——点亮您的印迹膜,一触即发!
产品概述
ECL试剂,即化学发光法辣根过氧化物酶(HRP)底物,是目前Western blotting检测中最为灵敏的试剂。目前市场上普通ECL试剂在使用过程中经常出现易淬灭、高背景、不稳定以及低丰度蛋白难以检测等问题,影响最终实验结果。
翌圣生物根据现状,集中免疫检测领域的优秀科研人员,在严格控制鲁米诺原料的基础上,不断改良增强剂和稳定剂配方,针对不同需求开发了4类ECL试剂,包含增强型、超敏型、持久型和最高灵敏度型产品,不仅可满足实验者对目的蛋白从低丰度到高丰度表达的检测要求,同时可在不影响实验的条件下,提高发光强度,使您获得的图像更加清晰。
卓越的灵敏度——皮克至低飞克级的抗原检测
更高的信噪比——精准发光底物,降低背景
更利节省抗体——优化底物系统,更高抗体结合力
高性价比——更高的性能,更低的价格
极佳的稳定性——新型氧化剂,4℃下稳定保存1年
产品原理
ECL试剂检测的核心原理为氧化反应发光:鲁米诺(lumino)作为发光底物的主要成分,在碱性条件下,通过辣根过氧化酶(HRP)催化,被H2O2氧化生成3-氨基邻苯二酸的激发态中间体,当其回到基态时发出光子,最大发射波长为425 nm,光子信号可通过X射线胶片或CCD成像仪被捕获。
选择指南
翌圣目前拥有的4种ECL产品,各具特色,能够完全满足用户的免疫印迹应用需求。
那么,您的实验应该选择哪一种产品呢?
表1. ECL试剂选择指南
Yeasen |
Enhanced ECL 增强型 |
Super ECL 超敏型 |
SuperDura 持久型 |
MaxiSignal 最高灵敏度型 |
适用样本 |
靶点丰度较高,常规蛋白样本 |
靶点丰度低,样本有限 |
靶点丰度较低,样本有限 |
靶点丰度极低,样品珍贵 |
检测灵敏度 |
中等皮克级 |
低皮克级 |
中等飞克级 |
低飞克级 |
信号持续时间 |
< 2 h |
< 12 h |
< 24 h |
< 8 h |
适用检测系统 |
所有试剂均适用X射线胶片,CCD成像仪 |
|||
一抗稀释浓度 |
1:1000-1:4000 |
1:1000-1:10,000 |
1:1000-1:50,000 |
1:5000-1:100,000 |
二抗稀释浓度 |
1:1000-1:4000 |
1:2000-1:10,000 |
1:50,000-1:250,000 |
1:100,000-1:500,000 |
推荐用膜 |
NC膜 |
NC膜或PVDF膜 |
NC膜或PVDF膜 |
NC膜或PVDF膜 |
存储稳定性 |
室温1年 |
室温1年 |
室温1年 |
4℃ 1年,室温半年 |
优势 |
同一级别灵敏度中信号最强 |
性价比最高,适用于多数WB实验 |
最长信号持续时间,极其适用于多次曝光 |
卓越灵敏度,极其适用于痕量蛋白检测 |
【注】:推荐抗体稀释浓度为抗体储液浓度为1 mg/mL时的稀释浓度。
产品应用
Yeasen ECL试剂对比其他品牌同级别产品具有更佳的使用效果.
图1. Yeasen ECL超敏型底物Super与品牌T同级别底物Pico检测效果比对
图2. Yeasen ECL最高灵敏度型底物MaxiSignal与其他品牌同级别底物West Femto检测效果比对
图3. Yeasen ECL持久型底物SuperDura与其他品牌同级别底物West Dura检测效果比对
客户好评
中国医学科学院药物研究所
图4. Yeasen ECL超敏型底物Super相对品牌M同级别底物Crescendo,检测灵敏度更高
中国药科大学
图5. Yeasen ECL超敏型底物Super相对品牌T同级别底物Pico,检测灵敏度更高,结果重现性更好
上海交通大学医学院
图6.使用Yeasen ECL增强型底物Enhanced检测目的蛋白,获得清晰锐利的条带
发表文献
[1] Wang Z, Liu C, Zhu D, et al. Untangling the co-effects of oriented nanotopography and sustained anticoagulation in a biomimetic intima on neovessel remodeling[J]. Biomaterials. 2020;231:119654. (IF:10.317)
[2] Shang J M , Ma S R, Zang C X, et al. Gut microbiota mediates the absorption of FLZ, a new drug for Parkinson’s disease treatment[J]. Acta Pharmaceutica Sinica B 2021;11(5):1213-1226. (IF:11.4)
价格优势
.
图7.Yeasen ECL产品与其他品牌同级别产品价格比对
常见问题
遇到的问题 |
原因分析 |
推荐解决方法 |
胶片出现反影 |
反应系统中HRP量过多 |
稀释HRP标记物 |
胶片出现棕色或黄色条带 |
||
荧光猝灭 |
||
操作时间过长,膜逐渐干掉 |
避免膜干掉 |
|
保鲜膜、显影液或定影液污染 |
养成良好的实验习惯 |
|
反应系统中HRP量过少 |
增加HRP标记物 |
|
胶片无条带显现或者信号较弱 |
转膜的效率低 |
提高转膜效率,用预染Marker判断。 |
抗原、抗体量少或不匹配 |
增加抗原/抗体量或选择合适抗原/抗体 |
|
X光胶片有问题 |
曝光后X光谱全黑(而非透明色),则表明胶片已完全曝光,使用新的X光片 |
|
显影/定影液有问题 |
可预先曝光一张胶片进行判断,如有问题当换用新的显影/定影液 |
|
反应系统中HRP量过多 |
稀释HRP标记物 |
|
高背景 |
一抗二抗浓度太高 |
降低抗体浓度,延长封闭时间 |
抗体未清洗干净 |
增加洗膜次数 |
|
封闭不完全 |
优化封闭条件 |
|
使用错误的封闭剂 |
使用其他的封闭剂 |
|
过度曝光 |
降低曝光时间 |
|
抗体特异性差 |
更换优质抗体 |
|
反应系统中HRP量过多 |
稀释HRP标记物 |
|
条带有空斑 |
抗原以及二抗的浓度过高 |
稀释样品重新跑胶,也可将混合好的显色液冰浴后,加到膜上即刻快速显色。 |
带型不规则 |
转膜有气泡或甲醇(对于PVDF膜)水化不均匀 |
优化转膜条件。 |
胶片出现斑点 |
HRP标记物聚集体 |
0.2μm膜过滤HRP标记物 |
非特异性条带 |
反应系统中HRP量过多 |
稀释HRP标记物 |
SDS引起蛋白非特异性结合 |
实验流程中不使用SDS |
|
抗体特异性差 |
更换优质抗体 |
|
封闭不足 |
增加封闭时间或使用其他封闭剂 |
订购信息
产品名称 |
货号 |
规格 |
价格 |
化学发光超敏显色试剂盒 |
36208ES60 |
100 mL |
395.00 |
36208ES76 |
500 mL |
1655.00 |
|
Enhanced ECL Chemiluminescent Substrate Kit 增强型ECL化学发光检测试剂盒 |
36222ES60 |
100 mL |
325.00 |
36222ES76 |
500 mL |
1255.00 |
|
SuperSignal SuperDura Extended Duration Substrate 持久性化学发光底物 |
36223ES10 |
10 mL |
267.00 |
36223ES60 |
100 mL |
1557.00 |
|
36223ES70 |
200 mL |
2857.00 |
|
36223ES76 |
500 mL |
5257.00 |
|
SuperSignal MaxiSignal Maximum Sensitivity Substrate 最高灵敏度化学发光底物 |
36224ES10 |
10 mL |
287.00 |
36224ES60 |
100 mL |
1757.00 |
|
36224ES70 |
200 mL |
3257.00 |
|
36224ES76 |
500 mL |
5857.00 |
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产品名称 |
货号 |
规格 |
价格 |
36243ES35 |
5×7英寸 |
129.00 |
|
36243ES58 |
8×10英寸 |
169.00 |
|
36209ES01 |
1盒(100片) |
223.00 |
|
36210ES01 |
包 |
23.00 |
|
36211ES01 |
包 |
23.00 |
|
36206ES60 |
100 mL |
147.00 |
|
36206ES76 |
500 mL |
538.00 |