MolPure® Blood RNA Kit 血液RNA提取试剂盒

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产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

MolPure® Blood RNA Kit 适用于血液、血浆、血清、淋巴液等样品中 RNA 的提取。离心吸附柱中采用的硅基质材料为本公司特有新型材料,配合本公司独特的裂解液配方可以可最大限度的回收高纯度 RNA。提取的 RNA 纯度高,质量稳定可靠,可适用于各种下游应用实验,如 RT-PCR、RT-qPCR、体外转录、分子克隆等。

 

产品组分

类别

编号

组分名称

19241ES50(50 T)

Part I

19241-A

裂解液 LB (LB Buffer B3)

50 mL

 

 

 

Part II

19241-B

RNA 吸附柱 B3 (MolPure® RNA Column B3)

50 个

19241-C

2 mL 收集管 (2 mL Collection Tube B3)

50 个

19241-D

去蛋白液 PL (PL Buffer B3)

25 mL

19241-E

漂洗液 W* (Wash Buffer*)

12 mL

19241-F

RNase-free H2O

5 mL

 

运输和保存方法

常温运输。

Part I 组分 4℃避光保存,Part II 组分常温保存。产品有效期 12 个月。

 

注意事项

避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH 值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。

注意观察各溶液是否有析出或浑浊(尤其冬季等室温为低温环境时),可 37℃温浴复溶至溶液澄清,避免影响使用效果。

裂解液LB 和去蛋白液 PL 含有刺激性物质,为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

本产品仅作科研用途!

 

实验前准备

自备设备和试剂:台式离心机、振荡仪、水浴锅或金属浴,氯仿、无水乙醇,RNase-free 离心管等。

除特殊指明外,所有的离心步骤均在室温完成,使用可以达到 12,000 rpm 转速的传统台式离心机。

首次使用前,须在漂洗液 W*(19241-E)瓶中加入 4 倍体积的无水乙醇,充分混匀后使用,并做好标记。如果发现漂洗液 W*由于运输或保管不当造成容量严重不准,请用量筒定容后再加入 4 倍体积的无水乙醇。每次使用后将瓶盖盖紧,以保持漂洗液 W*中的乙醇含量。

 

操作方法

一、样本预处理:

250 μL 血液(或血清、血浆、脑脊液等液体样本)转移至 1.5 mL 的 RNase-free 离心管中。

【注】:不足 250 μL 时,需用 PBS 或生理盐水补足。

加入 750 μL 裂解液 LB,反复吹打,并剧烈振荡混匀。

室温静置 5 min。

加入 200 μL 氯仿(自备),剧烈振荡 15 sec 混匀。

室温静置 2 min。

4℃ 12,000rpm  离心 10 min,使样品分层。取上层水相转移至 1.5 mL 的 RNase-free 离心管中。

【注】:样品会分为三层,下层为有机相,中间层和上层无色的水相,RNA 存在于上层水相中。

【注】:上层容量约为所加裂解液 LB 总量的 70%。如加入 750 μL 裂解液 LB,上层水相约为 525 μL。建议吸取 500 μL, 以防吸到中间层造成 DNA 污染。

加入 0.5 倍体积无水乙醇(自备),颠倒混匀。

【注】:出现沉淀属正常现象。

二、RNA 提取:

RNA 吸附柱 B3 套入 2 mL 收集管中,备用。

将上述的预处理混合液加入到 RNA 吸附柱 B3 中,12,000 rpm 离心 1 min,弃掉废液。

加入 500 μL 去蛋白液 PL,12,000 rpm 离心 30 sec,弃废液。

RNA 吸附柱 B3 放回收集管,加入 500 µL 漂洗液 W*,12,000 rpm 室温离心 30 sec,弃废液。

【注】:确保漂洗液 W*已添加无水乙醇。

重复一遍步骤 4。

RNA 吸附柱 B3 放回收集管,空柱 12,000 rpm 室温离心 2 min,以除去残留的漂洗液 W*。

RNA 吸附柱 B3 放入新的 1.5 mL RNase-free 离心管中,在 RNA 吸附柱 B3 中央加入 30-50 µL RNase-free H2O,室温放置 2 min。然后 12,000 rpm 离心 1 min。收集滤液,即为 RNA 溶液。

【注】:可通过以下方式提高回收产量:①65℃预热 RNase-free H2O;②将 RNA 滤液再次上柱,室温放置 2 min 后,洗脱。

RNA 溶液可置于-80℃长期保存。

 

HB220112

 

400-6111-883