E. coli DNA ligase可以催化相邻DNA链的5’-PO₄末端与3’-OH末端形成磷酸二酯键，对平末端底物DNA几乎无明显连接活性。其反应的最适pH为7.5-8.0（Tris-HCl buffer），反应需NAD作为辅酶。与T4 DNA Ligase可连接粘性末端和平末端相比，本酶只能催化突出末端DNA之间的连接，但如果在PEG及高浓度一价阳离子存在的条件下，也能连接平滑末端的DNA。另外，本款产品不能催化DNA与RNA以及RNA之间的连接反应。

该酶可以用于NGS甲基化建库中进行连接反应，另外也可以用于Okayama-Berg法克隆cDNA。

 

产品组分

组分编号	组分名称	产品编号/规格
		14956ES60	14956ES03	14956ES10
14956-A	E. coli DNA ligase (100 U/μL)	100 μL	1 mL	10 mL

 

单位定义

 

在20 μL的连接反应体系中，6 μg的 λ DNA-Hind III 在16℃下反应30分钟时，有90%以上的DNA片段被连接所需要的酶量定义为一个活性单位（U）。

 

运输和保存方法

冰袋运输。-20℃保存，有效期2年，避免反复冻融。

 

注意事项

1）Buffer 在融解时，如果出现少量沉淀属正常现象，请颠倒混匀后使用。

2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

3）本产品仅作科研用途！