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Endonuclease III(Nth)是克隆表达自大肠杆菌的 nth 基因的双功能 DNA 损伤修复酶。该酶兼具以下两种活性:
˙ N-糖基酶活性:识别并切除双链 DNA 中受损的嘧啶碱基,产生脱嘧啶(AP)位点;
˙ AP-裂解酶活性:在 AP 位点的 3´ 端进行切割,生成带有 5´ 磷酸基团和 3´ 开环糖的切口。Endonuclease III 可特异性识别并切除多种氧化性嘧啶损伤产物,包括但不限于:尿素、5,6-二羟基胸腺嘧啶、胸腺嘧啶乙二醇、5-羟基-5-甲基乙内酰脲、尿嘧啶乙二醇、6-羟基-5,6-二羟基胸腺嘧啶及甲基羟丙二酰脲。
| 来源 | 大肠杆菌重组表达,基因来源于Nth |
| 活性定义 | 1个单位(U)指在10 µL总反应体系,含10 pmol荧光标记寡核苷酸双链的1×Endonuclease Ⅲ反应缓冲液中,37℃ 条件下,1小时能切割1 pmol含一个AP位点的34 bp寡核苷酸双链所需要的酶量 |
| 浓度 | 10 U/μL |
| 纯度 | ≥95% |
| 标签 | 无 |
| 酶储存液 | 10 mM Tris-HCl,250 mM NaCl,1 mM DTT,0.1 mM EDTA,200 μg/mL BSA,50% Glycerol(pH7.4@25℃) |
| 1×Endo Ⅲ Reaction Buffer | 20 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA, 1 mM DTT, (pH 8 @ 25°C) |
| 反应条件 | 37°C反应1小时 |
| 失活条件 | 65°C反应20分钟 |
-25~-15℃储存,有效期2年。
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