Novel T4 DNA Ligase，让片段连接更高效
——高效，快速，自连低
产 品 原 理
DNA连接酶是一种能够催化相邻DNA 的3’-OH 和5’- 磷酸基末段形成磷酸二酯键，并且把两段DNA 拼接起来的核酸酶。T4 Ligase是目前应用比较多的病毒基因组编码的DNA 连接酶，主要从缺失型嗜菌体中提取，噬菌体T4 的30 基因是该酶的合成基因。T4 DNA连接酶在分子生物学中有广泛的应用。
产 品 简 介
在普通T4 DNA连接酶的基础上，利用定向改造技术，将T4 DNA ligase的有效催化活性结构域通过多轮突变筛选，得到一种连接活性更强的突变体。采用高纯度的生产标准和严格的质量检测，有效去除核酸酶、切口酶的残留，连接时间只需15min，打造一款快速高效的DNA连接酶。
产 品 应 用
产 品 特 点
◎ 应用更广泛：可催化粘性末端和平末端形成磷酸二脂键
◎ 连接更高效：建库自连率更低，表现为更好的文库多样性
◎ 适用于多种样本：包括FFPE、cfDNA等在内的所有样本均能高效连接
◎ 适用于多种类型片段连接：兼容illumina平台Y型接头以及MGI平台Bubble接头片段
◎ 严格质控：严格的批次性能与稳定性质控
连 接 效 率 自 评
将本产品用于NGS建库接头连接模块，样本为模式样本cfDNA模拟品，加入Y型建库接头，连接之后经Agilent 2100检测，理论上会出现三个峰：
◎ 双端均未连接接头片段；
◎ 仅一端连接接头片段；
◎ 双端均连接接头片段
而在二代测序文库构建中，只有双端都连接接头的片段才是合格可用的文库，因而通常可以通过双端均连接接头的片段占比反应接头连接效率。即双端连接接头片段占比越高，单端连接以及无接头连接的片段占比越低，连接效率越高。
*样本制备：使用170 bp多重PCR产物作为cfDNA模拟品，该PCR产物经过设计，3’端含有所有碱基的组合（共16种）。
极 低 的 自 连 率
建库试剂盒中搭配不同的连接酶筛选测试（其他组分一致），测序结果显示翌圣Novel DNA Ligase自连率更低。
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样本 |
品牌 |
Map Ratio% |
Dup% |
Clipped reads% |
Diff chr Reads% |
|
降解严重 |
Yeasen |
99.73 |
19.92 |
14.05 |
1.67 |
|
竞品 |
99.74 |
22.01 |
15.78 |
1.73 |
|
|
降解程度地 |
Yeasen |
99.83 |
14.95 |
5.29 |
0.63 |
|
竞品 |
99.79 |
14.81 |
6.16 |
1.64 |
产 品 信 息
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名称 |
货号 |
规格 |
|
10298ES40/42 |
40/400 KU |
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10301ES40 |
40 KU |
