Hieff Canace® Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase (3 U/μL) 耐U+高保真DNA聚合酶

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产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

产品简介

Hieff Canace® Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase是一种基于Pfu DNA Polymerase改造而成的新一代高保真DNA聚合酶Pfu DNA Polymerase相比Hieff Canace® Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase的性能得到大幅度提升针对复杂的模板也能快速准确的完成PCR反应。其保真性显著提高,且解决了常规高保真酶无法以dUTP为原料进行聚合反应、无法使用含有dUTP的扩增引物以及无法使用含有dUTP的DNA作为扩增模板等诸多问题。本产品具有极强的扩增效率和广泛的模板适应性,适合复杂模板的扩增。

 

产品信息

货号

14384ES03 / 14384ES08 / 14384ES50

规格

3 KU / 15 KU / 150 KU

浓度

3 U/µL

 

组分信息

组分编号

组分名称

14384ES03

14384ES08

14384ES50

14384-A

Hieff Canace® Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase (3 U/μL)

1 mL

5 mL

50 mL

 

产品应用

1.使用含dUTP的引物进行高保真文库扩增;

2.使用含dUTP的模板进行高保真文库扩增;

3.使用含dUTP的dNTP进行高保真文库扩增。

 

储存条件

-25~-15℃保存,有效期1年。

 

使用说明

Hieff Canace® Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase与常规高保真酶的使用方法略有不同。在使用前,请务必仔细阅读使用说明。

1.所有操作应于冰上进行,2×Canace® Uracil+ PCR buffer解冻后请充分混匀。体系配置之前请预热PCR仪,各组分添加完成之后用移液器吸打充分混匀并短暂离心至管底,然后置于预热的PCR仪中进行反应。所有组份使用完毕之后及时放回-20℃保存。

 

 

 

1)推荐配置应用反应与体系:

组分

体积

模板DNA*

X µL

2×Canace® Uracil+ PCR buffer (含Mg2+,dNTPs)

25 µL

正向引物 (10~25 μM)

1~2.5 µL

反向引物 (10~25 μM)

1~2.5 µL

Hieff Canace® Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase (3 U/μL)**

0.34 µL

ddH2O

Total to 50 µL

*:使用纯化后的高质量DNA模板可以显著提高扩增效率和成功率。

**:50 μL体系中,推荐使用1 U 本品,可以在0.5-2 U之间进行优化,请勿超过2 U。此外,为了防止本品因3’→5’外切酶活性降解引物,建议将聚合酶在最后一步加到反应体系中。

2)反应体系中dNTPs使用终浓度为200 μM,如特殊情况下需要制备含dUTP的模板,可自行额外添加dUTP至终浓度为400 μM。反应体系中Mg2+终浓度2 mM,可供参考。

2.推荐反应程序

温度

时间

循环数

98°C

1 min*

1

98°C

10 sec

1~15(根据实验要求)

60°C**

30 sec

72°C***

30 sec

72°C

5 min

1

4°C

Hold

-

*:预变性温度推荐使用98°C。预变性推荐时间:质粒DNA等简单模板为30 sec;文库为1 min;cDNA、基因组DNA等复杂模板为3 min;高GC含量模板为5-10 min。

**:退火温度推荐使用60°C,也可根据需要,设立温度梯度去摸索引物退火的最适温度。推荐退火时间为20 sec,可以在10-30 sec内调节。退火时间太长可能导致扩增产物在胶上呈弥散状。

***:延伸温度和时间:推荐使用72°C,延伸时间根据实际需要进行调整。

 

注意事项  

1.为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

2.本产品仅作科研用途

 

Ver.CN20240415

 

 

400-6111-883