产品简介

 

低熔点琼脂糖（Low melting point agarose）是经过改良使得成胶温度和熔点更低的琼脂糖，相比于常规琼脂糖，分子筛特性更好，条带清晰度更高。非常适用于分子量大于1000 bp核酸的分离以及电泳后核酸片段的回收（因其约在65.5°C熔化，几乎低于所有核酸分子的熔点）。低熔点琼脂糖凝胶电泳纯化回收的DNA胶条重熔后，可以直接用于制备放射性同位素标记的DNA探针。限制性酶切核酸片段经低熔点琼脂糖凝胶电泳分离后，切胶回收的核酸胶条重熔后也可以非常方便的直接克隆到质粒中。本品也适用于组织培养细胞的克隆和病毒空斑实验。

琼脂糖的基本参数，包括：

1）硫酸盐含量（sulfate content）——纯度指标，因为硫酸根是存在琼脂糖内的主要离子基团；

2）凝胶强度（gel strength）——施加于凝胶使之断裂的外力；

3）胶凝点（Gel point）——水溶性琼脂糖溶液冷却后形成凝胶时的温度。液体向凝胶转化的过程中，琼脂糖溶液具有滞后性，因此，胶凝点不等同于胶熔点；

4）电渗（EEO）——液体穿透凝胶的一种电动运动。琼脂糖凝胶内的阴离子基团吸附在基质上不会发生迁移，但是解离的阳离子就会朝负极迁移，从而产生电渗。由于生物聚合物的电泳迁移通常是朝负极运动，则EEO产生的内部对流会干扰分离效率。

 

储存条件

 

室温保存，有效期5年。

 

产品性质

 

CAS号（CAS NO.）	39346-81-1
外观（Appearance）	白色至类白色粉末
凝胶强度（Gel Strength, 1.0%）	≥200 (g/cm2)
胶凝温度域（Geling Range, 1.5%）	26-30℃
熔胶温度域（Melting Range, 1.5%）	≤65℃
电渗值（EEO, -mr）	≤0.06
硫酸盐（Sulfate, %）	≤0.10%
DNA酶（DNase）	None Detected
RNA酶（RNase）	None Detected
蛋白酶（Protease）	None Detected

 

使用说明

 

凝胶制备方法

1. 根据制胶量及凝胶浓度，在加有一定量的电泳缓冲液的三角锥瓶中，加入准确称量的琼脂糖粉（总液体量不宜超过三角锥瓶的50%容量）。

2. 在微波炉中加热琼脂糖至完全溶解。

*必须保证琼脂糖充分完全溶解，此时琼脂糖胶液清澈，否则，会造成电泳图像模糊不清。加热时如胶液剧烈沸腾发泡，停止加热。微波炉中加热时间不宜过长。

3. 加入翌圣YeaRed核酸染料（Cat#10202ES）或YeaGreen核酸染料（Cat#10204ES），使用终浓度为1×（即每50 mL琼脂糖溶液中加入5 μL 10,000×核酸染料）。
4. 将含有YeaRed或YeaGreen核酸染料的琼脂糖溶液倒入制胶器并插好梳子，室温下凝固约30-60 min。
5. 按照常规方法上样并电泳，推荐电泳电压70-90 V，时间40-60 min。
6. YeaRed紫外观察，YeaGreen紫外、蓝光观察。

凝胶浓度及缓冲液的选择

琼脂糖浓度	有效分离范围（bp）	推荐缓冲液
1.2%	400-7000	1×TAE
1.5%	250-5000	1×TAE/0.5×TBE
2.0%	150-3000	0.5×TBE

 

注意事项

 

1. 可用煮沸或微波加热的方法来溶胶，琼脂糖溶化必须彻底。溶胶可能会引起暴沸，需注意防止烫伤。
2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
3. 本产品仅作科研用途！

Ver.CN20241115