标签抗体简介
标签抗体(Tag Antibody)可用于检测和纯化各种商品化表达载体上的标签序列,以分析检测目的蛋白的表达含量及其功能。其原理是抗原—抗体反应,这些标签抗体可以高度特异地结合对应的标签融合蛋白。以下简单列举几个常见的适合使用标签抗体结合的蛋白标签。
表1. 不同蛋白标签介绍
标签 |
序列 |
特点 |
适用场景 |
Flag |
DYKDDDDK |
1、分子量小,不改变融合蛋白的功能,比同类标签更具亲水性; 2、含有肠激酶识别位点(DDDDK),融合在目标蛋白N端便于去除标签 |
适用于真核表达系统低表达水平融合蛋白的纯化、检测 |
HA |
YPYDVPDYA |
源于流感病毒的红细胞凝集素表面抗原决定簇,避免用于凋亡细胞 |
蛋白的纯化、检测 |
Myc |
Glu-Gln-Lys-Leu-Ile-Ser- Glu-Glu-Asp-Leu |
来源于人类原癌基因Myc,避免用于人源细胞相关实验 |
一般不用于蛋白纯化,适用于检测 |
翌圣标签抗体亲和纯化产品选择指南
图1.标签抗体亲和纯化凝胶实验流程图
图2.标签抗体免疫磁珠实验流程图
翌圣标签抗体亲和纯化类产品,以高质量的鼠源IgG单克隆抗体为原料,通过供价偶联的方式将其定向、高效的偶联到琼脂糖基质上或纳米磁珠表面,不仅降低了蛋白的非特异性结合、实现了介质较高的抗体载量,同时也获得了适用于不同纯化要求的标签抗体纯化产品,涵盖不同标签抗体的纯化填料、免疫磁珠,方便使用手动或自动化方式纯化标签蛋白、免疫沉淀实验。
翌圣标签抗体纯化产品选购指南
产品系列 |
纯化树脂系列 |
免疫磁珠系列 |
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产品货号 |
20584ES |
20586ES |
20587ES |
20588ES |
20589ES |
20564ES |
20565ES |
20566ES |
20567ES |
产品名称 |
Anti-Flag亲和纯化凝胶 |
Anti-HA亲和纯化凝胶 |
Anti-Myc亲和纯化凝胶 |
Anti-V5亲和纯化凝胶 |
Anti-His亲和纯化凝胶 |
Anti-GFP免疫磁珠 |
Anti-Flag免疫磁珠 |
Anti-HA 免疫磁珠 |
Anti-Myc免疫磁珠 |
配基 |
高质量的鼠源IgG单克隆抗体 |
高质量的鼠源抗GFP/Flag/HA/Myc单克隆抗体 |
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蛋白结合量 |
≥1.1 mg Flag标签融合蛋白/mL凝胶 ≥1.5 mgHA标签融合蛋白/mL凝胶 ≥0.5 mg V5标签融合蛋白/mL凝胶 |
≥0.8 mg GFP标签融合蛋白/mL磁珠 ≥0.6 mg Flag标签融合蛋白/mL磁珠 ≥0.4 mg HA标签融合蛋白/mL磁珠 ≥0.5 mg Myc标签融合蛋白/mL磁珠 |
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基质 |
4%交联的琼脂糖凝胶 |
硅基磁珠 |
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平均粒径 |
45-165 µm |
200 nm |
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优势 |
非特异性结合低,高载量 |
高纯度,高载量,高特异性,配套磁力架使用方便 |
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推荐应用 |
任意规模标签融合蛋白纯化、免疫沉淀(IP) |
免疫沉淀(IP)、免疫共沉淀(COIP) |
产品性能
翌圣Anti-Flag亲和纯化凝胶(20584ES)与国外进口品牌S*纯化对比测试
图3.Yeasen(a) PK进口品牌S*(b) Anti-Flag凝胶对比测试跑胶图
M:蛋白Marker;1:Flag-N、M、C蛋白柱前原液;2:Flag-N、M、C蛋白柱后穿透;3:洗脱(pH2.7洗脱);4:洗脱(pH12洗脱)
下图中箭头所示为目的标签蛋白,磁珠直接煮沸从上到下的三条带依次为BSA、抗体重链和抗体轻链
图4. Anti-Flag免疫磁珠纯化flag标签蛋白效果图
1: 含Flag标签蛋白的大肠杆菌裂解液 10 μL; 2: 含Flag标签蛋白的大肠杆菌裂解液与磁珠孵育后的上清 10 μL;3: 含Flag标签蛋白的Anti-flag MagBeads直接煮沸 10 μL;4: Anti-Flag MagBeads直接煮沸;5:Marker
图5. Anti-GFP免疫磁珠纯化GFP标签蛋白效果图
1: 含GFP标签蛋白的大肠杆菌裂解液10 μL; 2: 含GFP标签蛋白的大肠杆菌裂解液与磁珠孵育后的上清10 μL;3: 含GFP标签蛋白的Anti-GFP MagBeads直接煮沸 10 μL;4: Anti-GFP MagBeads直接煮沸;5:Marker
产品信息
产品名称 |
货号 |
规格 |
目录价/元 |
Anti-DYKDDDDK(Flag)Affinity Gel Anti-Flag亲和纯化凝胶 |
1 mL/5 mL/ 25 mL |
1936/6236/ 27286 |
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Anti-HA Affinity Gel Anti-HA亲和纯化凝胶 |
1 mL/5 mL/ 25 mL |
4356/13756/ 62786 |
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Anti-Myc Affinity Gel Anti-Myc亲和纯化凝胶 |
1 mL/5 mL/ 25 mL |
4356/13756/ 62786 |
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Anti-V5 Affinity Gel Anti-V5亲和纯化凝胶 |
1 mL/5 mL/ 25 mL |
4356/13754/ 62786 |
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Anti-His Affinity Gel Anti-His亲和纯化凝胶 |
1 mL/5 mL/ 25 mL |
4354/13756/ 62786 |
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Anti-GFP MagBeads Anti-GFP免疫磁珠 |
1 mL/5 mL |
2485/9985 |
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Anti-DYKDDDDK(Flag)MagBeads Anti-Flag免疫磁珠 |
1 mL/5 mL |
2485/9985 |
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Anti-HA MagBeads Anti-HA免疫磁珠 |
1 mL/5 mL |
2485/9985 |
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Anti-Myc MagBeads Anti-Myc免疫磁珠 |
1 mL/5 mL |
2485/9985 |