产品简介

核糖核酸酶A（Ribonuclease A，常用缩写RNase A），一种含4个二硫键的单链多肽，分子量约为13.7 kDa（氨基酸序列）。作为一种核糖核酸内切酶（endoribonuclease），特异性降解单链RNA上的胞嘧啶（C）或尿嘧啶（U）残基。具体来说，切割识别的是由某核苷酸上的5’-核糖和相邻的嘧啶类核苷酸3’-核糖上磷酸基团形成的磷酸二酯键，从而使得2’, 3’-环磷酸水解为对应的3’-核苷磷酸（比如，pG-pG-pC-pA-pG经RNase A切割产生pG-pG-pCp 和A-PG）。RNase A切割单链RNA活性最高，推荐工作浓度为1-100 μg/mL，兼容于各种反应体系。低盐浓度（0-100 mM NaCl），可用来切割单链RNA，双链RNA，以及RNA-DNA杂交形成的RNA链。然而，高盐浓度（≥0.3 M），RNase A仅特异性切割单链RNA。

核糖核酸酶A（RNase A）最常见的应用在于质粒DNA或基因组DNA制备过程中去除RNA，此制备过程中DNase酶活性的存在与否是需要重视的污染之一，可采用水浴煮沸这种传统方法来灭活DNase活性。另外，本品还可用于RNA酶保护分析、RNA序列分析等分子生物学实验。

 

产品信息

货号	10407ES60 /10407ES80 / 10407ES05/ 10407ES10
规格	100 mg / 1 g / 5 g /10 g

 

储存条件

冰袋运输。-25~-15℃干燥保存，有效期2年。

 

使用说明

【注】：此为RNase A储存液配制的常用方法之一，也可以根据实验室传统的方法，或者参考文献资料使用其他方法制备储存液（如直接溶于10 mM Tris-Cl, pH7.5；或者Tris-NaCl溶液）。

1）利用10 mM的醋酸钠（pH5.2）制备10 mg/mL 的RNase A 储存液；

2）100℃加热15 min；

3）冷却到室温，加入1/10体积的1 M Tris-HCl（pH7.4），调其pH至7.4（例如，5 mL 10 mg/mL的RNase 储存液加入500 μL 1 M Tris-HCl, pH7.4）；

4）分装于-25~-15℃℃冻存，可稳定保存长达2年。

【注】：在中性条件下煮沸RNase A溶液，会有RNase沉淀形成；在更低的pH下将其煮沸，如有沉淀可以观察到，可能由于蛋白杂质存在造成。煮沸之后若发现沉淀，可通过高速离心（13,000 rpm）去除杂质，然后分装冻存。

 

产品性质  

中文别名（Chinese Synonym）	核糖核酸 3’-嘧啶寡核苷酸水解酶；核糖核酸酶I；胰核糖核酸酶
英文别名（English Synonym）	Ribonuclease I；Pancreatic ribonuclease；Ribonuclease 3’-pyrimidinooligonucleotidohydrolase；RNase A；Endoribonuclease I
CAS号（CAS NO.）	9001-99-4
外观（Appearance）	白色冻干粉末
分子量（Molecular Weight）	~13.7 kDa（氨基酸序列）
最佳PH（Optimal pH）	7.6 (活性范围 6–10)
最适温度（Optimal temperature）	60℃（活力范围15-70℃）
激活剂（Activator）	钠盐、钾盐等
抑制剂（Inhibitor）	核酸酶抑制剂
失活方法（Inactivation）	加热不会失活，建议用离心柱或者酚氯仿抽提来充分去除
来源（Source）	牛胰腺
溶解性（Solubility）	溶于水（10 mg/mL）
干燥失重（Loss on drying）	≤5.0%
酶活力（Activity）	≥60 Kunitz units/mg
等电点（Isoelectric point）	9.6

 

注意事项

1）本品在生产过程中已经过相应方法去除DNase污染，对于常规质粒DNA或者基因组DNA抽提（不需要严格定量DNA水平）的应用，可不需要高温煮沸，直接配制母液即可。对于需要严格控制DNase酶残留的实验，建议高温煮沸或者购买DNase-free, protease-free的RNase A溶液（10 mg/mL）（货号：10405ES03）。

2）RNase A会强吸附在玻璃器皿上，建议溶液装到塑料离心管内。

3）对于同时操作完整RNA实验的研究人员，一定要谨防RNase A引入干扰试验结果的准确性。

4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

5) 本产品仅作科研用途！

 

Ver.CN20240703