----Anti-Flag/HA/Myc纯化凝胶、纯化磁珠、免疫磁珠
标签抗体简介
标签抗体（Tag Antibody）可用于检测和纯化各种商品化表达载体上的标签序列，以分析检测目的蛋白的表达含量及其功能。其原理是抗原—抗体反应，这些标签抗体可以高度特异地结合对应的标签融合蛋白。以下简单列举几个常见的适合使用标签抗体结合的蛋白标签。
表1. 不同蛋白标签介绍
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标签 |
序列 |
特点 |
适用场景 |
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Flag |
DYKDDDDK |
1、分子量小，不改变融合蛋白的功能，比同类标签更具亲水性； 2、含有肠激酶识别位点（DDDDK），融合在目标蛋白N端便于去除标签。 |
适用于真核表达系统低表达水平融合蛋白的纯化、检测 |
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HA |
YPYDVPDYA |
源于流感病毒的红细胞凝集素表面抗原决定簇，避免用于凋亡细胞。 |
蛋白的纯化、检测 |
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Myc |
Glu-Gln-Lys-Leu-Ile-Ser- Glu-Glu-Asp-Leu |
来源于人类原癌基因Myc，避免用于人源细胞相关实验。 |
一般不用于蛋白纯化，适用于检测 |
翌圣标签抗体亲和纯化产品选择指南
翌圣标签抗体亲和纯化类产品，以高质量的鼠源IgG单克隆抗体为原料，通过共价偶联的方式将其定向、高效的偶联到琼脂糖凝胶、琼脂糖磁珠、纳米磁珠表面，不仅降低了蛋白的非特异性结合、实现了介质较高的抗体载量，同时也获得了适用于不同纯化要求的标签抗体纯化产品，涵盖不同标签抗体的纯化凝胶、纯化磁珠、免疫磁珠，方便使用手动或自动化方式纯化标签蛋白、免疫沉淀实验。
纯化凝胶、纯化磁珠、免疫磁珠区别介绍
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纯化凝胶 |
纯化磁珠 |
免疫磁珠 |
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基质 |
琼脂糖凝胶 |
琼脂糖磁珠 |
硅基磁珠 |
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粒径 |
45-165 µm |
30-100 µm |
200 nm |
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电镜视野 |
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结合能力 |
天然的多孔结构，载量最大，特异性稍差 |
具有琼脂糖的结合能力，同时可以通过磁性分离 |
纳米级磁珠提供超大比表面积，具有更多的结合位点，非特异性吸附率低 |
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计量单位 |
琼脂糖凝胶和琼脂糖磁珠因为含有大量的水分，烘干后无法较为准确的计算成品质量浓度，因此成品按体积（mL）计算 |
磁珠是一种纳米级别的微球，分散在溶液中，按质量浓度计算，通过取一定体积的磁珠烘干，称重，得到质量浓度（mg/mL） |
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应用建议 |
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1、搭配磁性分离快速便捷的进行小量蛋白纯化。 2、也可用于免疫沉淀（IP）或免疫共沉淀（Co-IP） |
1、特别适合用于免疫沉淀（IP）或免疫共沉淀（Co-IP） |
翌圣标签抗体纯化产品选购指南
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产品系列 |
纯化树脂系列 |
纯化磁珠系列 |
免疫磁珠系列 |
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产品货号 |
20584ES |
20586ES |
20587ES |
20785ES |
20786ES |
20787ES |
20564ES |
20565ES |
20566ES |
20567ES |
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产品名称 |
Anti-Flag亲和纯化凝胶 |
Anti-HA亲和纯化凝胶 |
Anti-Myc亲和纯化凝胶 |
Anti-Flag纯化磁珠 |
Anti-HA纯化磁珠 |
Anti-Myc纯化磁珠 |
Anti-GFP免疫磁珠 |
Anti-Flag免疫磁珠 |
Anti-HA 免疫磁珠 |
Anti-Myc免疫磁珠 |
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配基 |
高质量的鼠源抗Flag/HA/Myc单克隆抗体 |
高质量的鼠源抗Flag/HA/Myc单克隆抗体 |
高质量的鼠源抗GFP/Flag/HA/Myc单克隆抗体 |
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蛋白结合量 |
≥1.1 mg Flag标签融合蛋白/mL凝胶 ≥1.5 mgHA标签融合蛋白/mL凝胶 |
≥1.0 mg Flag标签融合蛋白/mL磁珠 ≥1.0 mg HA标签融合蛋白/mL磁珠 ≥0.5 mg Myc标签融合蛋白/mL磁珠 |
≥0.8 mg GFP标签融合蛋白/mL磁珠 ≥0.6 mg Flag标签融合蛋白/mL磁珠 ≥0.4 mg HA标签融合蛋白/mL磁珠 ≥0.5 mg Myc标签融合蛋白/mL磁珠 |
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基质 |
4%交联的琼脂糖凝胶 |
琼脂糖磁珠 |
硅基磁珠 |
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平均粒径 |
45-165 µm |
30-100 µm |
200 nm |
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优势 |
非特异性结合低，高载量 |
载量高，配套磁力架使用方便 |
高纯度，高载量，高特异性，配套磁力架使用方便 |
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推荐应用 |
任意规模标签融合蛋白纯化、免疫沉淀（IP） |
搭配磁性分离快速便捷的进行小量蛋白纯化、免疫沉淀（IP）或免疫共沉淀（Co-IP） |
免疫沉淀（IP）、免疫共沉淀（COIP） |
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附：Anti-DYKDDDDK（Flag）IP/Co-IP Kit （Cat#20765ES）、Anti-HA IP/Co-IP kit（Cat#20766ES）
Anti-DYKDDDDK（Flag）IP/Co-IP Kit （Flag标签蛋白免疫（共）沉淀试剂盒）、Anti-HA IP/Co-IP kit (HA标签蛋白免疫（共）沉淀试剂盒)是一种通过高质量的Anti-Flag免疫磁珠、Anti-HA免疫磁珠，进行Flag、HA标签融合蛋白免疫沉淀或免疫共沉淀的试剂盒。试剂盒包含高质量的Anti-Flag免疫磁珠（Cat#20565ES）、Anti-HA免疫磁珠（Cat#20566ES）及经过优化验证的免疫沉淀必要试剂（IP裂解液、蛋白酶抑制剂，上样缓冲液，平衡、洗脱、中和缓冲液），每个反应使用25 uL磁珠，试剂盒所含试剂足够完成40个反应。
产品性能
翌圣Anti-Flag亲和纯化凝胶(20584ES)与国外进口品牌S*纯化对比测试
图3.Yeasen（a) PK进口品牌S*(b) Anti-Flag凝胶对比测试跑胶图
M：蛋白Marker；1：Flag-N、M、C蛋白柱前原液；2：Flag-N、M、C蛋白柱后穿透；3：洗脱（pH2.7洗脱）；4：洗脱（pH12洗脱）
下图中箭头所示为目的标签蛋白，磁珠直接煮沸
图4. Anti-HA纯化磁珠纯化HA标签蛋白效果图
图中箭头所示为目的标签蛋白，磁珠直接煮沸从上到下的三条带依次为BSA、抗体重链和抗体轻链
图5. Anti-Flag免疫磁珠纯化flag标签蛋白效果图
1: 含Flag标签蛋白的大肠杆菌裂解液 10 μL； 2: 含Flag标签蛋白的大肠杆菌裂解液与磁珠孵育后的上清 10 μL；
3: 含Flag标签蛋白的Anti-flag MagBeads直接煮沸 10 μL；4: Anti-Flag MagBeads直接煮沸；5：Marker
图6. Anti-GFP免疫磁珠纯化GFP标签蛋白效果图
1: 含GFP标签蛋白的大肠杆菌裂解液10 μL； 2: 含GFP标签蛋白的大肠杆菌裂解液与磁珠孵育后的上清10 μL；
3: 含GFP标签蛋白的Anti-GFP MagBeads直接煮沸 10 μL；4: Anti-GFP MagBeads直接煮沸；5：Marker
产品信息
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产品名称 |
货号 |
规格 |
目录价/元 |
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Anti-DYKDDDDK（Flag）Affinity Gel Anti-Flag亲和纯化凝胶 |
1 mL/5 mL/ 25 mL |
1936/6236/ 27286 |
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Anti-HA Affinity Gel Anti-HA亲和纯化凝胶 |
1 mL/5 mL/ 25 mL |
4356/13756/ 62786 |
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Anti-Myc Affinity Gel Anti-Myc亲和纯化凝胶 |
1 mL/5 mL/ 25 mL |
4356/13756/ 62786 |
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Anti-DYKDDDDK（Flag）MagAgarose Beads Anti-Flag纯化磁珠 |
1 mL/5 mL |
1985/6235 |
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Anti-HA MagAgarose Beads Anti-HA纯化磁珠 |
1 mL/5 mL |
1985/6235 |
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Anti-Myc MagAgarose Beads Anti-Myc纯化磁珠 |
1 mL/5 mL |
1985/6235 |
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Anti-GFP MagBeads Anti-GFP免疫磁珠 |
1 mL/5 mL |
2485/9985 |
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Anti-DYKDDDDK（Flag）MagBeads Anti-Flag免疫磁珠 |
1 mL/5 mL |
2485/9985 |
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Anti-HA MagBeads Anti-HA免疫磁珠 |
1 mL/5 mL |
2485/9985 |
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Anti-Myc MagBeads Anti-Myc免疫磁珠 |
1 mL/5 mL |
2485/9985 |
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Anti-DYKDDDDK（Flag）IP/Co-IP Kit Flag标签蛋白免疫(共)沉淀试剂盒 |
40 T |
2885 |
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Anti-HA IP/Co-IP Kit HA标签蛋白免疫(共)沉淀试剂盒 |
40 T |
2885 |
