GW4869是一种具有细胞渗透性、非竞争性的N-Smase（中性鞘磷脂酶）抑制剂（外泌体抑制剂），IC₅₀值为1 μM。它对N-SMase具有选择性，在浓度高达150 μM时对酸性SMase没有抑制作用。它能阻断神经酰胺介导的多泡体萌芽从而抑制多泡体释放外泌体，是常用的抑制外泌体生成的药物。研究发现，GW4869在体内通过阻止外来体分泌减少淀粉样斑块形成，在达到抑制nSMase2引起的生理效应的浓度（即有效浓度）下，GW4869具有较少毒性。

 

产品性质

英文别名 (English Synonym)	GW 4869, GW 4869 hydrochloride hydrate
靶点 (Target)	neutral sphingomyelinase
通路 (Pathway)	Metabolic Enzyme/Protease--Phospholipase
CAS号 (CAS NO.)	6823-69-4
分子式 (Formula)	C30H30Cl2N6O2
分子量 (Molecular Weight)	577.50
外观 (Appearance)	粉末
纯度 (Purity)	≥97%
溶解性 (Solubility)	微溶于DMSO：＜0.2 mg/mL（如有必要，需加热，超声等辅助溶解）
结构式 (Structure)

 

运输和保存方法

冰袋运输。粉末直接保存于-20℃，有效期3年。建议分装后-20℃干燥保存，避免反复冻融，储存液-80℃保存，6个月有效；-20℃保存，1个月有效。

 

注意事项

1. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

2. 粉末溶解前请先短暂离心，以保证产品全在管底。

3. 请勿吸入、吞咽或者直接接触皮肤和眼睛。

4. 本产品仅用于科研用途，禁止用于人身上。

 

使用浓度

【具体使用浓度请参考相关文献，并根据自身实验条件（如实验目的，细胞种类，培养特性等）进行摸索和优化。】

 

使用方法（数据来自于公开发表的文献，仅供参考）

（一）细胞实验（体外实验）

先将MCF7细胞接种在10 mL含有10% FBS的RPMI 1640培养基中培养，待细胞数量在完全培养基中达到1.7 × 10⁶个/10-cm培养皿时，24 h后将培养基更换为7 mL含2% FBS和25 mM Hepes (pH 7.5) 的RPMI 1640培养基，在培养箱中孵育2 h。同时将GW6849用DMSO配制成1.5 mM储存液，储存于-80℃。在使用前，加入5% MSA到GW4869储存液中进行溶解，此时GW4869的浓度为1.43 mM。将悬浮液充分混合，并置于37℃加热，直至澄清。然后将GW4869抑制剂加入到细胞培养基中，工作液浓度范围：10-20 μM，处理细胞30分钟。^[2]

GW4869 (10-20 μM)抑制N-SMase，并不显著地破坏TNF诱导的NF-κB易位入核。通过检测核浓染、caspase激活、PARP的降解以及台盼蓝吸收发现，GW4869能以浓度依赖方式保护细胞免于死亡，同时显著抑制细胞色素C从线粒体中的释放以及caspase9的激活，因此N-SMase的激活应位于线粒体线粒体功能障碍的上游。^[2]

（二）动物实验（体内实验）

按大约1.25 mg/kg剂量的GW4869试剂，处理完全缺失nSMase2活性的小鼠（遗传背景：C57BL/6J小鼠），并不改变肝脏、心脏或骨骼肌中神经酰胺或鞘磷脂的含量，但减少了脑中神经酰胺的含量、增加了鞘磷脂含量。通过GW4869抑制nSMase2可延缓学习，在给小鼠使用GW4869后，没有减少其在反复训练后找到隐蔽平台的延迟，说明它们对应用空间线索进行导航的学习障碍。^[3]

 

参考文献

1.Dinkins MB, et al. Neurobiology of Aging. Exosome reduction in vivo is associated with lower amyloid plaque load in the 5XFAD mouse model of Alzheimer's disease. 2014, 35(8):1792-800.

2.Luberto C, et al. Inhibition of tumor necrosis factor-induced cell death in MCF7 by a novel inhibitor of neutral sphingomyelinase. J Biol Chem. 2002, 277(43):41128-39.

3.Tabatadze N, et al. Inhibition of neutral sphingomyelinase-2 perturbs brain sphingolipid balance and spatial memory in mice. J Neurosci Res. 2010, 88(13):2940-51.

 

客户使用本产品发表的科研文献（部分）

[1] Human Umbilical Cord Mesenchymal Stem Cell-Derived Exosomes Accelerate Diabetic Wound Healing via Ameliorating Oxidative Stress and Promoting Angiogenesis. Front Bioeng Biotechnol. 2022 Jan 31;10:829868. IF: 5.89

 

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