血清,常见的有小牛血清,新生牛血清,胎牛血清等,随着所培养的细胞不同,适配的血清种类也不一样。其中,胎牛血清(FBS)取自胎牛,牛龄最小,比起其他血清, 胎牛血清生长因子含量高,γ球蛋白和补体蛋白含量少,使胎牛血清更适合促进各种各样的细胞生长,降低培养中的哺乳动物细胞结合或裂解的可能性。
胎牛血清(FBS)在生物医学研究和工业生产中起着关键性的作用,是科研和工业研究人员广泛用作细胞培养中的重要产品,为细胞生长提供丰富的蛋白质、生长因子、激素等各种营养物质,是细胞培养中不可或缺的成分。但是,目前市场上血清种类琳琅满足,品牌应接不暇,质量参差不齐,如何选择血清就是个犯愁的问题,也是个很重要的工作。
纯净的来源,稳定的性能,严格的生产工艺是决定血清能否成功培养细胞的关键,下面从围绕血清的一些关键影响因素出发,建议可以主要从以下几点来挑选血清:
血清的来源
血清的来源直接影响其质量。优质的血清应来自健康的、无特定病原体的动物群。优质的胎牛血清应完全来源于健康的胎牛,无其他杂质成分,产地可追溯,来源稳定,渠道正规。
性能的控制
血清的性能包括内毒素水平、血红蛋白含量、微生物病原体检测、支原体检测、pH值等各种检测项目,优质的供应商会对这些检测项目进行严格的质量控制,并且每批次血清都提供含这些检测项目的质检报告(COA),证明其符合质量标准。
血清的稳定
不论是科研还是工业生产,为了实验或生产的一致性和可持续性,都需要稳定的血清,一是稳定的数量,二是稳定的品质。因此能否具有稳定长期供应能力,并且供应血清批次差异小是非常重要的考察点,它是培养细胞能否维持稳定性能的一个重要影响因素。优质的供应商有全自动一体化管理流程和设备,每批次可重复性强,产能大,最大程度的避免人工或者其他所带来的差别影响。
血清的纯度
血清中的蛋白质、生长因子、激素等含量对细胞培养非常重要。优质的胎牛血清是纯天然的制品,不含任何人为添加成分,含多种生长因子,组分一致,纯度高,内毒素含量尽可能低,减少对细胞的潜在毒性,细胞培养状态稳定。
售后的支持
优质的血清供应商不仅提供高质量的血清,还提供优质的客户服务。任何产品都有可能会遇到各种各样的问题,因此优秀的技术服务也是非常重要的,包括但不限于售前产品咨询解答、技术问题解答、售后支持和问题解决处理等等。
简而言之,血清的质量会直接影响细胞培养的效果,并最终影响科研和生产的效率和质量。优质的血清对于确保科学研究和工业生产的成功是至关重要的,所以我们在选择血清时可以着重从以上几点来考察,为我们挑选到优质的血清大大助力。
Yeasen特级胎牛血清全自动化罐装,规范化生产,严格质检,内控各种规范化的质量文件和资料,获得多家知名高校和研究院的认可,细胞培养效果经多方验证,媲美知名一线品牌同类产品。Yeasen特级胎牛血清源自南美唯一被认可的可出口中国牛血清的国家——乌拉圭,进口的品质,国产的价格,为客户提供高性价比优质血清。
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兼容范围广:适用于多种常规细胞培养;
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产品纯天然:对标进口胎牛血清,营养丰富,不含任何人为添加成分;
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细胞状态好:多种生长因子,批次稳定,细胞培养状态稳定;
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小规格便利:提供50 mL便携装,即用即取,避免反复冻融,避免沉淀产生,避免分装污染,方便快捷,产品升级不加价;
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0.1 μM:经过三次0.1 uM无菌过滤,有效去除微生物,通过支原体和病毒筛查检测;
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≤5 EU/mL:内毒素含量低,完全符合国家质量标准;
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4000+ :使用课题组数多达4000+,如中科院上海生命科学研究院,清华大学,浙江大学,上海交通大学等各大高校和研究院;
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1000+ :客户发表的文章引用影响因子累计高达1000+。
RAW264.7细胞
Yeasen 对照Brand A
293T细胞
Yeasen 对照Brand A
HeLa细胞
Yeasen 对照Brand A
HCC1937细胞
Yeasen 对照Brand A
293V细胞
Yeasen 对照Brand A
Q 1:不同品牌/批次血清的如何替换?
A 1:
方案一:逐步替换(推荐)
(1)替换原则:以原血清为主,用新血清逐级稀释,直至完全替代。
(2)血清级别:尽量保证是同一级别血清。
(3)稀释比例:新血清按照25%→50%→70%→100%的占比逐步替换原血清,中间实时观察细胞状态,待细胞状态稳定后再进行新的比例替换。
(4)细胞密度:保证细胞处于对数增长期,按照1:2或者1:3的传代,维持较高的细胞密度。
方案二:直接替换
对于适应性强的细胞可以采用新血清直接替换原血清的做法,如果替换后细胞不能适应,请参考方案一。
Q 2:如何正确解冻血清?
A 2:
方案一:(推荐)
将血清从-20℃存储条件下取出,放置于2-8℃冰箱中过夜,使其部分溶解,然后在室温条件下使其全部融解,溶解过程中须不时的摇动瓶身混合里面的液体。建议采取此种方式解冻更优。
方案二:
直接将血清从-20℃取出后,放置于37℃水浴中,不断摇晃瓶身使其加快解冻和混合。解冻以后不要在37℃水浴放置太长时间。
【注】 如果不晃动瓶身,当温度超过40℃的时候沉积在瓶底的物质有可能会发生蛋白变形,出现沉淀。如果出现沉淀,建议可将血清分装到无菌离心管中,400~600 g(如500 g)离心5 min,取血清上清液,加入到基础培养基中,再一起过滤,全程保证无菌环境即可。
Q 3:血清是否需要灭活?
A 3:对于大多数细胞的培养而言,是不需要的加热灭活的。但在免疫学研究、胚胎干细胞(ES细胞)培养、昆虫细胞和平滑肌细胞培养时推荐使用灭活血清。加热血清可以灭活血清中被激活的补体,但同时也会破坏热不稳定的蛋白。热灭活血清对细胞的生长只有微小的促进作用,甚至会因为灭活不当,破坏血清的品质,而抑制细胞的生长。
Q 4:血清灭活的方式有哪些?
A 4:按照正确的解冻方式完全解冻血清,使其恢复到室温。将血清分装成50 mL进行灭活(我们提供50 mL的小规格包装:40130ES50)。对于一次需要灭活500 mL的操作,可以将一个相同体积的容器放置在水浴锅中,中间插入温度计,作为参考。当温度达到56℃时,加热30 min进行灭活。
【注】在血清的加热和灭活过程中需要不断地进行摇晃混匀。
Q 5:血清中含有的絮状沉淀是什么?这些沉淀是染菌了吗?影响实验吗?
A 5:正常血清有时候会出现一些絮状的沉淀,这些絮状物一般是纤维蛋白和脂蛋白的沉淀,不是染菌,不会影响血清的品质,也不会影响细胞培养的效果,对实验几乎是没有影响的。如果需要,可以采取400~600 g(如500 g)离心5 min去除,取血清上清液,加入到基础培养基中,再一起无菌过滤。
产品名称 |
产品货号 |
规格 |
40130ES50 |
50 mL |
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40130ES76 |
500 mL |
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40131ES76 |
500 mL |
应用分类 |
产品名称 |
产品货号 |
规格 |
消化——胰酶 |
PerfCell™ Trypsin-EDTA (0.25%), phenol red胰酶-EDTA溶液(0.25%),含酚红 |
40127ES60 |
100 mL |
添加剂——双抗 |
Penicillin-Streptomycin(100×),Suitable for Cell Culture 细胞培养用青霉素-链霉素(双抗) |
60162ES76 |
100 mL |
培养基 |
41401ES76 |
500mL |
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41402ES76 |
500mL |
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细胞抗性筛选 |
60220ES03/08 |
1 g/5 g |
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60224ES03/10 |
1g (20mL)/ 10×1g(20mL) |
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60209ES10/50 |
1×1 mL/5×1 mL |
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60218ES10/50 |
10 mg/5×10 mg |
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支原体检测 |
40601ES10/20 |
10 assays/20 assays |
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MycAway™ Plus-Color One-Step Mycoplasma Detection Kit 一步法快速支原体检测试剂盒 |
40612ES25/60 |
25T/100T |
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支原体去除 |
40607ES01/03/08 |
100Μl/1mL/5×1mL |
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支原体预防 |
40608ES03/08 |
1mL/5×1mL |
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细胞增殖/毒性检测 |
40203ES |
100T~10000T |