Cas9核酸酶是一种引导RNA引导的核酸内切酶，可以催化双链DNA的裂解。这种靶向核酸酶是一种高精度的基因组编辑的有力工具。Cas9蛋白与CRISPR/Cas9系统的引导RNA（gRNA）成分形成一个非常稳定的核糖核蛋白（RNP）复合物。Cas9 RNP复合物可以在进入细胞后，通过添加一个N端核定位信号（NLS），增加入核效率。此缓冲液适用于NLS-Cas9-NLS Nuclease，NLS-Cas9-BPNLS Nuclease，NLS-Cas9-EGFP Nuclease，NLS-Cas9 Nuclease等Cas9核酸酶介导的体外DNA裂解反应。

可应用于：

通过体外DNA切割筛选高效和特异性靶向gRNA。

 

产品信息

货号	11365ES04
规格	1.5 mL

 

组分信息

组分编码	组分名称	11365S04
11365	10×Cas9 Nuclease 体外DNA切割反应缓冲液	1.5 mL

 

储存条件

-25~-15℃保存，有效期1年。

 

使用说明

体外DNA切割实验推荐反应体系

组分	20 μL反应体系
10×Reaction Buffer	2 μL
Substrate DNA	2 μL（80 ng/μL）
Cas9 Nuclease	2 μL-4 μL（25 ng/μL）
sgRNA	2 μL（50 ng/μL）
Nuclease-free water	To 20 μL

注意：

1. 溶液应充分混合，在37℃孵育1-2 h，然后加入1 μL的蛋白酶K（20 μg/μL），在55℃孵30 min孵育结束后，用琼脂糖凝胶电泳检测消化效率。
2. 此反应条件仅为推荐量，Cas9 : sgRNA的比例，一般建议1:2-1:5之间进行摸索。
3. 设计3-6条sgRNA，筛选效率最高的sgRNA。

 

注意事项

1. 本产品仅作科研用途。

2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

 

Ver.CN20230510