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捕获Flag/HA/Myc标签蛋白之神器

标签抗体简介

标签抗体(Tag Antibody)可用于检测和纯化各种商品化表达载体上的标签序列,以分析检测目的蛋白的表达含量及其功能。其原理是抗原—抗体反应,这些标签抗体可以高度特异地结合对应的标签融合蛋白。以下简单列举几个常见的适合使用标签抗体结合的蛋白标签。

 

表1. 不同蛋白标签介绍

标签

序列

特点

适用场景

Flag

DYKDDDDK

1、分子量小,不改变融合蛋白的功能,比同类标签更具亲水性;

2、含有肠激酶识别位点(DDDDK),融合在目标蛋白N端便于去除标签

适用于真核表达系统低表达水平融合蛋白的纯化、检测

HA

YPYDVPDYA

源于流感病毒的红细胞凝集素表面抗原决定簇,避免用于凋亡细胞

蛋白的纯化、检测

Myc

Glu-Gln-Lys-Leu-Ile-Ser-

Glu-Glu-Asp-Leu

来源于人类原癌基因Myc,避免用于人源细胞相关实验

一般不用于蛋白纯化,适用于检测

 

翌圣标签抗体亲和纯化产品选择指南

图1.标签抗体亲和纯化凝胶实验流程图

 

图2.标签抗体免疫磁珠实验流程图

 

翌圣标签抗体亲和纯化类产品,以高质量的鼠源IgG单克隆抗体为原料,通过供价偶联的方式将其定向、高效的偶联到琼脂糖基质上或纳米磁珠表面,不仅降低了蛋白的非特异性结合、实现了介质较高的抗体载量,同时也获得了适用于不同纯化要求的标签抗体纯化产品,涵盖不同标签抗体的纯化填料、免疫磁珠,方便使用手动或自动化方式纯化标签蛋白、免疫沉淀实验。

 

翌圣标签抗体纯化产品选购指南

产品系列

纯化树脂系列

免疫磁珠系列

产品货号

20584ES

20586ES

20587ES

20588ES

20589ES

20564ES

20565ES

20566ES

20567ES

产品名称

Anti-Flag亲和纯化凝胶

Anti-HA亲和纯化凝胶

Anti-Myc亲和纯化凝胶

Anti-V5亲和纯化凝胶

Anti-His亲和纯化凝胶

Anti-GFP免疫磁珠

Anti-Flag免疫磁珠

Anti-HA

免疫磁珠

Anti-Myc免疫磁珠

配基

高质量的鼠源IgG单克隆抗体

高质量的鼠源抗GFP/Flag/HA/Myc单克隆抗体

蛋白结合量

≥1.1 mg Flag标签融合蛋白/mL凝胶

≥1.5 mgHA标签融合蛋白/mL凝胶
≥0.9 mg Myc标签融合蛋白/mL凝胶

≥0.5 mg V5标签融合蛋白/mL凝胶
≥1.1 mg His标签融合蛋白/mL凝胶

≥0.8 mg GFP标签融合蛋白/mL磁珠

≥0.6 mg Flag标签融合蛋白/mL磁珠

≥0.4 mg HA标签融合蛋白/mL磁珠

≥0.5 mg Myc标签融合蛋白/mL磁珠

基质

4%交联的琼脂糖凝胶

硅基磁珠

平均粒径

45-165 µm

200 nm

优势

非特异性结合低,高载量

高纯度,高载量,高特异性,配套磁力架使用方便

推荐应用

任意规模标签融合蛋白纯化、免疫沉淀(IP)

免疫沉淀(IP)、免疫共沉淀(COIP)

 

产品性能

01

翌圣Anti-Flag亲和纯化凝胶(20584ES)与国外进口品牌S*纯化对比测试

图3.Yeasen(a) PK进口品牌S*(b) Anti-Flag凝胶对比测试跑胶图

 

M:蛋白Marker;1:Flag-N、M、C蛋白柱前原液;2:Flag-N、M、C蛋白柱后穿透;3:洗脱(pH2.7洗脱);4:洗脱(pH12洗脱)

 

02

下图中箭头所示为目的标签蛋白,磁珠直接煮沸从上到下的三条带依次为BSA、抗体重链和抗体轻链

图4. Anti-Flag免疫磁珠纯化flag标签蛋白效果图

 

1: 含Flag标签蛋白的大肠杆菌裂解液 10 μL; 2: 含Flag标签蛋白的大肠杆菌裂解液与磁珠孵育后的上清 10 μL;3: 含Flag标签蛋白的Anti-flag MagBeads直接煮沸 10 μL;4: Anti-Flag MagBeads直接煮沸;5:Marker

 

图5. Anti-GFP免疫磁珠纯化GFP标签蛋白效果图

 

1: 含GFP标签蛋白的大肠杆菌裂解液10 μL; 2: 含GFP标签蛋白的大肠杆菌裂解液与磁珠孵育后的上清10 μL;3: 含GFP标签蛋白的Anti-GFP MagBeads直接煮沸 10 μL;4: Anti-GFP MagBeads直接煮沸;5:Marker

 

产品信息

产品名称

货号

规格

目录价/元

Anti-DYKDDDDK(Flag)Affinity Gel

Anti-Flag亲和纯化凝胶

20584ES03/08/25

1 mL/5 mL/

25 mL

1936/6236/

27286

Anti-HA Affinity Gel

Anti-HA亲和纯化凝胶

20586ES03/08/25

1 mL/5 mL/

25 mL

4356/13756/

62786

Anti-Myc Affinity Gel

Anti-Myc亲和纯化凝胶

20587ES03/08/25

1 mL/5 mL/

25 mL

4356/13756/

62786

Anti-V5 Affinity Gel

Anti-V5亲和纯化凝胶

20588ES03/08/25

1 mL/5 mL/

25 mL

4356/13754/

62786

Anti-His Affinity Gel

Anti-His亲和纯化凝胶

20589ES03/08/25

1 mL/5 mL/

25 mL

4354/13756/

62786

Anti-GFP MagBeads

Anti-GFP免疫磁珠

20564ES03/08

1 mL/5 mL

2485/9985

Anti-DYKDDDDK(Flag)MagBeads

Anti-Flag免疫磁珠

20565ES03/08

1 mL/5 mL

2485/9985

Anti-HA MagBeads

Anti-HA免疫磁珠

20566ES03/08

1 mL/5 mL

2485/9985

Anti-Myc MagBeads

Anti-Myc免疫磁珠

20567ES03/08

1 mL/5 mL

2485/9985

400-6111-883