产品描述

 

BsaI为Type IIs型限制性内切酶，可识别非回文序列，并在识别序列之外进行切割。常用于Golden Gate组装、酶切质粒以制备poly (A/T/G/C)结尾的线性化DNA片段，获得特定的粘性末端。

 

产品组分

 

组分编号	组分名称	产品编号/规格
		15204ES76 （500 U）	15204ES80 （1000 U）	15204ES90 （5000 U）
15204-A	BsaI（20 U/μL）	25 μL	50 μL	250 μL
15204-B	10× BsaI Buffer	250 μL	500 μL	2.5 mL

 

单位定义

 

37℃条件下，1小时完全切割1 μg DNA所需要的酶量定义为1个活性单位。

 

运输与保存方法

 

冰袋运输。-20°C保存，有效期2年。

 

识别位置

 

5'-GGTCTC(N)₁↓-3'

3'-CCAGAG(N)₅↑-5'

 

推荐反应条件

 

1× BsaI Buffer；

最适37°C孵育。

 

失活条件

 

80°C孵育20 min。

 

注意事项

 

1）3 h孵育未表现星号活性，延时酶切可能出现星号活性；

2）受CpG甲基化影响，序列完全重叠，剪切阻断；

3）受Dcm甲基化影响，序列完全重叠，剪切阻断；

4）受EcoBI甲基化影响，序列完全重叠，剪切可能受阻；

5）为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作；

6）本产品仅作科研用途！

 

使用方法

 

1）按如下建议的加样顺序配制体系反应液（冰上操作）：

组分	体系
10× BsaI Buffer	5 μL
底物DNA	2-4 μg
BsaI（20 U/μL）	1 μL
Total	50 μL

注：1× BsaI Buffer：20 mM Tris-HAc pH7.9, 50 mM KAc, 10mM Mg(Ac)₂,100ug/ml OsrHSA。

2）37°C孵育1 h。

3）80°C孵育20 min即可使酶失活，停止反应。

HB221101