微球菌核酸酶简介

微球菌核酸酶(Micrococcal Nuclease, MNase)，也被称为Micrococcal Endonuclease或S7 Nuclease，是一种来源于金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的DNA 和 RNA 核酸内切酶。MNase酶在pH7-10和Ca²⁺的条件下可降解单链、双链、线状、环状等多种形式的DNA或RNA的5'磷酸键，并产生3'磷酸末端的单核苷酸和寡核苷酸，常用于染色质免疫沉淀实验中的染色质片段化！

图1. Micrococcal Nuclease作用原理^[1]

 

在染色质免疫沉淀实验中，MNase酶能够特异性消化核小体间连接区域的裸露DNA，而核小体核心颗粒中的DNA因受组蛋白的保护，可抵抗酶解作用，从而能完整保留与目标蛋白结合的DNA片段。相较于传统的超声波片段化方法（随机打断染色质，易损伤蛋白-DNA复合物），MNase酶切法具有高特异性与温和的酶切特性，能显著提升目标DNA的富集效率与实验分辨率（图2）。

图2. MNase酶切割效果^[2]

目前应用广泛的适用于极低细胞投入量的ChIP-seq新技术—Ultra- Low-Input micrococcal nuclease-based Native ChIP(ULI-NchIP)^[3]，便是利用MNase酶解替代传统的超声法进行染色质的片段化。ULI-NchIP适用于微量实验材料, 可以从10³ 个细胞起始构建高质量测序文库, 适用于组蛋白修饰情况研究。

图3. ULI-NchIP-seq实验流程图^[4]

基于MNase酶在染色质片段化方面的卓越性能，翌圣生物特别开发了Micrococcal Nuclease （Cat#14546ES）。翌圣Micrococcal Nuclease无蛋白酶，宿主残留低至<1 copy / 2000 U，DNA底物切除能力（酶活）与进口品牌A*一致，轻松助力染色质免疫沉淀实验中的染色质片段化！

 

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产品名称	货号	规格	目录价	活动价
Micrococcal Nuclease(2,000 U/µL)	14547ES	320 KU	669元	0元

活动细则：

1. 活动时间：即日起-2025年4月30日；

2、活动名额有限，每位客户限一套。

 

 

翌圣Micrococcal Nuclease (Cat#14546ES)性能展示

1、DNA底物切除能力与进口品牌A*一致

分别使用翌圣的Micrococcal Nuclease与进口品牌A*的同类产品切除1ug λ DNA底物，50 uL体系，37℃反应15min。琼脂糖凝胶电泳检测结果表明，翌圣Micrococcal Nuclease与进口品牌A*的切除效果一致。

图4. DNA底物切除能力

2、无蛋白酶残留检测

将不同批次的10000 U Micrococcal Nuclease分别与相应的底物蛋白在37℃孵育16 h，琼脂糖凝胶电泳检测结果表明，翌圣Micrococcal Nuclease无蛋白酶残留。

图5. 蛋白酶检测

 

3、E. coli基因组DNA残留< 1 copy/2000 U

对不同批次的Micrococcal Nuclease进行E. coli gDNA残留检测，结果显示翌圣Micrococcal Nuclease宿主基因组DNA残留低于1 copy/2000 U。

图6. E. coli g DNA残留检测

 

参考文献

[1] Alexander M, Heppel LA, Hurwitz J. The purification and properties of micrococcal nuclease. Journal of Biological Chemistry. 1961;236:3014-3019

[2] Furey,Terrence S . ChIP-seq and beyond: new and improved methodologies to detect and characterize protein-DNA interactions.[J]. Nature Reviews Genetics, 2012, 13(12):840-52.

[3] Brind'Amour J, Liu S, Hudson M, Chen C, Karimi MM, Lorincz MC. An ultra-low-input native ChIP-seq protocol for genome-wide profiling of rare cell populations. Nat Commun. 2015 Jan 21;6:6033. doi: 10.1038/ncomms7033. PMID: 25607992.

[4] 王泓力,焦雨铃.染色质免疫共沉淀实验方法[J].植物学报, 2020, 55(4):6.DOI:10.11983/CBB20076.