人白介素10 (Human IL-10)，也称为细胞因子合成抑制因子（CSIF），能够抑制Th1细胞的激活和相关细胞因子（如IL-1β和 TNF-α）的产生。IL-10是一种178个氨基酸的分子，含有两个链内二硫键桥，并以36kDa的非共价相关同源二聚体的形式表达。成熟的人IL-10与牛、犬、马、猫、小鼠、绵羊、猪和大鼠IL-10具有72%至86%的氨基酸序列同一性。IL-10可以靶向各种白细胞，减弱过度的免疫反应。它影响单核细胞/巨噬细胞的三个重要功能：抗原呈递、免疫介质的释放和吞噬作用，这也代表它抑制了单核细胞/巨噬细胞的所有功能。与IL-4、IL-5类似，IL-10也参与了自身免疫病的发展。如炎症性肠病（IBD）中可以观察到IL-10 的存在；在慢性肝部炎症中，IL-10起到了保护作用。

翌圣Human IL-10 ELISA(酶联免疫吸附测定)试剂盒是一种体外酶联免疫吸附测定试剂盒，用于定量测定血清、血浆和细胞培养上清中的IL-10。特异性抗IL-10抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本，经过孵育，样本中存在的IL-10与固相抗体结合。洗涤去除未结合的物质后，加入检测抗体孵育结合，经洗涤，再加入酶结合物(Streptavidin-HRP)孵育结合。洗涤后，加入显色底物 TMB，避光显色。颜色反应的深浅与样本中IL-10的浓度成正比。加入终止液终止反应，在450 nm 波长(参考波长570 - 630 nm)测定吸光度值。

 

产品信息

货号	97063ES48 / 97063ES96
规格	48 T / 96 T
检测范围	62.5-4000 pg/mL
检测方法	双抗夹心法
检测时长	4.5小时
灵敏度	27.5 pg/mL
稀释线性	79 - 117%
回收率	80 - 118%
板内差	5.9%
板间差	7.1%

 

实验数据

1. 标曲数据

数据拟合绘制标准曲线，生成的标曲用于实验数据分析。

2. 灵敏度检测

IL-10的最低检测限为27.5 pg/mL，通过使用重复检测20次零孔OD值的均值与标准差计算得出。

3. 精密度检测

酶标板内精密度

3个已知浓度的样本酶标板内重复测定6次，评估酶标板内的精密度。

酶标板间精密度

3个已知浓度的样本酶标板间重复检测18次，评估酶标板间的精密度。

项目	板内精密度			板间精密度
样本	1	2	3	1	2	3
	6	6	6	18	18	18
平均值	2228.9	545.8	133.4	2200.5	537.4	126.9
标准差	191.2	18.6	7.8	193.7	20.8	11.0
变异系数（%）	8.6	3.4	5.8	8.8	3.9	8.6

4. 回收率检测

 通过不同水平的IL-10添加于样本中来测定回收率，其回收率如下:

样本类型	平均回收率(%)	范围（%）
血清	89.3	79.9-96.8
血浆	105	85.5-115.1
细胞培养上清	106.3	83.8-117.6

5. 稀释线性检测

血清稀释比例	平均期望值(%)	范围（%）
1:02	109.1	100.9-117.3
1:04	99.6	88.5-111
1:08	104.3	98.7-114.5
1:16	100.3	85.2-115.5

 

血浆稀释比例	平均期望值(%)	范围（%）
1:02	97.8	93.6-102.5
1:04	96.6	90-101.3
1:08	93.0	78.9-102.7
1:16	90.8	81.4-97.3

 

细胞培养上清稀释比例	平均期望值(%)	范围（%）
1:02	101.8	98.3-104.4
1:04	89.2	83.8-101.3
1:08	98.6	85.1-113.7
1:16	89.8	81.2-97.1

6. 样本值

应用本试剂盒，检测若干健康志愿者的样本，志愿者的用药史不详。

样本类型	样本数目	平均值（pg/mL）	样本值（pg/mL）
血清	4	n.d.	n.d.
血浆	8	n.d.	n.d.
细胞培养上清	6	n.d.	n.d.

n.d. 指样本浓度值低于检测范围内得62.5 pg/mL

7. 测定特异性

本试剂盒识别天然和重组IL-10，没有观察到明显的交叉反应和干扰影响。

Recombinant  human:		Recombinant  Mouse:	Recombinant  Rat:
IL- 1β	IL-17A	IL-1β	IL-1β
IL-2	IL-21	IL-2	IL-2
IL-4	IL-22	IL-4	IL-4
IL-5	IL-23	IL-6	IL-6
IL-6	TNF-α	IL- 10	IL- 10
IL-8		IL- 17A	IL- 17A
IL-12		TNF-α	TNF-α