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产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格（元） |
Hieff® Multiplex PCR Master Mix | 13280ES60 | 100 T | 875.00 |
Hieff® Multiplex PCR Master Mix | 13280ES76 | 500 T | 3165.00 |
产品描述
本产品适用于多重PCR实验。Hieff® Multiplex PCR Master Mix为多重PCR酶制剂与扩增缓冲液的2×预混液，可以快速便捷地用于PCR反应，具备高均一性、高特异性和高灵敏度的特点，可以对20对及以上的引物进行特异、均一地进行扩增反应。
产品组分
组分编号 | 组分名称 | 产品编号/规格 | |
13280ES60 (100T) | 13280ES76 (500T) | ||
13280-A | Hieff® Multiplex PCR Master Mix | 2×1.25 mL | 10×1.25 mL |
运输与保存方式
冰袋运输。-20℃储存，有效期1年。
反应体系
组分 | 体积 μL | 终浓度 |
Hieff® Multiplex PCR Master Mix | 25 | 1× |
Primer mix | x | 0.1 μM-0.5 μM |
模板DNA | DNA总量：1 ng-200 ng | - |
无菌超纯水 | up to 50 | - |
【注】：
1）上表中DNA量和引物浓度均为推荐浓度，可根据具体实验情况进行调整最适浓度。
2）每条引物的浓度可在0.1 μM-0.5 μM范围内进行调整。
3）Hieff® Multiplex PCR Master Mix中已经包含扩增所需要的酶、dNTP、盐离子等，无需额外添加。
扩增程序
循环步骤 | 温度（℃） | 时间 | 循环数 |
预变性 | 94 | 1 min | 1 |
变性 | 94 | 30 sec | 15-45 |
退火 | 50-60 | 60 sec | |
延伸 | 72 | 60 sec/kb | |
终延伸 | 72 | 10 min | 1 |
【注】：
1）在PCR仪上设置上表中的反应程序进行多重PCR反应（设置热盖温度至105℃左右）。
2）使用本产品获得的扩增产物无需添加上样缓冲液，可直接上样用于电泳检测。
3）延伸时间以最长扩增片段为准，可适当延长延伸时间，但要避免过长时间的延伸带来的非特异性扩增。
实验案例分享
以人基因组DNA为模板，使用10对引物进行多重PCR反应，分别扩增97 bp、139 bp、181 bp、212 bp、268 bp、331 bp、415 bp、507 bp、741 bp和1172 bp的目的片段。
反应体系配制
组分 | 体积 （μL） | 终浓度 |
Hieff® Multiplex PCR Master Mix | 25 | 1× |
Primer mix | x | 0.1 μM-0.5 μM |
模板DNA | DNA总量：1 ng-200 ng | - |
无菌超纯水 | up to 50 | - |
扩增程序
循环步骤 | 温度（℃） | 时间 | 循环数 |
预变性 | 94 | 1 min | 1 |
变性 | 94 | 30 sec | 35 |
退火 | 60 | 60 sec | |
延伸 | 72 | 60 sec/kb | |
终延伸 | 72 | 10 min | 1 |
电泳检测
2%琼脂糖凝胶；电压130 V；电泳时间30 min。
实验结果
M：100 bp DNA ladder
Lane1-2：10重PCR产物
HB200511
