Hifair® AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis Kit是基于Hifair® III 1st Strand cDNA Synthesis Kit开发的快速逆转录试剂盒,适用于PCR扩增以及RT-qPCR实验。与Hifair® III 1st Strand cDNA Synthesis Kit相比,具有稳定的检出率、特异性、产量保证,且反转录总时长最快可低于6分钟,大大缩短了实验时间。
Hifair® AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis Kit
※快速反转:最快5分钟左右即可完成第一链cDNA合成;
※检出率高:10 pg-1 ug的RNA检出率;
※高效合成:合成效率媲美进口,最长可合成14kb大小的片段;
※应用广泛:可用于下游PCR或qPCR,亦可调整引物保证small RNA等样本的反转录;
※示踪便利:示踪版包含无干扰、可视化蓝色示踪染料,提醒加样进度;
※稳定性好:试剂盒可4℃存放14天,反转产物可37℃保存7天,反复冻融50次。
图. 以293T细胞总RNA为模板,使用11149ES进行逆转录,得到的cDNA 进行qPCR 定量分析。结果显示,不同反转录时间处理的Ct值差值在0.2之内。说明产品可在5分钟内完成反转录,反转效果和长时间反转效果持平。
图. 以293T细胞总RNA为模板,使用11149ES进行逆转录,得到的cDNA 进行qPCR 定量分析。结果显示,RNA 投入量为10 pg-1 μg时,11149ES均可反转成功,保证定量结果。
图. 以293T细胞总RNA为模板,使用11149ES进行反转录,将得到的cDNA进行PCR检测。结果显示,11149ES能够满足合成1 kb-14 kb长度的cDNA, 后续PCR有一定的试用场景。若需要直接反转出10kb以上的片段,建议延长反转录时间至20-30分钟,以保证最终片段的获取。
图. 测试显示,加入一定量的示踪剂成分,未影响产品的反转录效率,Ct值、熔解曲线峰值和TM值未受到负面影响。
图. 以293T细胞总RNA为模板,使用-20℃、4℃、25℃、37℃下分别储存1、3、5、7天的11149ES进行逆转录,对得到的cDNA 进行qPCR 定量分析。结果显示,不同温度不同时间存放的试剂盒定量结果的△Ct均在0.3范围内(△Ct于±0.5以内,认为两者差异可忽略不计),具有良好的稳定性。
图. 以293T细胞总RNA为模板,使用11149ES、进口A品牌进行逆转录,其中11149ES不进行gDNA去除步骤,将得到的cDNA 进行qPCR 定量分析。结果显示,进口A品牌反转时间为13分钟, 11149ES反转时间为5分钟,不同产物定量显示,11149ES的Ct更小或者接近进口竞品,说明11149ES 5分钟反转效率优于或近似进口A品牌的反转录效率。
图. 以293T细胞总RNA为模板,使用11149ES、进口B品牌进行逆转录,其中11149ES不进行gDNA去除步骤,得到的cDNA 进行qPCR 定量分析。结果显示,进口B品牌反转时间为20分钟,11149ES反转时间为5分钟,不同量底物定量显示,11149ES的Ct更小或者接近进口B品牌,说明11149ES 5分钟反转效率优于或近似进口B品牌的反转录效率。
样本来源:菊花叶片
客户评价:与某进口品牌效果相似,扩增常规大小的片段效果不错。
样本来源:果*叶片
客户评价:蓝色很好看
样本来源:水稻
客户评价:与其他反转录试剂盒相比,节省加样时间,节省反转录反应时间(其他试剂盒需要15+2 min,本试剂盒只需5 min),后续基因克隆DNA电泳结果证明,本试剂盒反转效率更高,条带更亮,所以会更节省PCR使用试剂,节省成本。
方法 |
分类 |
产品名称 |
货号 |
qPCR染料法 |
高灵敏通用型定量预混液(染料法) |
Hieff UNICON® Universal Blue qPCR SYBR Master Mix |
11184ES |
超高性价比定量预混液 (染料法),已发文章累计IF达到5000+ |
Hieff® qPCR SYBR Green Master Mix (No Rox) |
11201ES |
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Hieff® qPCR SYBR Green Master Mix (Low Rox) |
11202ES |
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Hieff® qPCR SYBR Green Master Mix (High Rox) |
11203ES |
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高灵敏型qPCR预混液(染料法) |
Hieff UNICON® qPCR SYBR Green Master Mix (No Rox) |
11198ES |
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Hieff UNICON® qPCR SYBR Green Master Mix (Low Rox) |
11199ES |
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Hieff UNICON® qPCR SYBR Green Master Mix (High Rox) |
11200ES |
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miRNA qPCR加A法 |
Hieff® miRNA Universal qPCR SYBR Master Mix(加A法) |
11171ES |
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miRNA qPCR茎环法 |
Hieff® miRNA Universal qPCR SYBR Master Mix(茎环法) |
11170ES |
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RNA一步法RT-qPCR(染料法) |
Hifair® III One Step RT-qPCR SYBR Green Kit |
11143ES |
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细胞直接RT-qPCR(染料法) |
Hieff® Fast Cell Direct SYBR Green RT-qPCR Kit |
11172ES |
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反转录试剂 |
5 min快速反转,最长可满足14 kb cDNA合成,含gDNA去除(下游应用PCR/qPCR)New |
Hifair® AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis Kit |
11149ES |
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Hifair® AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis Kit(No Dye) |
11150ES |
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15 min一步完成gDNA去除与反转录(下游应用qPCR) |
Hifair® V one-step RT-gDNA digestion SuperMix for qPCR |
11142ES |
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高质量第一链cDNA合成预混液,含gDNA去除(下游应用qPCR)Hot |
Hifair® III 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR (gDNA digester plus) |
11141ES |
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最长可满足19.8 kb cDNA合成试剂盒,含gDNA去除(下游应用PCR/qPCR) |
Hifair® III 1st Strand cDNA Synthesis Kit(gDNA digester plus) |
11139ES |
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常规30 min反转预混液,含gDNA去除(下游应用qPCR) |
Hifair® II 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR (gDNA digester plus) |
11123ES |
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miRNA反转录试剂盒(加A法) |
Hifair® miRNA 1st Strand cDNA Synthesis Kit (加A法) |
11148ES |