产品简介

 

本产品是一款以磁珠为纯化介质的外泌体microRNA提取试剂盒，专门用于提取外泌体中的microRNA，用于反转录、Northern Blot或测序等生物学实验。

 

组分信息

 

组分编号	组分名称	41224ES01
41224-A	microRNA提取裂解液	100 mL
41224-B	Wash Buffer C（去蛋白液）	30 mL
41224-C	Wash Buffer D（漂洗液）	9 mL
41224-D	Elution Buffer R（洗脱液）	10 mL
41224-E	Magnetic Bead（磁珠）	1.5 mL
41224-F	DNA去除柱（中）	30 套

 

储存条件

 

常温运输，Magnetic Bead 4℃保存，其他试剂常温保存，有限期2年。

 

使用说明

 

1. 自备耗材

异丙醇，无水乙醇，15 mL 离心管，RNase - free EP管和枪尖。

2. 使用说明

1）在Wash Buffer D（漂洗液）中加入21 mL无水乙醇，混匀，制备漂洗液。

2）按照外泌体溶液：microRNA裂解液（Lysis Buffer for microRNA）=1 : 3 的比例，在 1 mL外泌体溶液中加入 3 mL microRNA提取裂解液，混匀，室温静置 3 - 5 min。

3）将混合液体转移至DNA去除柱内，12, 000 g，4℃离心2 min，保留滤液，弃DNA去除柱。

4）向滤液中加入等体积的异丙醇（4 mL，使异丙醇的终浓度达到50%以上），颠倒混匀。

5）加入50 μL磁珠（吸取磁珠前先震荡混匀），置于静音混合器中4℃旋转孵育30 min。

6）取出离心管，置于磁力架上，使磁珠聚集；或置于离心机中，3, 000 g，4℃离心2 min，沉淀磁珠。弃上清。

7）加入 0.5 - 1 mL Wash Buffer C（去蛋白液），轻微震荡（Vortex，1,000 rpm）30 sec，洗涤磁珠，离心法或磁力法沉淀磁珠，弃上清。

8）加入 0.5 - 1 mL Wash Buffer D（漂洗液，注意是否加入乙醇）, 轻微震荡（Vortex，1,000 rpm）30 sec，洗涤磁珠，离心法或磁力法沉淀磁珠，弃上清。

9）3, 000 g，4℃离心 2 min，沉淀磁珠，用移液枪移除残液。

10）加入100 μL Elution Buffer R 或 RNase-free ddH₂O，震荡（Vortex，2,000 rpm），30 sec，洗脱RNA。

11）置于磁力架上使磁珠聚集，或 7, 000 g，4℃离心 2 min，沉淀磁珠。转移上清液至新的EP管中，即为microRNA溶液。

12）测定microRNA 浓度与纯度，用于反转录或其它实验，或保存于-80℃冰箱。

 

注意事项

 

1. 本产品仅作科研用途。

2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

3. 请使用RNase - free的器具与耗材，如EP管，枪尖等。

4. 整个实验过程需要低温操作。

5. 请使用新鲜的外泌体样品或-80℃保存的外泌体样品，避免microRNA降解。

 

 

Ver.CN20241204