

由于样品混合物中各组分的分子大小各异，进入凝胶颗粒内部的程度不尽相同，故经历一段时间的流动并达到动态平衡后，即可按分子由大到小的顺序先后洗脱出来。典型的SEC结果如图1所示：

图1.SEC分离结果

1959年第一代的葡聚糖凝胶问世，开启了凝胶过滤纯化的大门。随着技术和原料的革新，相继推出了琼脂糖系列填料及高度交联的琼脂糖和葡聚糖系列填料。不同凝胶过滤填料的特征如下图所示：

图2.凝胶过滤介质类别及特征

Dextran是早期发现的一类填料，可替代GE的Sephadex 系列，目前一般主要用于脱盐与缓冲液置换。上样体积可达柱床体积的25-30%，柱床高度一般2-30cm。

1）比透析速度更快、样品损失大幅降低

2）平行处理大量样品，通量更高

3）简单易用

样品：BSA蛋白高盐溶液

上样量：1ml

图3.Desalting Column G25 M脱盐峰图

Geldex PG是目前分辨率、选择性最高的凝胶过滤填料，广受用户的欢迎。可替代GE的Superdex系列。广泛应用于重组蛋白或天然蛋白的精细纯化阶段。此应用上样体积一般为柱体积的1-5%，且柱床高度要求≥60cm。

1）高分辨率、高选择性

2）高化学稳定性

3）非特异性吸附低

4）流速快、硬度大

5）回收率高

6）易于放大

样品：IgG（150KD）、牛血清白蛋白（66.4KD）、样品20（35KD）3个的蛋白抗体混合溶液3ml，浓度3.175mg/ml。

平衡缓冲液：PBS缓冲液。

图4.翌圣Geldex 75 PG Chromatography Column纯化峰图

图5.进口某品牌对照产品纯化峰图

图6：国内其他品牌对照产品纯化峰图

YXK16/26层析空柱是为广大用户精心设计的实验室型低压层析空柱，能方便的连接到 AKTA 等层析系统上。此规格的空柱常用于凝胶层析介质的装填。

1）使用方便、操作容易；

2）倒翻口接口设计以及高弹性密封圈有效防止渗漏；

3）柱头液流分布均匀，容易装出高柱效的层析柱；

4）外配有恒温夹套，方便层析过程的温度控制。
 

16/26装柱器是YXK16/26层析柱的一个配件，常用于凝胶层析介质的装填，让装柱更简便。