Hieff® Taq DNA ligase (800 U/µL)

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产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

 

Hieff® Taq DNA Ligase是一种突变型的Taq DNA连接酶,具有较高的连接效率,应用于同源重组性能较野生型得到显著提高。同时维持了野生型的基本功能,是一种耐高温连接酶,它能催化与同一互补靶DNA链杂交的两条相邻寡核苷酸链的5´-磷酸和3´-羟基之间形成磷酸二酯键。该催化反应只有当两条寡核苷酸链与互补靶 DNA 完全配对,且两条寡核苷酸链之间没有间隙的条件下才会发生,因此,可以用它来检测单碱基替换。Taq DNA连接酶以NAD+为辅酶因子,在45℃-65℃范围内均有活性。

 

产品组分

组分编号

组分名称

产品编号/规格

14958ES03

1 mL)

14958ES08

5 mL)

14958ES50

50 mL)

14958

Hieff® Taq DNA ligase (800 U/µL)

1 mL

5 mL

50 mL

 

来源

重组E. coli 菌株,含有从Thermus aquaticus HB8中克隆的连接酶基因。

 

产品应用

1)同源重组;

2)用连接酶检测反应和连接酶链式反应对等位基因进行特异性检测;

3)通过PCR扩增掺入磷酸化寡核苷酸进行诱变。

 

单位定义

50 μL反应体系中,45℃条件下,孵育15 min能使50%的1 μg经BstEII消化的λDNA片段(12 bp粘性末端)发生连接所需要的酶量定义为1个活性单位(U)。

 

运输与保存方法

干冰运输。-20℃保存,有效期2年。长时间(大于30天)保存时,缓冲液应于-80℃保存

 

注意事项

1. 10×Taq DNA Ligase Reaction Buffer中含有辅酶因子NAD+,为了延长NAD+的半衰期,Buffer应于-80℃储存;

2. Taq DNA Ligase不能替代T4 DNA ligase;

3. 本产品仅做科研用途;

4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

使用方法

  1. 反应体系配制:

组分

用量

DNA

up to 1 µg

10×Taq DNA Ligase Reaction Buffer (Cat#15823)

5 μL

Taq DNA Ligase (800 U/µL)

80 U

ddH2O

up to 50 μL

2. 反应条件:45℃温育15 min。加入终止染液(50%甘油,50 mM EDTA和溴酚兰)终止反应。

HB221128

400-6111-883