世界卫生组织专家7月22日就蚊媒传播疾病基孔肯雅热发出警报,提醒各国做好应对准备,避免疫情大规模暴发。当天在日内瓦举行的新闻发布会上,世卫组织虫媒病毒小组负责人迪亚娜·阿尔瓦雷斯表明,目前已有119个国家和地区发现基孔肯雅病毒传播情况,约550万人面临这种蚊媒病毒的风险,而且可能出现大范围疫情,给卫生系统带来压力。
近期,我国多地报告基孔肯雅热病例激增,广东佛山单日新增确诊病例超450例,顺德区累计报告3317例轻症病例,乐从镇、北滘镇等区域成为疫情“重灾区”。这场由基孔肯雅病毒(CHIKV)引发的急性传染病,正以发热、剧烈关节痛和皮疹为典型症状,通过埃及伊蚊和白纹伊蚊的叮咬迅速传播。面对疫情挑战,快速、精准的病原检测成为防控关键,翌圣生物的病原核酸提取技术以及IVD检测试剂原料和解决方案,正以“高效、灵敏、自动化”三大优势,为疫情防控提供核心支持。
检测技术:疫情防控的“火眼金睛”
基孔肯雅热的早期诊断依赖病原学检测,传统方法如病毒分离培养需3-5天,且对实验室条件要求极高;血清学检测(如胶体金免疫层析法)虽快速,但灵敏度受限;分子生物学检测(RT-PCR、实时荧光定量PCR)因其高灵敏度和特异性,成为当前快速、高效、准确诊断的主流技术。
翌圣生物完整解决方案
Part 1 核酸提取解决方案
翌圣生物的突破性方案
MolPure® Magnetic Universal Viral DNA/RNA Kit 磁珠法通用病毒DNA/RNA提取试剂盒 18521ES
产品亮点
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样本兼容性好:兼容拭子、全血、血浆、肺泡灌洗液、脑脊液等样本;
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操作简便快速:搭配翌圣AP-96N自动化提取仪,20 min分钟内可实现96个样本的提取;
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高效灵敏:低拷贝样本的检出率高,降低漏检的风险。
产品性能
人流感病毒样本提取
将含有腺病毒5型阳性样本、腺病毒7型阳性样本、呼吸道合胞病毒RSV阳性拭子样本,采用18521和竞品A提取流程进行提取,使用qPCR法对提取得到的病毒核酸进行定量,检测的平均Ct值越低,表示检出率越高。结果显示:针对人DNA和RNA病毒阳性样本,18521对提取效率优于竞品A。
图1.拭子样本流感病毒的提取效率
动物疫病样本提取
将含有非洲猪瘟病毒阳性样本按18521和竞品B提取流程进行提取,使用qPCR法对ASFV进行定量,检测的平均Ct值越低,表示检出率越高。结果显示:针对非洲猪瘟样本,18521对提取效率优于竞品B。
图2.非洲猪瘟不同样本的提取效率
Part 2 核酸检测解决方案
通用型全预混、高灵敏、支持快速扩增的多重RT-qPCR预混液
Hifair® Superpro Fast One Step RT-qPCR Master Mix(UDG Plus)(Cat#16913ES)
通用型高灵敏、高GC耐受性多重RT-qPCR预混液
Hifair® C203P1 Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit(UDG Plus)(Cat#16630ES)
可冻干的快速RT-qPCR预混液
Hifair® Lyo-Ready I Multiplex One Step RT-qPCR Kit(UDG plus)(Cat#16645ES)
产品优势
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操作高效便捷:一管试剂,支持快速程序,适合大规模疫病筛查;
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检测灵敏度高:优化的缓冲体系,提高了低浓度模板的检测灵敏度(200 copies/mL);
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试剂稳定性强:37℃加速7天,反复冻融性能稳定;
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dUTP/UDG防污染体系:引入了dUTP/UDG防污染系统,可有效防止气溶胶污染;
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多平台多体系适用: Bio-Rad CFX96、ABI Q5、7500、SLAN、天隆等仪器均适配
产品性能展示
16913ES低浓度模板检出率测试
图1. 16913ES热加速前后呼吸道靶标低浓度模板检测
结论:16913ES预混引探后在37℃加速5天,与-20℃保存、现配现用的试剂相比,扩增曲线峰形、荧光值、Ct值基本没有变化,检出率一致,说明16913ES全预混体系稳定性强、灵敏度高。
16630稳定性测试
红色:-20℃ 14d;蓝色:4℃ 7d;绿色:4℃ 14d;黄色:37℃ 7d;紫色:37℃ 14d.
图2. 16630不同温度下稳定性测试
16645冻干球性能及稳定性测试
图3. 16645冻干球性能及稳定性测试
结果:将含HPIV引物探针的16645体系按说明书上冻干工艺和条件进行冻干,冻干球在50℃条件下加热30天,与同批次刚出箱冻干球相比,扩增曲线峰形、Ct值、低浓度检出率(1copy/uL,20个重复,检出率均为100%)均没有差异,冻干球稳定性好。
IVD检测原料分享
翌圣生物在酶原料领域深耕多年,长期为IVD企业、第三方检验机构、科研机构等提供高品质、高性价比的分子诊断PCR原料,包括逆转录酶、RNase 抑制剂、Taq DNA 聚合酶、尿嘧啶糖基化酶(UDG/UNG酶)、taq酶抗体、dNTPs等单组份以及经过体系优化的qPCR/RT-qPCR预混液,可为临床/非临床诊断试剂盒开发提供性能优越、稳定的酶原料,助力下游企业客户共同解决人类病原及动物疫病的高效检测。
分子诊断PCR扩增工作流程及原料一览
基孔肯雅热的防控是一场与时间的赛跑。翌圣生物以技术创新为矛,以质量管控为盾,为公共卫生安全提供“快、准、稳”的检测解决方案。
系列产品推荐
产品类型 |
产品功能 |
产品名称 |
货号 |
核酸提取 |
提取试剂盒 |
MolPure® Magnetic Pathogen DNA/RNA Kit 磁珠法病原DNA/RNA提取试剂盒 |
18306ES |
MolPure® Magnetic Universal Viral DNA/RNA Kit 磁珠法通用病毒DNA/RNA提取试剂盒 |
18521ES |
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核酸提取仪 |
96通道自动化核酸提取仪 |
80510ES |
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RT-qPCR Mix |
二代全预混、快速 |
Hifair® Superpro Fast One Step RT-qPCR Master Mix(UDG Plus) |
16913ES |
高灵敏通用快速 |
Hifair® C203P1 Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit(UDG Plus) |
16630ES |
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高浓度一管式 |
Hifair® Advanced One Step RT-qPCR Probe Mix(UDG Plus) |
16921ES |
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一代全预混通用 |
11899ES |
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通用快速可冻干 |
Hifair® Lyo-Ready I Multiplex One Step RT-qPCR Kit(UDG plus) |
16645ES |