Human CXCL10/IP-10 ELISA Kit 人干扰素诱导蛋白10 ELISA检测试剂盒

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产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

 

IP-10最初被鉴定为单核细胞、成纤维细胞和内皮细胞中的IFN-γ诱导基因。人IP-10的小鼠同系物,CRG-2,与人IP-10有大约67%的氨基酸序列同一性。IP-10的氨基酸序列确定该蛋白是CXC趋化因子亚家族的成员。

翌圣Human CXCL10 ELISA(酶联免疫吸附测定)试剂盒是一种体外酶联免疫吸附测定试剂盒,用于定量测定血清、血浆和细胞培养上清中的人干扰素诱导蛋白10(Human CXCL10)。特异性抗干扰素诱导蛋白10抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本,经过孵育,样本中存在的干扰素诱导蛋白10与固相抗体结合。洗涤去除未结合的物质后,加入检测抗体(生物素标记)孵育结合,经洗涤,再加入酶结合物(HRP标记链霉亲和素)孵育结合。洗涤后,加入显色底物 TMB,避光显色。颜色反应的深浅与样本中干扰素诱导蛋白10的浓度成正比。加入终止液终止反应,在450 nm 主波长,630nm次波长测定吸光度值。

 

产品信息

货号

97013ES48 / 97013ES96 

规格

48 T / 96 T

检测范围

15.6-1000 pg/mL

检测方法

双抗夹心法

检测物种

检测时长

4小时45分钟

灵敏度

4.460 pg/mL

稀释线性

72.2 - 119.4%

回收率

73.3 - 129.6%

板内差

9.2%

板间差

6.5%

 

实验数据

  1. 标曲数据

数据拟合绘制标准曲线,生成的标曲用于实验数据分析。

 

  1. 灵敏度检测

人干扰素诱导蛋白10的最低检测限为4.460 pg/mL,通过使用重复检测20次零孔OD值的均值与标准差计算得出。

  1. 精密度检测

酶标板内精密度

3个已知浓度的样本酶标板内重复测定20次,评估酶标板内的精密度。

酶标板间精密度

3个已知浓度的样本酶标板间重复检测36次,评估酶标板间的精密度。

项目

板内精密度

板间精密度

样本

1

2

3

1

2

3

20

20

20

36

36

36

平均值

553.0

137.2

37.4

630.1

142.2

37.6

标准差

46.9

12.4

3.8

55.3

7.3

1.8

变异系数%

8.5

9.0

10.0

9.7

5.2

4.7

  1. 回收率检测

  通过不同水平的人干扰素诱导蛋白10添加于样本中来测定回收率,其回收率如下:

样本类型

平均回收率(%)

范围(%)

血清

107.7

94.5-125.3

血浆

105.1

75.6-129.6

细胞培养上清

97.6

73.3-121.3

  1. 稀释线性检测

血清稀释比例

平均期望值(%)

范围(%)

1:02

108.4

94.0-111.9

1:04

98.6

88.3-112.6

1:08

104.7

93.4-119.4

1:16

97.6

88.4-112.0

 

血浆稀释比例

平均期望值(%)

范围(%)

1:02

101.5

90.2-113.6

1:04

100.3

90.6-115.4

1:08

97.5

84.4-111.9

1:16

91.1

81.0-107.7

 

细胞培养上清稀释比例

平均期望值(%)

范围(%)

1:02

93.9

87.4-97.4

1:04

84.1

73.9-95.7

1:08

86.2

74.5-107.0

1:16

82.3

72.2-100.1

  1. 样本值

应用本试剂盒,检测若干健康志愿者的样本,志愿者的用药史不详。

样本类型

样本数目

平均值(pg/mL)

样本值(pg/mL)

血清

10

128

40-490

EDTA血浆

4

117

35-340

肝素血浆

3

138

48-272

枸橼酸钠血浆

4

172

n.d.-424

细胞培养上清

10

n.d.

n.d.

n.d. 指样本浓度值低于检测范围内得15.6 pg/mL

  1. 测定特异性

本试剂盒识别天然和重组人干扰素诱导蛋白10。下述因子进行了特异性的评估,没有观察到明显的交叉反应和干扰影响。

Recombinant human:

Recombinant mouse:

GROα

IP-10/CRG-2

NRG1-β1/HRG1-β1

 

Lymphotactin

 

MIG

 

TNF-α

 

TYK-2

 

 

检测简图

 

 

疑问解答

问题

造成原因

解决方法

标曲不好

移液量不准确

检查移液器,按时校准,仔细操作,充分混匀时盖紧管口并尽量避免泡沫。

稀释方法不恰当

显色值偏低

孵育时间太短

给予足够的孵育时间,样本和溶解的标准品隔夜后更换。

移液量不足或稀释不当

校准移液器和规范操作

CV偏高

酶标板清洗不当

使用正确的洗涤工序;如果使用洗板机,检查所有的端口是否堵塞。

受污染的洗液

准备新鲜洗液

灵敏度较低

试剂盒储存不当

按照产品组分表进行保存。

 

400-6111-883