产品描述
细胞裂解后的蛋白粗提物中含有大量的内源性蛋白酶,这些酶可以降解细胞提取物中的蛋白。因此为了防止蛋白纯化过程中目的蛋白不受蛋白酶的破坏,需要加入蛋白酶抑制剂对其进行活性抑制。
本品是多种常见蛋白酶抑制剂的混合物,包含AEBSF、Aprotinin、Bestatin、E-64、Leupeptin、Pepstatin A多种成分,广谱抑制来源于动植物、细菌、酵母等组织或细胞内的多种蛋白酶,如丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、氨肽酶、酸性蛋白酶等。另外,本品不含EDTA(一种金属蛋白酶抑制剂),特别适用于活性中心为金属离子依赖的蛋白。兼容于后续的固定化金属离子亲和层析(Immobilized metal-chelate affinity chromatography, IMAC)、2D凝胶电泳以及天然凝胶电泳等蛋白分析实验。
本品以片剂形式装于玻璃瓶内,单片可用于10 mL的细胞或组织裂解液。
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使用方法
1)取单片蛋白酶抑制剂片剂于10 mL溶液中;
2)溶解1 min,漩涡混匀即可。【注】:充分溶解后的溶液可能呈现微弱的浑浊,此现象正常。
运输和保存方法
室温运输。4℃保存,至少1年有效。其蛋白酶抑制溶液可于4℃稳定保存至少2周。
注意事项
1)本品具有广谱的蛋白酶抑制活性,但是不具有磷酸酶抑制剂活性。若进行磷酸化蛋白的研究,可使用我司的磷酸酶抑制剂混合物(100×)(货号:20110ES03)。
2)该蛋白酶抑制剂片剂在室温放置过久可能会引起变色。
3)本品可制备10 mL 1×蛋白酶抑制剂,对某些含有特别高浓度蛋白酶的样本可能需提高终浓度到2×或3×。
4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
5)本产品仅作科研用途!
可能遇到的问题
问题 |
可能的原因 |
解决方案 |
抑制效果不佳 |
样品含有较高的蛋白酶 |
溶解该蛋白酶抑制剂片剂时提高其浓度 |
该片剂对特定的蛋白酶家族没有较好的抑制效果 |
该片剂中不包含该家族蛋白酶抑制剂组分 |
向蛋白体系中加入抑制该家族蛋白酶的抑制剂 |
起到抑制该家族的蛋白酶抑制剂组分浓度较低 |
溶解该蛋白酶抑制剂片剂时提高其浓度 |
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