产品描述
LDL是由极低密度脂蛋白(VLDL)转变而来,主要功能是把胆固醇运输到全身各处细胞,运输到肝脏合成胆酸,其可用于研究受体介导的内吞作用过程,尤其是在动脉粥样硬化等疾病中,其血浆来源的LDL可用于研究LDL在功能和代谢中的氧化作用。
氧化的LDL(Ox-LDL)是修饰LDL中的一类。修饰的LDL除包括氧化修饰的LDL外,还包括乙酰化LDL及丙二醛(MDA)、4-羟烯酸(4-HNE)直接结合的LDL,这些未经氧化修饰而仅经一般化学修饰的LDL称为衍化的LDL。
不同于衍化的LDL,Ox-LDL 的生理学独特性表现在:
1)在细胞生理功能影响上,Ox-LDL可诱发细胞毒性作用,影响花生四烯酸的代谢,抑制胆固醇酯化作用等,但衍化的LDL无上述效应;
2)Ox-LDL消耗LDL内源性抗氧化物质,使LDL上的维生素E含量下降,而MDA-LDL无上述效应;
3)氧化修饰涉及脂质过氧化反应,LDL中的PUFAs被氧化。MDA对LDL修饰,是直接和ApoB-100结合成希夫氏碱,脂质过氧化反应轻微;
4)氧化LDL在氧化程度低时,ApoB降解;在氧化程度高时,ApoB又可发生再聚合。MDA对LDL的修饰,ApoB无降解、聚合反应发生;
5)Ox-LDL 产生的荧光峰波长为430nm,而MDA -LDL的荧光峰波长为460nm。Ox-LDL不经LDL受体代谢,由清道夫受体识别、结合、内吞饮入细胞并丧失正常的胆固醇代谢途径,引起细胞内脂质沉积,泡沫样变。
LDL氧化修饰的方式有很多种,常见的有:
1)细胞介导的LDL氧化修饰,又称为生物氧化修饰的LDL。如内皮细胞,巨噬细胞,单核细胞都具有此功能;
2)过度金属离子介导的LDL氧化修饰,如Ca2+,Fe2+等;还有其他形式的氧化修饰,包括物理方法如紫外线,或过氧化物酶催化。
YEASEN提供的人源高氧化低密度脂蛋白(Human High Oxidized Low Density Lipoprotein,High Ox-LDL),是由过度铜离子介导人血浆来源的LDL进行的氧化修饰。新鲜血浆经检测为HCV,HBsAg和HIV阴性。本产品为无菌包装,可以直接稀释使用。本High Ox-LDL具有的高氧化水平使其产生明显的氧化应激,能够用来诱导细胞凋亡,以及建立细胞损伤模型。我们还提供中等氧化程度的Ox-LDL(货号:20605ES05),广泛用于脂质代谢的研究。除提供Ox-LDL,我们还提供人源乙酰化LDL(Ac-LDL),以及荧光标记的LDL。
制备方法
37℃,在含Cu2SO4的PBS溶液中氧化人LDL,加入过量的EDTA终止氧化反应。
产品性质
蛋白纯度(Purity) |
>97%(琼脂糖凝胶电泳) |
蛋白浓度(Concentration) |
0.8-3.0 mg/ml |
外观(Appearance) |
无色乳状液体 |
缓冲液组分(Buffer Components) |
PBS, pH 7.4 |
氧化程度(Oxidized Level) |
TBARS检测(根据MDA的含量反映LDL的氧化程度) 起始LDL:0.1~0.5 nmol MDA/mg蛋白 高Ox-LDL:90~100 nmol MDA/mg蛋白 |
稀释方法
根据实验需要用PBS磷酸盐缓冲液或细胞培养液稀释即可。
运输与保存方法
冰袋运输。4℃保存,建议避光,保存时间不要超过4周。千万不可冻存!!
注意事项
1) 本品的稀释工作液极不稳定,强烈建议根据单次需要用量,新鲜配制工作液;
2) 长期贮存可能会有沉淀析出,属于正常现象,低速离心2 min去除沉淀即可使用;
3) LDL与LDL受体的结合需要Ca2+和Mn2+的参与,过量EDTA的存在会抑制其结合;
4) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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