产品简介

 

16S （V3V4）细菌扩增子建库试剂盒利用高通量测序技术对16S rDNA中V3-V4区片段进行扩增，结合生物信息学技术，检测特定环境下的微生物（主要是细菌），鉴定所检细菌种类，提供环境样本物种分类、物种丰度、种群结构、系统进化等诸多信息。本试剂盒中包含进行细菌16S rDNA扩增的所有试剂，16S扩增引物F/R用于扩增细菌16S rDNA前500 bp的DNA 片段，组合Hieff NGS^® Tagment Index Kit for Illumina（Cat#12416）用于全序列DNA片段的扩增。试剂盒中提供的所有试剂都经过严格的质量控制和功能验证，最大程度上保证了文库构建的稳定性和重复性。

16S rRNA位于原核细胞核糖体小亚基上，包括10个保守区域（Conserved Regions）和9个高变区域（Hypervariable Regions），其中保守区在细菌间差异不大，高变区具有属或种的特异性，随亲缘关系不同而有一定的差异。因此，16S rDNA可以作为揭示生物物种的特征核酸序列，被认为是最适于细菌系统发育和分类鉴定的指标。16S rDNA扩增子测序（16S rDNA Amplicon Sequencing），通常是选择某个或某几个变异区域，利用保守区设计通用引物进行PCR扩增，然后对高变区进行测序分析和菌种鉴定，16S rDNA扩增子测序技术已成为研究环境样本中微生物群落组成结构的重要手段。对于不同环境样品的DNA，扩增其中16S rDNA中V3-V4区片段，可以区分鉴定绝大多数细菌，是最常用的细菌分类标准。

►适用100 pg- 10 ng的Meta样品，如粪便、土壤或Meta DNA样品等

►多样本验证可获得优异的文库与测序数据

►严格的批次性能与稳定性质控

 

产品应用

 

病原tNGS；DNA扩增子建库

 

产品优势

 

• 优异的扩增性能：检出率高、特异性优、均一性好
• 兼容逆转录体系：逆转录后无需纯化，可直接进行多重扩增
• 严格的背景菌控制：车间洁净、人员专业、质控严格

 

产品数据

 

1. 16S测序微生物检出占比分析情况

图1.  微生物标准品16S测序属水平检测的微生物占比分析

 

组分信息

 

组分编号		组分名称	12983ES08	12983ES24	12983ES96
12983-A	►	2×Hieff® Multiplex PCR Master Mix	100 μL	300 μL	1200 μL
12983-B	►	16S Primer Mix	16 μL	48 μL	192 μL
12983-C	►	2×Hieff Canace® Amplification Mix	100 μL	300 μL	1200 μL

【注】：本试剂盒组分适应于Illumina^® 测序平台，需要组合专属于Illumina^® 平台的Hieff NGS^® Tagment Index Kit for Illumina^®(Cat# 12416 )。

 

储存条件

 

12983-A组分 4℃保存，其他组分-25~-15℃保存，有效期1年。

 

操作流程

 

图1  文库制备流程图

 

Ver.CN20241030