本产品是大肠杆菌（Ecoli）来源的重组尿嘧啶-DNA糖基化酶（UDG），该酶能催化水解含有尿嘧啶的DNA链的尿嘧啶碱基和糖磷酸骨架的N-糖苷键，释放游离尿嘧啶。UDG酶常被用于消除PCR扩增引起的气溶胶污染。

 

产品组分

编号	组分名称	产品编号/规格
		10304ES60 (100U)	10304ES76 (500U)	10304ES25 (25 mL)	10304ES72 (250 mL)
10304	Uracil DNA Glycosylase (UDG)	100 μL	500 μL	5× 5 mL	50× 5 mL

 

产品应用

1. 去除含dU的PCR产物气溶胶污染。

2. 去除单链或双链DNA尿嘧啶碱基。

 

酶活定义

以37℃，30 min内完全降解1 μg含有尿嘧啶的dsDNA所需酶量定义为1个活性单位（U）。

 

失活方式

85℃，5 min。

 

运输与保存方法

干冰运输。-20℃储存，有效期1年。

 

注意事项

1. UDG在多数PCR反应缓冲液中均有活性；

2. 酶使用时宜存放在冰盒内或冰浴上，使用完毕后宜立即放置于-20℃保存；

3. 本产品仅做科研用途；

4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

应用实例

1. 按下列体系配制PCR反应液：

组分	体积（μL）	终浓度
10×PCR Buffer (Mg2+ Plus)	5	1×
25 mM MgCl2	3	1.5 mM
dUTP (10 mM)	1	0.2 mM
dCTP / dGTP/ dATP/ dTTP (10 mM each)	1	0.2 mM each
模板DNA	X	-
引物1 (10 μM)	2	0.4 μM
引物2 (10 μM)	2	0.4 μM
Taq DNA Polymerase (5 U/μL)	0.5	0.05 U/μL
Uracil DNA Glycosylase (UDG)	1	1 U/50 μL
ddH2O	Up to 50	-

【注】：根据实验需要，dUTP终浓度可在0.2-0.6 mM 之间调整。可选择性掺入0.2 mM dTTP。

2. PCR反应：

反应温度	反应时间	循环数	目的
37℃	10 min	1	降解含U模板
94℃	2 min	1	UDG酶失活，模板预变性
95℃	10 sec	30-35	变性
60℃	20 sec		退火
72℃	30 sec/kb		延伸
72℃	5 min	1	终延伸

【注】：37℃消化反应时间可以根据实验需要在5-10 min内调整。

HB220615