颠覆性革新技术：In Vivo CAR-T疗法，开启细胞治疗新征程
CAR-T细胞疗法作为新型的治疗技术，在血液恶性肿瘤以及自免领域中大放异彩，目前全球已经有13款针对血液瘤的细胞疗法已经上市。然而目前上市的细胞疗法均是体外自体细胞治疗疗法，存在研发周期长，制备复杂，价格昂贵，使很多患者望而却步。“通用型”CAR-T疗法曾被业界认为是自体细胞治疗的的破局点，但是基于其临床疗效以及亟待解决的机体免疫排斥问题，使其的发展并不如预期。
随着阿斯利康押宝比利时生物技术公司EsoBiotec，彻底点燃体内CAR-T疗法，这一看似从源头上解决了CAR-T体外制备困难以及价格高昂的疗法，究竟有什么魔力呢？
什么是体内CAR-T疗法?
体内CAR-T疗法是指向人体输注可靶向T细胞的基因载体，在体内即可完成对T细胞的精准转导，从而原位生成CAR-T细胞。与传统的细胞治疗疗法相比，不需要提取患者或者健康供试者的细胞，在治疗时不需要进行清淋，可以最大程度上保留患者的完整的免疫系统。作为现货型药物，可以随时使用，显著提高疗法的可及性；并且不需要在体外进行培养以及质控，大大降低了该疗法的成本。
图1.体内外CAR-T疗法概述【1】
体内细胞疗法的分类
目前体内CAR-T疗法常见的技术路线包括非病毒载体与病毒载体，其中又以慢病毒载体和脂质体mRNA最为常见，下面主要针对这两种方法进行介绍。
慢病毒载体
慢病毒载体技术路线通过对慢病毒的包膜进行改造，使其能特异性的感染T细胞，并且将CAR基因整合至宿主基因组中，代表公司EsoBiotec，Interius以及Umoja。
Umoja作为体内CAR－T细胞疗法的明星企业，目前和国内众多公司包括驯鹿，原启生物等强强联合，共同推动以慢病毒载体为代表的体内CAR－Ｔ的进程。Umoja的VivoVecTM 平台的核心组分是一种包含anti-CD3 scFv片段、LDL-R嗜性的融合糖蛋白、CD80和CD58片段的3代自失活型慢病毒。相较于初代产品，升级款病毒添加了CD80和CD58，二者属于T细胞共刺激配体，为T细胞的活化提供共刺激信号。同时Umoja引入了新的表面颗粒工程方法，包括在慢病毒颗粒表面使用抗CD3单链可变片段和T细胞共刺激分子，模拟了免疫突触的形成，增强了颗粒与T细胞的结合、T细胞的激活以及转导效率。
图2.Umoja管线情况
国内企业，传奇生物，济因生物以及易慕峰生物也对此进行了相关布局。今年ASGCT大会上，易慕峰团队披露其设计的开发的以 MxV 糖蛋白为假型的新型慢病毒载体搭配自主设计的多种T细胞靶向分子TCM3，相比αCD3/CD80/CD58 (MDF)以及αCD3/CD80更优的转导效率以及抗肿瘤的效果，同时该设计在体内模型中也得到充分验证。
非病毒载体纳米系统
非病毒载体纳米系统,其中阳离子聚合物纳米颗粒和脂质纳米颗粒（LNP）是常用载体。以脂质体RNA递送系统为例：通过化学修饰在脂质体表面偶联抗体或者scFV，将CAR蛋白的mRNA特异性的递送至T细胞胞质。相较于慢病毒载体，mRNA不会整合至宿主基因组中，从某种程度上增强了CAR-T细胞治疗的安全性。
图3.非病毒载体纳米系统【1】
2025年9月，虹信生物（MagicRNA）在新英格兰医学杂志（The New England Journal of Medicine）上全球首次公布了基于mRNA-LNP的In vivo CAR T候选药物HN2301在系统性红斑狼疮(SLE)病人的临床试验研究数据，观察到了良好的安全性以及初步的临床疗效。该论文的发表宣告mRNA-LNP路径的In vivo CAR T正式进入临床研究阶段，并且在人体上首次获得了临床验证。
图4.Capstan管线情况
国际上，Capstan，Myeloid，Orna均已经将其推向临床，其中Capstan在自免适应症上进行相关布局，而Myeloid挑战实体瘤治疗。Orna则将 oRNA 技术与 LNP 递送技术相结合，创造出可以修改患者体内免疫细胞的疗法，并且在小鼠体内模型中验证其有效性。目前国内先博，深信，博生吉，百替生物，石药集团，嘉晨西海，星锐医药，云顶星耀也对此进行布局。
体内CAR-T的挑战与展望
体内CAR-T疗法虽然展现出革命性潜力，但其临床应用仍面临多重挑战需要攻克。
首要难题在于如何实现精准的靶向递送并确保治疗安全性，这要求我们有效避免CAR基因在非靶细胞中的异位表达。目前行业主要采取三大策略：
1）开发具有T细胞特异性识别能力的智能载体系统；
2）采用仅在T细胞内激活的调控元件；
3）优化局部给药方式以提升靶向性。对于慢病毒载体系统，还需特别关注基因组整合可能带来的潜在风险，为此研究人员正在积极开发可调控的"分子开关"系统来加强安全性控制。
在实体瘤治疗领域，体内CAR-T同样面临着肿瘤微环境（TME）的免疫抑制难题。当前的前沿解决方案包括：
1）工程化表达免疫刺激因子；
2）联合免疫检查点阻断疗法；
3）开发多机制协同的组合治疗方案。这些创新方法为突破实体瘤治疗瓶颈提供了新思路。
值得注意的是，由于患者个体间T细胞数量和活性的显著差异，治疗方案需要实现个性化定制，这对给药剂量和前处理方案提出了更高要求。此外，虽然mRNA和慢病毒载体技术已在其他领域得到验证，但体内CAR-T的特殊性要求我们建立全新的质量控制标准和监管框架，这是推动该技术临床转化必须跨越的重要门槛。
尽管体内CAR-T治疗仍面临靶向性、安全性、规模化生产等挑战，但这一技术为实体瘤攻克和CAR-T疗法普惠化提供了革命性的解决方案。全球科研人员正通过技术创新逐一破解这些难题，推动体内CAR-T从实验室迈向临床，让"可负担的细胞治疗"成为可能！
翌圣生物深耕细胞治疗上游关键原料与技术，针对当前主流的脂质体mRNA递送与病毒载体介导两大技术路线，提供从研发到生产的全链条产品与服务，助力下游客户加速疗法开发与商业化进程！
体内CAR-T解决方案（mRNA介导）
体内CAR-T解决方案（病毒介导）
产品清单
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重点产品 |
货号 |
规格 |
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脂质体mRNA介导 |
Hieff® T7 RNA Polymerase GMP-grade (low dsRNA, 250 U/μL) |
10629ES |
10 KU/100 KU/2500 KU/25 MU/100 MU |
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Murine RNase inhibitor GMP-grade (40 U/μL) |
10621ES |
10 KU/20 KU/100 KU/1 MU |
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mRNA Cap 2´-O-Methyltransferase GMP-grade (50 U/μl) |
10612ES |
10000 U/50000 U/250000 U/20 MU |
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Pyrophosphatase, Inorganic GMP-grade (0.1 U/μL) |
10672ES |
1 U/10 U/100 U |
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S-adenosylmethionine (SAM) GMP-grade (32 mM) |
10619ES |
0.5 mL/25 mL/50 mL/500 mL |
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ATP Tris Solution GMP-grade (100 mM) |
10652ES |
1 mL/10 mL/100 mL |
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CTP Tris Solution GMP-grade (100 mM) |
10653ES |
1 mL/10 mL/100 mL |
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UTP Tris Solution GMP-grade (100 mM) |
10654ES |
1 mL/10 mL/100 mL |
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GTP Tris Solution GMP-grade (100 mM) |
10655ES |
1 mL/10 mL/100 mL |
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N1-Me-Pseudo UTP sodium solution GMP-grade (100 mM) |
10651ES |
100 μL/1 mL/10 mL/100 mL |
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RNase R GMP-grade (20 U/μL) |
14615ES |
500 U/5000 U/20 KU/200 KU |
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BspQI GMP-grade (10 U/μL) |
10664ES |
500 U/2500 U/10 KU/100 KU |
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Deoxyribonuclease I (DNase I) GMP-grade (2 U/μL) |
10611ES |
500 U/2000 U/10000 U/100 KU |
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病毒载体介导 |
UCF.ME® UltraNuclease GMP-grade 全能核酸酶（同Benzonase） |
20157ES |
25 KU/50 KU/100 KU/1 MU/5 MU |
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Salt Active UltraNuclease GMP-grade 耐高盐全能核酸酶 |
20159ES |
25 KU/50 KU/100 KU/1 MU/5 MU |
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Hieff Trans® PEI Transfection Reagent-GMP转染试剂 |
40821ES |
10 mL/100 mL/1 L |
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Hieff Trans® UltraAAV Transfection Reagent-GMP转染试剂 |
40824ES |
10 mL/100 mL/1 L |
参考文献：
1.Li YR, Zhu Y, Halladay T, Yang L. In vivo CAR engineering for immunotherapy. Nat Rev Immunol. 2025 May 16. doi: 10.1038/s41577-025-01174-1. Epub ahead of print. PMID: 40379910.
2.Nicolai CJ, Parker MH, Qin J, et al. In vivo CAR T-cell generation in nonhuman primates using lentiviral vectors displaying a multidomain fusion ligand. Blood. 2024 Aug 29;144(9):977-987. doi: 10.1182/blood.2024024523. PMID: 38861668.
