IP-10最初被鉴定为单核细胞、成纤维细胞和内皮细胞中的IFN-γ诱导基因。人IP-10的小鼠同系物,CRG-2,与人IP-10有大约67%的氨基酸序列同一性。IP-10的氨基酸序列确定该蛋白是CXC趋化因子亚家族的成员。
翌圣Human CXCL10 ELISA(酶联免疫吸附测定)试剂盒是一种体外酶联免疫吸附测定试剂盒,用于定量测定血清、血浆和细胞培养上清中的人干扰素诱导蛋白10(Human CXCL10)。特异性抗干扰素诱导蛋白10抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本,经过孵育,样本中存在的干扰素诱导蛋白10与固相抗体结合。洗涤去除未结合的物质后,加入检测抗体(生物素标记)孵育结合,经洗涤,再加入酶结合物(HRP标记链霉亲和素)孵育结合。洗涤后,加入显色底物 TMB,避光显色。颜色反应的深浅与样本中干扰素诱导蛋白10的浓度成正比。加入终止液终止反应,在450 nm 主波长,630nm次波长测定吸光度值。
产品信息
货号 |
97013ES48 / 97013ES96 |
规格 |
48 T / 96 T |
检测范围 |
15.6-1000 pg/mL |
检测方法 |
双抗夹心法 |
检测物种 |
人 |
检测时长 |
4小时45分钟 |
灵敏度 |
4.460 pg/mL |
稀释线性 |
72.2 - 119.4% |
回收率 |
73.3 - 129.6% |
板内差 |
9.2% |
板间差 |
6.5% |
实验数据
数据拟合绘制标准曲线,生成的标曲用于实验数据分析。
人干扰素诱导蛋白10的最低检测限为4.460 pg/mL,通过使用重复检测20次零孔OD值的均值与标准差计算得出。
酶标板内精密度
3个已知浓度的样本酶标板内重复测定20次,评估酶标板内的精密度。
酶标板间精密度
3个已知浓度的样本酶标板间重复检测36次,评估酶标板间的精密度。
项目 |
板内精密度 |
板间精密度 |
||||
样本 |
1 |
2 |
3 |
1 |
2 |
3 |
20 |
20 |
20 |
36 |
36 |
36 |
|
平均值 |
553.0 |
137.2 |
37.4 |
630.1 |
142.2 |
37.6 |
标准差 |
46.9 |
12.4 |
3.8 |
55.3 |
7.3 |
1.8 |
变异系数(%) |
8.5 |
9.0 |
10.0 |
9.7 |
5.2 |
4.7 |
通过不同水平的人干扰素诱导蛋白10添加于样本中来测定回收率,其回收率如下:
样本类型 |
平均回收率(%) |
范围(%) |
血清 |
107.7 |
94.5-125.3 |
血浆 |
105.1 |
75.6-129.6 |
细胞培养上清 |
97.6 |
73.3-121.3 |
血清稀释比例 |
平均期望值(%) |
范围(%) |
1:02 |
108.4 |
94.0-111.9 |
1:04 |
98.6 |
88.3-112.6 |
1:08 |
104.7 |
93.4-119.4 |
1:16 |
97.6 |
88.4-112.0 |
血浆稀释比例 |
平均期望值(%) |
范围(%) |
1:02 |
101.5 |
90.2-113.6 |
1:04 |
100.3 |
90.6-115.4 |
1:08 |
97.5 |
84.4-111.9 |
1:16 |
91.1 |
81.0-107.7 |
细胞培养上清稀释比例 |
平均期望值(%) |
范围(%) |
1:02 |
93.9 |
87.4-97.4 |
1:04 |
84.1 |
73.9-95.7 |
1:08 |
86.2 |
74.5-107.0 |
1:16 |
82.3 |
72.2-100.1 |
应用本试剂盒,检测若干健康志愿者的样本,志愿者的用药史不详。
样本类型 |
样本数目 |
平均值(pg/mL) |
样本值(pg/mL) |
血清 |
10 |
128 |
40-490 |
EDTA血浆 |
4 |
117 |
35-340 |
肝素血浆 |
3 |
138 |
48-272 |
枸橼酸钠血浆 |
4 |
172 |
n.d.-424 |
细胞培养上清 |
10 |
n.d. |
n.d. |
n.d. 指样本浓度值低于检测范围内得15.6 pg/mL
本试剂盒识别天然和重组人干扰素诱导蛋白10。下述因子进行了特异性的评估,没有观察到明显的交叉反应和干扰影响。
Recombinant human: |
Recombinant mouse: |
GROα |
IP-10/CRG-2 |
NRG1-β1/HRG1-β1 |
|
Lymphotactin |
|
MIG |
|
TNF-α |
|
TYK-2 |
|
检测简图
疑问解答
问题 |
造成原因 |
解决方法 |
标曲不好 |
移液量不准确 |
检查移液器,按时校准,仔细操作,充分混匀时盖紧管口并尽量避免泡沫。 |
稀释方法不恰当 |
||
显色值偏低 |
孵育时间太短 |
给予足够的孵育时间,样本和溶解的标准品隔夜后更换。 |
移液量不足或稀释不当 |
校准移液器和规范操作 |
|
CV偏高 |
酶标板清洗不当 |
使用正确的洗涤工序;如果使用洗板机,检查所有的端口是否堵塞。 |
受污染的洗液 |
准备新鲜洗液 |
|
灵敏度较低 |
试剂盒储存不当 |
按照产品组分表进行保存。 |