产品说明书
FAQ
COA
已发表文献
UCF.ME® Uracil DNA Glycosylase (UDG/UNG) 是经大肠杆菌表达纯化的重组蛋白，在25-37℃发挥活性。本品为超低背景菌残留控制的防污染UDG酶，能催化水解含有dU的DNA单链或双链的尿嘧啶碱基和糖磷酸骨架的N-糖苷键，释放游离尿嘧啶，由此产生的无碱基位点容易被水解断裂，可广泛应用于PCR、qPCR、RT-qPCR及RT-LAMP等常见分子生物学体系。
与Uracil DNA Glycosylase (UDG/UNG), 1 U/μL (Cat#14455ES) 相比，UCF.ME® Uracil DNA Glycosylase (UDG/UNG), 1 U/μL的宿主残留更低，适合对背景菌要求更为严格的应用场景，如病原微生物检测等。
产品组分
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编号 |
组分名称 |
产品编号/规格 |
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14454ES60 (100 U) |
14454ES76 (500 U) |
14454ES96 (10,000 U) |
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14454 |
UCF.ME® Uracil DNA Glycosylase (UDG/UNG), 1 U/μL |
100 μL |
500 μL |
10 mL |
产品应用
1. 去除含dU的PCR产物气溶胶污染。
2. 去除单链或双链DNA尿嘧啶碱基。
酶活定义
以25℃，30 min内完全降解1 μg含有尿嘧啶的dsDNA所需酶量定义为1个活性单位（U）。
失活方式
95℃，5~10 min。
运输储存方法
干冰运输。-25~-15℃保存，有效期2年。
注意事项
1. UDG酶在多数PCR或RT-PCR反应缓冲液中均有活性，但对于自行使用的PCR或RT-PCR体系，首次使用时建议先测试一下是否和所使用的体系兼容；
2. 酶使用时宜存放在冰盒内或冰浴上，使用完毕后宜立即放置于-20℃保存；
3. 本产品仅做科研用途；
4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
应用实例
1. 按下列体系配制PCR反应液：
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组分 |
体积（μL） |
终浓度 |
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10×PCR Buffer (Mg2+ Plus) |
5 |
1× |
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25 mM MgCl2 |
3 |
1.5 mM |
|
dUTP (10 mM) |
3 |
0.6 mM |
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dCTP / dGTP/ dATP/ dTTP (10 mM each) |
1 |
0.2 mM each |
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模板DNA |
Optional |
- |
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引物1 (10 μM) |
2 |
0.4 μM |
|
引物2 (10 μM) |
2 |
0.4 μM |
|
Taq DNA Polymerase (5 U/μL) |
0.5 |
0.05 U/μL |
|
UCF.ME® Uracil DNA Glycosylase (UDG/UNG), 1 U/μL |
1 |
1 U/50 μL |
|
ddH2O |
Up to 50 |
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【注】：根据实验需要，dUTP终浓度可在0.2-0.6 mM 之间调整。可选择性掺入0.2 mM dTTP。
2. PCR反应：
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反应温度 |
反应时间 |
循环数 |
目的 |
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25℃ |
10 min |
1 |
降解含U模板 |
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95℃ |
5~10 min |
1 |
UDG酶失活，模板预变性 |
|
95℃ |
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30-35 |
变性 |
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60℃ |
20 sec |
退火 |
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72℃ |
30 sec/kb |
延伸 |
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72℃ |
5 min |
1 |
终延伸 |
【注】：25℃反应时间可以根据实验需要在5-10 min内调整。
HB230222
