——《Nature》《Cell》《Science》作者的共同选择

 

荧光定量PCR是一类高灵敏的实验，要求实验人员操作高度精细化。因此，在进行qPCR实验过程中，我们总是不可避免的会遇到问题：

一、 非实验因素的相关问题

• 实验室qPCR实验项目多，仪器被占用，辛苦配制后的反应体系不知如何处置

• 定量样品多，加样任务繁重，眼花目眩担心加样错误，实验结果不可信
• 上机时间长，上机实验次数受限，实验任务不能按计划定期完成

• 实验室仪器更换新仪器，实验室定量仪器多，定量试剂与仪器不匹配

二、 受实验因素限制的问题

• 低丰度基因定量问题

• 复杂的引物设计与筛选过程、灵敏度、复孔重复性……

 

翌圣生物作为研发qPCR试剂的资深厂家，匠心研发了一款高性能qPCR预混液——Hieff UNICON® Universal Blue qPCR SYBR Green Master Mix，可以一次性解决上述实验烦恼。其中Universal ROX替代了传统ROX，弥补不同仪器平台的光程差，实现了适合所有qPCR仪器。另外，产品采用抗体法修饰，同时配方添加了基因扩增的促进因子，产品的扩增性能大大提升，完美兼容了科研端老师对高性能的需求与工业端企业高效率的要求。

 

产品特点

全仪器平台通用：预混特定类型参比染料，无需调整ROX浓度

易于示踪：蓝色预混液，观察颜色可直接区分是否加样

强稳定性：室温配制体系，配制后的体系可4℃放置24 h，检测结果无变化

上机快速：兼容常规程序与快速程序，最快46 min完成定量实验

扩增性能好：扩增效率高，特异性好，可检测个位拷贝数基因

 

产品性能

1、 全平台通用：适用于所有qPCR机型

 

图1. Hieff UNICON® Universal Blue 预混液可实现全平台通用。针对不同仪器平台，与T品牌对比，Hieff UNICON® Universal Blue 预混液Ct值起峰更加靠前。以2 µL的质粒10倍梯度稀释液为模板，扩增IL23R基因。

 

2、灵敏度高：可检测至单拷贝

 

图2. Hieff UNICON® Universal Blue 预混液可有效检测7个数量级范围的模板量，扩增效率高，可在宽广的线性范围内获得良好的线性关系。以2 µL的106-100拷贝的质粒为模板，扩增人IL23R基因。

 

3、检出率和特异性良好：广泛适用于30-70%GC含量的扩增子

 

图3. Hieff UNICON® Universal Blue预混液广泛适用于30-70%GC含量的扩增子，保证了极高的特异性检出率。以2 µL的293T cDNA为模板，利用Primer5软件设计1000对长度为200 bp扩增子（GC%含量30%-70%）的引物，随机扩增其中的27个扩增子。

 

4、分辨率高：可精准分辨2倍模板浓度差异

 

图4. Hieff UNICON® Universal Blue 预混液可精准区分2倍模板浓度差异。以2 µL的293T cDNA原液的2倍梯度稀释液为模板，扩增GAPDH基因。

 

5、复孔重复性好：90个复孔

 

图5. Hieff UNICON® Universal Blue预混液具备良好的重复性，90个复孔的扩增曲线高度重合，Ct值标准偏差<0.2。以1 µL的293T cDNA为模板，扩增GAPDH基因。

 

6、良好的稳定性：预混液反复冻融50次不影响扩增性能

 

图6. Hieff UNICON® Universal Blue预混液反复冻融50次，扩增性能无变化。以1 µL的293T cDNA为模板，使用不同冻融次数的预混液，扩增C2orf68基因。

 

客户反馈

复旦大学附属妇产产科医院

样本来源：小鼠卵巢癌细胞系ID8,HM1

 

 

 

浙江大学

样本来源：小鼠附睾脂肪RNA

 

 

中科院植生所

样本来源：拟南芥叶片RNA

 

 

翌圣qPCR Mix部分发表高分文献

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[2] Seki T, Yang Y, Sun X, et al. Brown-fat-mediated tumour suppression by cold-altered global metabolism. Nature. 2022;608(7922):421-428. doi:10.1038/s41586-022-05030-3. (IF=69.504)

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[18] Wang XY, Wei Y, Hu B, et al. c-Myc-driven glycolysis polarizes functional regulatory B cells that trigger pathogenic inflammatory responses. Signal Transduct Target Ther. 2022;7(1):105. Published 2022 Apr 18. doi:10.1038/s41392-022-00948-6.(IF=38.104)

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订购信息

产品定位	产品名称	产品货号
高灵敏通用型定量预混液	Hieff UNICON® Universal Blue qPCR SYBR Green Master Mix	11184ES
高特异高荧光定量预混液	Hieff UNICON® Advanced qPCR SYBR Master Mix	11185ES

 

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