T4 polynucleotide Kinase (25U/μL)
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T4 Polynucleotide kinase是一种多聚核苷酸5’-羟基激酶,能够催化ATP的γ-磷酸基团转移到寡核苷酸链(双链或单链DNA或者RNA)的5’-羟基末端以及3’-单磷酸核苷上,并且该反应是可逆的。具有3’-端磷酸酶活性,将3’-磷酸基团从寡核苷酸的3’-磷酸末端、脱氧3’-单磷酸核苷和脱氧3’-二磷酸核苷上水解。当ADP存在时,T4 PNK具有5’-端磷酸酶活性,催化5’-P-寡聚/多聚核苷酸和ATP末端5’-磷酸基团交换。适用于DNA文库的构建以及末端标记制作探针。
应用场景:
- DNA或RNA5´末端的磷酸化,以便进行连接反应;
- DNA或RNA的末端标记,用作探针和进行DNA测序;
- 将3´端已经磷酸化的单核苷酸5´磷酸化,制备pNp底物,用于添加到DNA或RNA的3´端;
- 对3´端有磷酸基团的寡核苷酸的5´端进行标记。
产品特色
- 辅因子:反应需要Mg2+和SH试剂如DTT的参与;
- 抑制剂:7 mM的磷酸、焦磷酸盐或磷酸钠能够抑制酶50%的活性,7 mM的硫酸铵抑制酶75%的活性。
存储条件
干冰运输。-20℃保存,有效期1年。
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