UltraNuclease 全能核酸酶(同Benzonase Nuclease)及残留量检测ELISA Kit
UltraNuclease（Benzonase Nuclease） 全能核酸酶，又称为广谱核酸酶、非限制性核酸内切酶。能够在多种实验条件下切割和降解各种形式的DNA和RNA，广泛用于去除生物制品中的核酸。
UltraNuclease 生产全程均在GMP生产车间完成，质检方法均严格按照药典中的方法进行。该酶无蛋白酶活性、不含内毒素和任何病毒污染物，适用于各种应用场景，可适用于各种生物制品工业生产过程中残留核酸的去除。
◎ 降低细胞/细菌裂解时核酸释放产生的黏度，并且适用于任何裂解方式。
◎ 在大规模的层析纯化时，避免由于大量的核酸吸附在层析介质上降低蛋白质的有效载量从而降低纯化得率。
◎ 在 ELISA、二维电泳和免疫印迹分析中，提高分辨率和回收率。
◎ 消除重组蛋白、疫苗等生物制品的外源性核酸残留。
◎ 酶的比活≥1.5×106 U/mg（通用底物绝对定量法）
酶活*：在37℃，pH 8.0反应条件，2.625 mL反应体系中，在30 min内使△A260吸收值变化1.0（相当于完全消化37 μg鲑鱼精DNA成为寡核苷酸）所用的酶量定义为一个活性单位（U）
◎ 酶的纯度≥99%（HPLC）
◎ 不同反应条件对酶活的影响（部分数据）
为了探索UltraNuclease最合适的操作条件，我们研究了在多种缓冲体系下对酶活性的影响以下仅展示部分数据，如需完整数据，请联系我们。
◎ 储存及冻融稳定性
-20℃储存8周，酶活无明显变化；4℃、37℃储存8周，酶活分别下降约20%和25%。
-80℃~25℃反复冻融10次，酶活性不受影响。
◎ 质检标准符合GMP生产标准
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检测项目 |
质量标准 |
检测方法 |
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酶活 |
250-300 U/uL |
通用底物法 |
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比活 |
≥1.5×106 U/mg |
通用底物法 |
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蛋白纯度 |
≥99% |
SDS-PAGE |
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蛋白酶 |
符合要求 |
通用底物法 |
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细菌内毒素 |
符合要求 |
凝胶法 |
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宿主蛋白 |
阴性 |
ELISA法 |
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宿主DNA |
阴性 |
qPCR法 |
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无菌检测 |
无菌生长 |
通则1101 |
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病原体检测 |
阴性（不得检出） |
参照内部方法 |
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支原体检测 |
阴性（不得检出） |
参照内部方法 |
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重金属检测 |
符合要求 |
通则0821 |
在正常的纯化步骤中，全能核酸酶作为杂质很容易被去除。为了检测全能核酸酶的残留，翌圣研发了配套的UltraNuclease ELISA kit，能够准确检测样本中全能核酸酶的残留量，该试剂盒在线性、重复性、回收率及特异性等方面均表现稳定。
◎ 线性范围：0.047~3 ng/mL，R2＞0.99
◎ 批次间重复性好
在样本中加入固定浓度的UltraNuclease，用3个不同批次的ELISA试剂盒进行检测，在核酸酶浓度3~0.186 ng/mL之间，检测回收率均在70%~110%之间，CV＜10%。
◎ 模拟样本回收率
对于不同浓度UltraNuclease核酸酶样本回收率均在70%~130%之间，且优于其他品牌。
◎ 特异性强
我们评估了全能核酸酶抗体与8种常见样本的非特异性结合，干扰组与对照组结果重合，未见干扰。
* 表示与阴性相比有显著性差异；NS：表示与阴性结果无显著差异
◎ 在哪一步中加入 UltraNuclease？
这取决于您处理的样本。在病毒纯化时，一般在病毒澄清后加入；大肠杆菌蛋白纯化时，可以在菌体裂解时就加入；在处理细胞结团问题时，可以直接加入培养基中与细胞共培养。
◎ 如果反应温度无法达到37℃，该如何使用？
UltraNuclease的酶活性受到温度、处理时间、酶活单位的影响，如果温度无法达到37℃，可以适当添加酶的用量，或者延长孵育时间。
◎ UltraNuclease是否与蛋白酶抑制剂兼容？
可以兼容，但需要注意的是许多蛋白酶抑制剂含有EDTA。EDTA 开始高于1mM时，EDTA将抑制部分核酸酶的活性。
◎ 如何去除 UltraNuclease？
可通过 TFF、透析及色谱柱等方法将其去除。
◎ UltraNuclease ELISA kit可否用于其他品牌全能核酸酶残留的检测？
我们不建议这样做。ELISA kit 完全是基于UltraNuclease开发，能够对UltraNuclease进行准确定量。其他品牌的全能核酸酶在序列、生产工艺等方面可能与UltraNuclease有所不同，检测结果可能不准确。
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产品定位 |
产品名称 |
货号 |
规格 |
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降解各种形式的（双链，单链，线状，环状，天然或变性）DNA和RNA，广泛用于去除生物制品中的核酸。 |
20156ES25 /50/60 |
25KU/50KU /100 KU |
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20157ES25/60 /80/90 |
25KU/100 KU /1MU/5MU |
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检测UCF.ME® UltraNuclease全能核酸酶的残留 |
36701ES59 |
96T |
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在500 mM盐浓度条件下仍然有很高活性，广泛用于高盐样本中残留核酸的去除 |
20159ES25/50/ 60/80/90 |
25KU/50KU /100 KU/1MU/5MU |
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检测Salt Active UltraNuclease耐高盐全能核酸酶残留 |
36703ES48/96 |
48T/96T |
